UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS

CAMPUS IV
ESCUELA DE CIENCIAS QUIMICAS

ASIGNATURA:
HEMATOLOGIA I

DOCENTE
MTRA. ALEJANDRA MAURICIO REYNA

PRACTICA 8

CUENTA DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

INTEGRANTES:
GOMEZ REYES AUDELINO
PENAGOS CASTELLANOS NATHAN
VAZQUEZ CHAVARRIA DARWIN
VAZQUEZ ROQUE ANTHONY SANTIAGO

OCOZOCOAUTLA DE ESPINOSA, CHIAPAS 2019

INDICE

OBJETIVOS..........................................................................................................................................3
INTRODUCCION..................................................................................................................................3
MATERIALES.......................................................................................................................................5
PROCEDIMIENTO................................................................................................................................5
DISCUSIÓN DE RESULTADOS..............................................................................................................6
CONCLUSIÓN......................................................................................................................................7
CUESTIONARIO...................................................................................................................................7
Bibliografía.........................................................................................................................................8
OBJETIVOS

 Conocer la morfología de los diferentes tipos de leucocitos

 Desarrollar una buena tinción de Wright
 Conocer las partes que debe tener un frotis sanguíneo
 Realizar un correcto frotis para una buena observación microscópica

INTRODUCCION

Los leucocitos son un conjunto heterogéneo de células sanguíneas que son

ejecutoras de la respuesta inmunitaria, interviniendo así en la defensa del
organismo contra sustancias extrañas o agentes infecciosos (antígenos). Se
originan en la médula ósea y en el tejido linfático. Los leucocitos son producidos y
derivados de unas células multipotenciales en la médula ósea, conocidas como
células madre hematopoyéticas. Los glóbulos blancos se encuentran en todo el
organismo, incluyendo la sangre y el tejido linfoide.
Existen varias clasificaciones de leucocitos, como, por ejemplo:
Granulocitos
 Eosinofilo

 Basofilo

 Neutrofilos
Agranulocitos
 Linfocito

 Monocito

Neutrófilos: Hay procesos patológicos con leucocitosis en los que abundan los
polimorfonucleares neutrófilos. Esta neutrofilia predomina en procesos infecciosos
bacterianos, pero también puede presentarse en casos de sepsis, intoxicaciones,
colagenosis, quemaduras extensas, cetoacidosis diabética, hemólisis agudas o
metástasis óseas. La llamamos “con desviación a la izquierda” cuando se
observan neutrófilos acompañados de elementos mieloides muy inmaduros
(mielocitos, cayados, metamielocitos).
Dicha desviación se puede dar por infecciones, leucemia mieloide crónica o por
invasión metastásica a la médula ósea. Existen causas congénitas y adquiridas
para presentar disminución en el número de neutrófilos (neutropenia). Cuando es
verdadera, el número total de leucocitos también se verá afectado y disminuido.
Eosinófilos: Los eosinófilos son los principales marcadores en procesos alérgicos
como asma, urticaria, hipersensibilidad o picaduras de insectos. También se
observan muy elevados en las infecciones por parásitos y en algunos procesos
virales o infecciones crónicas. Están inmiscuidos, además, en un proceso
patológico de origen idiopático llamado “síndrome hipereosinofílico”, en el cual
ellos infiltran una gran variedad de tejidos (pulmón, corazón, hígado, intestinos,
entre otros) provocando inflamación y disfunción orgánica.

Basófilos: Los basófilos son otro batallón especializado en procesos de respuesta

alérgica, su elevación se observa sobretodo en casos de hipersensibilidad por
intoxicaciones a causa de alimentos o medicamentos. También están aumentados
en el síndrome nefrótico. Son característicos de la leucemia mieloide crónica.
Disminuyen por las mismas causas que los eosinófilos.

Linfocitos: La linfocitosis (elevación en la cifra de linfocitos) suele tener varias

causas, principalmente infecciosas. También se debe a hemopatías,
enfermedades inflamatorias, algunas patologías endocrinológicas (diabetes,
tirotoxicosis, enfermedad de Addison, entre otras) y por radiación. La disminución
se puede dar por sepsis, tuberculosis, infección por VIH, lupus, linfoma Hodgkin,
entre otros.
Monocitos: los monocitos son macrófagos que viajan en el torrente sanguíneo. El
aumento en su recuento suele estar relacionado con el inicio de la recuperación en
procesos patológicos hematológicos, también se observa en infecciones agudas o
crónicas. Los encontraremos disminuidos cuando exista exposición prolongada a
corticoides, hemopatías o tratamiento con fármacos citoestáticos.

La técnica para realizar este conteo es el frotis sanguíneo, el cual se debe hacer
con dos portaobjetos con un ángulo de inclinación de aproximadamente 45º y que
el extendido cuente con las partes deseadas: cabeza, cuerpo y cola, como se
muestra en la figura 1y 2.

