ESTUDIOS SOBRE EL EFECTO DE POLÍMEROS HIDROFÍLICOS EN PROPIEDADES

FISICOQUÍMICAS DE ITRACONAZOL COCRYSTALS

1. Introducción

Se investiga que el 40% de los nuevos ingredientes farmacéuticos activos son poco solubles en
agua, lo que afecta significativamente la biodisponibilidad [1]. Las moléculas de fármaco sólido
están disponibles en formas cristalinas o amorfas, y debido a la inestabilidad de muchos
materiales amorfos, el estado cristalino es más preferido. Los medicamentos pueden formularse y
estar disponibles en diferentes polimorfos con diferentes empaquetamientos o conformaciones de
cristal a través del conocimiento detallado del diseño y selección del sistema multicomponente. El
complejo o cristal molecular se engloba dentro del concepto amplio de ingeniería cristalina que
ayuda a superar la solubilidad y la estabilidad de las propiedades API y de estado sólido. En la
forma de dosificación tradicional, la forma sólida (fármaco y excipientes) puede tener diferentes
materiales o propiedades a granel como consecuencia de notables diferencias fisicoquímicas
estructurales. Estas propiedades pueden afectar profundamente la estabilidad, biodisponibilidad y
factibilidad de fabricación de la forma de dosificación ya que la interacción de los excipientes del
fármaco puede conducir a deformidades en la calidad del producto [2].

Itraconazol (ITZ) es un agente antifúngico triazólico y una base débil (Mw = 705.6 g / mol, pKa = 2 y
3.7, log P = 6.2) con una solubilidad acuosa extremadamente baja (≌5 μg / mL a pH 1 and≌1 ng /
mL a pH 7) y alta permeabilidad [3]. Se ha utilizado contra la histoplasmosis, la blastomicosis, la
meningitis criptocócica y la aspergilosis [4]. La ITZ es bien tolerada en dosis inferiores a 200 mg /
día. La absorción oral de ITZ es variable. Tiene una vida media de eliminación de 30-64 h. La
biodisponibilidad oral absoluta de ITZ es del 55% y la unión es aproximadamente del 99,8% [5].

El enfoque actual de investigación farmacéutica en ITZ como molécula de fármaco modelo

utilizado para ilustrar la fuerza o debilidad de un determinado enfoque para mejorar su solubilidad
y biodisponibilidad [3]. Con la debida consideración de su Tg relativamente baja, algunas
investigaciones han informado sobre la formulación de dispersiones sólidas (SD) de ITZ cristalina.
Con el fin de mejorar la absorción de la API y mantener la forma cristalina y la estabilidad, el
enfoque de cocristalina farmacéutica se ha evaluado en la formulación de ITZ. Las fases cristalinas
de ITZ se pueden diseñar mediante la introducción de moléculas adicionales para que coincidan
con los donantes y aceptores de enlaces de hidrógeno. Una serie de co-cristales farmacéuticos
estables de ITZ y 1, 4- ácidos dicarboxílicos se sintetizaron y se caracterizaron cristalográficamente
[6]. La sal de ditosilato de ITZ mediante el uso de ciclodextrinas había reportado un aumento en la
velocidad de disolución en un 13% hasta 30 min en comparación con la ZIT pura [7].

Para la mejora de la velocidad de disolución, los métodos de ingeniería de cristales y formación de

sales se emplearon con éxito para ITZ al nivel en comparación con la disolución de la forma
amorfa. Las sales de ITZ mostraron una mejora en la velocidad de disolución, pero también son
susceptibles a la humedad a una humedad relativa superior al 70%, mientras que los co-cristales
exhiben una buena estabilidad y propiedades de disolución mejoradas [7]. La revisión bibliográfica
revela un mecanismo de cocristalización, métodos de preparación y evaluación, pero hay muy
pocos informes sobre la cocristalización en presencia de polímeros. La presente investigación se
ocupa de la cocristalización de ITZ con ácido succínico mediante una técnica basada en disolventes
utilizando tetrahidrofurano (THF) como disolvente, para comprender la influencia de eudragit
RLPO, hidroxipropil metil celulosa (HPMC K100M), Ppolyvinylpyrollidone (PVP K30) y
polietilenglicol (PEG4000)) sobre la modificación en estado sólido, solubilidad y velocidad de
disolución de los co-cristales de ITZ y para evaluar la interacción de estos polímeros con co-
cristales mediante diversos métodos de análisis instrumentales.

2. Materiales y métodos

2.1. Materiales

Itraconazol se obtuvo como una muestra de regalo del Centro de Investigación Glenmark,
Mumbai. El ácido succínico y PVP K30 se compraron en Research Lab-Mumbai. Eudragit RLPO fue
una muestra de regalo de Degussa Pharma Pvt. Ltd. Mumbai. PEG4000, HPMC K100M,
tetrahidrofurano (THF) y dimetilsulfóxido se obtuvieron de Loba Chemie Mumbai. Los otros
solventes y reactivos eran de grado analítico.

2.2. Formulación de cocristales

Los cocristales se prepararon mediante la técnica de evaporación del disolvente, ITZ (1 mmol),
formadores de co-cristal, es decir, ácido succínico (1 mmol) se disolvió en 25 ml de THF con
sonicación. La solución saturada se mantuvo durante la noche para evaporar el disolvente, los
cristales obtenidos se dejaron secar al aire. Se prepararon otros lotes con la adición de polímeros
como Eudragit RLPO, PVP K 30 , PEG 4000 y HPMC K 100 M como se muestra en la Tabla 1 .
También se prepararon mezclas físicas de los mismos [8,9] .

Tabla 1. Lotes de formulaciones de cocristales usando la técnica de evaporación del disolvente.

2.3. Predicción teórica de la formación de co-cristal mediante el uso de parámetros de
solubilidad

Los parámetros de solubilidad se pueden calcular utilizando el método de atracción molar de Hoy,
el sustituyente de Fedor y las constantes de Van Kreevalen. Los pasos básicos en el método de
Fedor son abrir los anillos y tratar la estructura resultante como un compuesto de cadena abierta.
Luego se aplican las constantes de sustituyente informadas aproximadas. Estos se suman y el
parámetro de solubilidad se calcula como la raíz cuadrada de la suma de energía de las constantes
de los sustituyentes de mezcla dividida por la suma de las constantes de los sustituyentes de los
volúmenes molares. "El procedimiento de Hoy expresó la relación entre la constante de atracción
molar y el volumen molar. Los valores Δ resultantes del fármaco y los co-formadores se comparan
y se expresa su miscibilidad en estado sólido "[10-13].

2.4. Solubilidad de saturación del fármaco y co-cristales preparados en SGF de fluido gástrico
simulado (pH 1.2) y en agua destilada (D / W)

Se colocó una cantidad en exceso de ITZ o co-cristales preparados en los viales que contenían 10
ml de diferentes disolventes como fluido gástrico simulado sin enzimas y agua destilada (SGF y D /
W). Los viales se agitaron en un agitador de incubadora (100 rpm / min ) durante 24 ha
temperatura ambiente (RT). La solución se filtró a través de un filtro de papel whatmann de 0,45
μm y después de diluciones adecuadas, el fármaco solubilizado se analizó
espectrofotométricamente (espectrofotómetro UV Shimadzu 1800) a 254 nm [14].

2.5. Determinación del contenido de drogas antes y después de 45 días

Para la determinación del contenido de fármaco, los cristales co-preparados (10 mg) se trituraron
con SGF (pH 1,2) y finalmente el volumen se completó hasta 100 ml con el mismo. Las soluciones
se filtraron a través de una membrana (0,45 μm) y se analizaron espectrofotométricamente a 254
nm para el contenido del fármaco después de una dilución suficiente con SGF (pH 1,2) [14].

Para estudiar la estabilidad de los cocristales, las muestras representativas se colocaron en viales
de vidrio herméticos de color ámbar y se almacenaron a temperatura ambiente durante 45 días.
Después de un período de 45 días, las muestras se retiraron y se evaluó el contenido de ITZ.