MATERIALES

 Muestra de sangre venosa en tubo con EDTA

 Porta objetos
 Colorante de Wright
 Buffer de fosfatos
 Etanol al 70%
 Agua destilada
 Puente de tinción
 Microscopio
 Micropipetas de 10 a 100µL
 Equipo de bioseguridad

PROCEDIMIENTO

9. Colocar un porta objetos en una superficie plana y colocar 10 µL

de sangre con una micropipeta en un extremo.
10. Colocar el extremo de otro porta objetos sobre la gota de sangre
con un ángulo de inclinación de 45º.
11. Realizar un extendido de la sangre con los portaobjetos (ver figuras
1 y 2).
12. Dejar secar la laminilla y fijar la muestra depositando etanol al 70%
por arriba de la muestra por 10 minutos.
13. Teñir con colorante de Wright por 4 minutos hasta cubrir la
muestra.
 14. Colocar el buffer de fosfatos sin derramar el colorante de Wright
por 8 minutos.
15. Lavar la laminilla con agua destilada y dejar secar.
16. Observar al microscopio 100x.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

El paso siguiente en la evaluación de un frotis es realizar la fórmula diferencial de

leucocitos, que se lleva a cabo en la misma zona del frotis en la que se estiman
los leucocitos, pero con el empleo del objetivo de inmersión en aceite. Cuando se
observa la zona correcta del frotis de un paciente con un recuento normal de
eritrocitos, se observan alrededor de 200 a 250 eritrocitos por campo de inmersión
en aceite. De manera característica, la fórmula diferencial incluye el recuento y la
clasificación de 100 leucocitos consecutivos y el informe de los tipos se expresa
como porcentajes. Un ejemplo de fórmula diferencial de leucocitos es el que
presenta 3% de formas en banda, 55% de neutrófilos segmentados, 30% de
linfocitos, 6% de monocitos, 4% de eosinófilos y 2% de basófilos.

Si durante la observación en el microscopio se notan alteraciones morfológicas es

de suma importancia el informarlo dentro de los estudios realizados. Todas las
alteraciones de los leucocitos, como cambios tóxicos, cuerpos de Döhle, linfocitos
reactivos y bastones de Aüer, se informarán debidamente. La evaluación de la
morfología de los eritrocitos, los leucocitos y las plaquetas, así como las
estimaciones de estas, se realizan también con el objetivo de inmersión en aceite
de inmersión. Con este aumento también se pueden ver las inclusiones de
eritrocitos, como los cuerpos de Howell-Jolly, y las inclusiones de leucocitos, como
los cuerpos de Döhle.

Un punto de suma importancia para poder tener una diferenciación celular

adecuada y confiable, es la realización del frotis sanguíneo, ya que, de lo contrario
en una muestra demasiado gruesa, no se podrá tener certeza de las células en sí
porque no estarían lo suficiente dispersas para el análisis adecuado o al igual en
muestras con poca muestra, el conteo resultante no podrá ser tan veraz porque no
se tiene la cantidad de muestra adecuada para la representación a todo el
organismo celular humano.

CONCLUSIÓN

Se concluye que de acuerdo a la tinción que realizamos a los frotis, se logró

identificar las estructuras leucocitarias, por ello se pudo ver con facilidad estos
cuerpos, cuantificándolos y diferenciándolos para conocer el estado de salud y así
contribuir al diagnóstico de posibles u otras enfermedades. En base a los
resultados obtenidos y comparándolos con los valores de referencias se puede
decir que las muestras sanguíneas dieron resultados negativos para anomalías
que se pudieron a ver presentados en la cantidad leucocitaria [ CITATION Rod96 \l 2058
].

CUESTIONARIO

1. ¿Cómo se realiza la técnica de frotis? Posteriormente a la toma de muestra,

se coloca una gota de sangre en el extremo del portaobjetos con la pipeta
pasteur, mantener el ángulo correcto al sostener el portaobjetos extensor.
2. ¿Qué función tiene el linfocito? Los linfocitos son uno de los principales
tipos de células inmunitarias. Los linfocitos se dividen principalmente en
células B y T.
3. ¿Cuántos lóbulos tienen el neutrófilo segmentado? De 2 a 5 lóbulos.
4. ¿Cuál es el valor de referencia del basófilo? 0,5-1 %
5. Explique qué sucede citológicamente en la tinción de Wright: es un tipo de
tinción usada en histología para facilitar la diferenciación de los tipos de
células de la sangre. Se usa para teñir los frotis de sangre y punciones
medulares, para ser examinadas al microscopio.
Bibliografía

Rodríguez-Villa, Luis;. (1996). Diagnostico clinico. Ciudad de mexico: Moras.

Ángel G., Ángel M. Interpretación clínica del laboratorio. 7 ed. Colombia: Médica Panamericana,
2006

Tkachuk D, Hirschmann J, McArthur J. Atlas of clinical hematology. Philadelphia: Saunders

Company, 2002.

Bernadette F. Rodak, Jacqueline H. Carr. Atlas de Hematología Clínica. 4° Edición.

Especialidad: Hematología y Hemoterapia. 2014. Editorial Médica Panamericana