2.6. Espectroscopia infrarroja

La espectroscopía IR se realizó usando el Espectrofotómetro Miracle 10 Shimadzu y el espectro se

registró en la región de longitud de onda de 4000-400 cm-1. El procedimiento consistió en
dispersar una muestra (fármaco solo o co-cristales preparados) en KBR y comprimir en discos
aplicando una presión de 5 t durante 5 minutos en una prensa hidráulica. El sedimento se colocó
en la trayectoria de la luz y se registró el espectro.

2.7. Calorimetría diferencial de barrido (DSC)

DSC se realizó utilizando el calorímetro SDT Q600 V20.9 Build 20 para estudiar el comportamiento
térmico del fármaco solo y co-cristales preparados. Las muestras se calentaron en cubetas de
aluminio herméticamente selladas bajo flujo de nitrógeno (20 ml / min) a una velocidad de barrido
de 10 ° C / min de 0 ° C a 400 ° C.
2.8. Estudios de difracción de rayos X (P-XRD)

Para el análisis de fase cualitativa, se utilizó el método XRPD convencional. El difractómetro de

rayos X phaser D2 equipado con el detector LYNXEYE (TM) y la radiación K filtrada del tubo de Cu a
10 mA y 30 kV se utilizó para el análisis de fase cualitativa. El análisis de fase cualitativa de rutina
se realizó mediante la comparación de los patrones de XRPD de fármaco puro con las nuevas
formas de estado sólido. Diffrac.measurement center y EVA software para la recopilación de
datos. Se colocó aproximadamente 1 mg del polvo en un portamuestras. Los parámetros del
instrumento fueron los siguientes: Fuente de alimentación de 90-250 V, 50-60 Hz. Radio del
colimador, 93 0.3 mm; distancia del detector, 25 cm; tiempo de exposición, 12 min; y rango de
exploración, 2θ: -3 a 160 °.

2.9. Fotomicrografías de cocristales

Las fotomicrografías de ITZ pura, ácido succínico, HPMCK100M, PEG4000, PM1, PM6, PM7, F1, F6,
F7 se tomaron usando la cámara lucida con un aumento de 10X. La pizca de formulaciones en
polvo se roció sobre el portaobjetos de vidrio y las fotografías se tomaron con un aumento de 10X
para leer la morfología de las formulaciones.

2.10. Estructuras propuestas de cocrystals

Las estructuras propuestas de cocrystals se desarrollaron usando el software Chemsketch. Se

requiere una comprensión exhaustiva de la estructura de los formadores de API y cocristal para
localizar correctamente los sitios de enlaces de hidrógeno.

2.11. Estudios de disolución in vitro de cocristales

Los estudios de disolución in vitro de ITZ solo y de co-cristales preparados se realizaron por
triplicado usando un aparato de prueba de disolución de tipo II de USP de ocho estaciones. Se
usaron muestras de polvo equivalentes a 200 mg de ITZ. Los perfiles de disolución de ITZ, sus
formulaciones de co-cristal y las mezclas físicas se determinaron en 900 ml de SGF (pH 1,2). El
medio de disolución se mantuvo a una temperatura constante de 37 ± 0,5 ° C. Las muestras se
retiraron periódicamente y mantuvieron la condición del sumidero. Las muestras se filtraron a
través de papel de filtro whatman, se diluyeron y se analizaron a 254 nm mediante el uso de
espectrofotómetro UV Vis (JASCO V-530, Japón) [3].
3. Resultados y discusión

3.1. Análisis teórico de la formación de cocristales mediante el uso de parámetros de solubilidad

El hecho de que la mayoría de los sistemas de fármaco / co-exfoliante con δ <7MP0.5 o 5 MP

mostró una depresión eutéctica / de punto de fusión indica que la miscibilidad predicha por
Greenhalgh se correlacionaba bien con la determinada por DSC. Estas dos condiciones están
cumpliendo el sistema propuesto debe ser co-cristal. En los estudios DSC de ITZ, los cristales co-
ácidos succínicos mostraron depresión en el punto de fusión, mientras que la diferencia en los
valores δ se encontró por debajo de 5 y el complejo preparado se puede denominar como co-
cristales. Pero, si esta diferencia en el valor de δ está por encima de 5, indica que no hay
formación de co-cristales teóricamente. La ITZ y el ácido succínico mostraron teóricamente la
formación de cocristales por el método de Hoy [10-13].

3.2. Estudios de solubilidad de saturación del fármaco y co-cristales preparados

La Tabla 2 ilustra que la formación de co-cristales mejora significativamente la solubilidad de ZIT

en SGF. La solubilidad de ITZ fue de aproximadamente 10.84 μg / ml. Mientras tanto, los co-
cristales ITZ eran tres veces más solubles que su forma pura.

Tabla 2. Análisis de solubilidad de muestras en agua destilada y SGF de pH 1.2.

La tabla de arriba indica que la formulación F6, F7 y la mezcla física PM7 mostraron una mejora en
la solubilidad en comparación con F1 y PM1. Esto se debió a la adición de polímeros [15, 16]. Por
lo tanto, estos lotes se seleccionaron como lotes optimizados para una caracterización adicional.

3.3. Determinación del rendimiento porcentual, contenido de fármaco de los co-cristales

después de 45 días

Los co-cristales se preparan por el método de evaporación del solvente. El porcentaje de

rendimiento de los co-cristales preparados se obtuvo en el rango de 88-97%. Los cocristales se
evalúan para determinar el contenido de fármaco después de la preparación y después del
almacenamiento durante 45 días. Los cocristales se observan visualmente en cuanto al color, el
olor, la apariencia y el contenido de fármaco de ITZ. No se observó ningún cambio considerable
entre dos resultados como se muestra en la Tabla 3.

Tabla 3. Rendimiento porcentual y contenido de fármaco de formulaciones de cocristalino

preparadas antes y después de los estudios de estabilidad.
3.4. Espectroscopia infrarroja

La posible interacción entre el fármaco y los formadores de co-cristal se estudiaron mediante

espectroscopía FTIR. Se observaron picos prominentes en el rango de 1600-1700 cm-1, lo que
indica la presencia de estiramiento C = O, que es una característica peculiar de la funcionalidad de
COOH. El estiramiento C-O en el rango de 1000-1300 cm-1 también se observó para grupos
funcionales COOH, mientras que el estiramiento a 1227 cm-1 indica la presencia de oxígeno
etéreo, el pico en 1379-1 indica la presencia del grupo CH3 a partir de itraconazol. Los picos
anchos observados en el rango de 2500-3000 cm-1 son indicativos de estiramiento O-H y son
características peculiares de los reguladores de ácido carboxílico con grupos N-H u O-H.

Los espectros FTIR de la formulación F6 mostraron los picos adicionales y estos picos se
observaron debido a la adición de polímeros. El pico a 2584 cm-1 indica la presencia de
estiramiento -CH, a 1130 cm-1 de estiramiento -C-O-C y 3452 cm-1 de estiramiento -OH. La
formulación de F7 mostró que el pico adicional a 3062 cm-1 indica la presencia de -OH de
estiramiento. El estiramiento a 2968 cm-1 indica la presencia de -CH estiramiento de alcanos y
estiramiento a 1130 cm-1 indica la presencia de estiramiento de CO alifático. Los espectros IR de
PM6 muestran los picos adicionales a 3124 cm-1 indica la presencia de -OH estiramiento, pico a
1182 cm-1 indica la presencia de estiramiento -C-O-C y a 2823 cm-1 indica la presencia de
estiramiento -CH. Se observó la aparición de nuevos picos tanto en la mezcla física como en la
formulación. A partir de los espectros de FTIR, se concluyó que la presencia de picos adicionales se
debe a la posible interacción entre el ácido ITZ-Succínico y el polímero, como se muestra en la Fig.
1.

Fig. 1. Espectros de superposición de ITZ, Formulaciones F1, PM6, F6, PM7 y F7.
3.5. Calorimetría diferencial de barrido (DSC)

Itraconazol puro mostró un pico endotérmico a 180 ° C. En el caso de formulaciones, la depresión

de las endotermas y endotermas de fusión diferentes de las del fármaco y el formador de cocristal
individual confirmaron la formación de nuevas fases. Las moléculas en la mezcla física podrían
volverse no aleatorias, organizadas al calentar, lo que da como resultado una disminución de los
puntos de fusión. La literatura reportada sugiere que los co-cristales de ácido ITZ-succínico
formulados por técnicas líquidas y con solventes de CO2 mostraron amplios eventos endotérmicos
entre 145 ° C y 165 ° C. La formulación F1 mostró la endotermia de fusión a 151,54 ° C que
confirma la formación de co-cristales. La formulación F7 mostró endoterma de fusión a 155.26 ° C,
indica que hubo un desplazamiento del pico, se debió a la adición del polímero HPMC K100M y los
efectos de dilución del polímero o podría deberse a la interacción molecular de los co-cristales con
HPMC K100M .

Según la literatura divulgada, el punto de fusión de HPMCK100M está entre 190 y 200 ° C y era
más alto en comparación con ITZ puro, ácido succínico y sus mezclas físicas [17] mostradas en la
Fig. 2.

Fig. 2. Superposición de termograma DSC de ITZ, Formulación F1, PM7 y F7.

3.6. Análisis de PXRD

Los patrones PXRD del fármaco puro y los co-cristales se muestran en la Fig. 3. El escaneo XRD del
itraconazol puro mostró picos intensos de cristalinidad a 10.71 °, 14.380 °, 17.400 °, 20.310 °,
23.400 °, 25.220 °, 27.000 ° (2θ) con intensidades pico de 538,1023,1537,1947,1278,1102 y 899,
respectivamente, lo que indica su naturaleza cristalina. El ácido succínico exhibió picos cristalinos
característicos a 2θ valores de 23.3 °, 29.9 °, 30.4 °, 31.2 ° y 36.9 ° también en correspondencia con
la literatura. El PM1 exhibió el pico cristalino característico de ambos ITZ y ácido succínico [18]. El
lote PM6 y PM7 mostró los picos a 17.40 ° y 20.32 ° (2θ) con diferentes intensidades de pico para
PM6, 459 y 557 y el lote PM7 mostró picos intensos con intensidad 1664 y 1608. Esto se observó
debido a la adición de PEG4000 y HPMC K100M. Indica que existía la posibilidad de interacción
entre los lotes PM6 y PM7. Estos lotes mostraron algunos picos nuevos junto con los picos de
formulación PM1. La formulación de PM6 mostró los picos intensos de cristalinidad a 13.67 °,
17.32 °, 19.04 °, 20.98 °, 23.18 ° y 24.63 ° con intensidades pico 323,1371,642,377,969 y 818
respectivamente. Estos picos se observaron debido a la adición de PEG4000 [19]. La formulación
de PM7 mostró el pico intenso de cristalinidad a 21,46 ° con la intensidad máxima 440. Estos picos
se observaron debido a la adición de HPMC K100M como se muestra en la Fig. 3.

Fig. 3. Superposición de espectros XRD de ITZ, ácido succínicos, PM1, formulaciones F6, F7 y
mezclas físicas PM6, PM7.
3.7. Fotomicrografías de formulaciones

Las imágenes de fotomicrografía de ITZ puro, ácido succínico, PEG4000 y HPMCK100M se

muestran en la Fig. 4. Pure ITZ presentaba cristales más pequeños de forma irregular. El ácido
succínico presenta una varilla similar, PEG4000 romboédrico y HPMCK100M ilustra partículas
alargadas. Las mezclas físicas mostraron las partículas de forma irregular más pequeñas. La imagen
de fotomicrografía de las formulaciones, es decir, F1, F6 y F7 presentaba partículas con forma de
escalenoedro de calcita y algunas de ellas aglomeradas. A partir de estas observaciones hubo un
cambio en la morfología de la formulación de F7.

Fig. 4. Fotomicrografías de formulaciones.

3.8. Estructuras propuestas de cocrystals

Los resultados de caracterización del fármaco y todos los co-cristales nos permiten determinar las
posibles estructuras de los co-cristales recién formados usando el concepto de enlaces de
hidrógeno. Debido a la alta densidad de electrones, el enlace C-Cl es el sitio de unión más
preferido para el itraconazol. Como el itraconazol posee aromático -N tiene afinidad por el resto
de ácido carboxílico, que forma el sintón. La Fig. 5b ilustra que la unión en H entre -NH de ITZ y
-OH de ácido succínico y también de -NH de ITZ y -OH de HPMC K100M. La Fig. 5c ilustra que la
unión de H entre -NH de ITZ y -OH de ácido succínico y también de -NH de ITZ y -OH de PEG 4000.

Fig. 5. Estructuras propuestas de formulaciones preparadas.

3.9. Estudios de disolución in vitro

Como se muestra en las Figs. 6 y 7, el rango de velocidad de disolución de las seis formulaciones
sigue: Itraconazol <Mezcla física de itraconazol [PM1] <PM6 <PM7 <F1 <F6 <F7. El aumento en la
disolución de la ZIC tanto en las mezclas físicas como en las formulaciones de co-cristal se observó
y esto se debió a la mayor humectabilidad, naturaleza hidrofílica de los portadores [16]. La
solubilidad y la velocidad de disolución se determinan por la fuerza de la red cristalina y la
solvatación de los componentes del co-cristal. Se observa una velocidad de disolución mejorada y
puede deberse a la disminución de la energía reticular y al aumento de la afinidad del disolvente
que se mantiene mediante la formación de cocristal. Como el co-excretor y los polímeros
modifican o generan propiedades fisicoquímicas de API, la disminución de la barrera interfacial
debida al co-formador y al polímero es otra posibilidad para mejorar la velocidad de disolución
[20].

Fig. 6. Perfil de disolución de Pure ITZ y sus formulaciones de co-cristal en SGF (pH 1.2).

Fig. 7. Perfil de disolución de Pure ITZ y mezclas físicas en SGF (pH 1.2).
4. Conclusión

El presente estudio demostró un método exitoso y simple para preparar co-cristales de ITZ con
ácido succínico como co-formador y varios polímeros usando la técnica de evaporación del
solvente para mejorar sus propiedades de estado sólido. Los polímeros tales como HPMC K100M,
PVP K30, PEG4000 y eudragit RLPO se pueden utilizar para modular las propiedades de estado
sólido de los co-cristales de ITZ con la interferencia de las interacciones intermoleculares, pero que
no son esenciales para alterar la integridad de la estructura de co-cristal . Los cálculos de los
parámetros de solubilidad para la predicción teórica de la formación de cocrystal se emplearon
con éxito lo que determina la posibilidad de ITZ - formación de cocrystal de ácido succínico
mediante el uso de modelos de miscibilidad. La velocidad de disolución in vitro, el estudio de
solubilidad se determinó para las formas en estado sólido obtenidas, es decir, los co-cristales y se
caracterizaron por IR, DSC y XRD y se compararon con los co-cristales de ácido ITZ-succínico. El
resultado mostró que las nuevas formas en estado sólido de ITZ con ácido succínico y el uso de
varios polímeros mostraron una mayor velocidad de disolución y solubilidad en comparación con
los cocristales de ácido ITZ-succínico.

Expresiones de gratitud

Los autores agradecen a la dirección de shree Santkrupa College of pharmacy, Ghogaon, Karad,
India, por proporcionar instalaciones de laboratorio para llevar a cabo trabajos de investigación.
Los autores también agradecen a la Universidad Shivaji de Kolhapur, India, por proporcionar las
instalaciones de análisis DSC, XRD. Los autores también agradecen al centro de investigación de
Glenmark Mumbai, India, por proporcionar muestras de regalo de Itraconazol.