Tema 9

Parámetros que influyen en la velocidad de reacción enzimática

 Factores que modifican la actividad enzimática

 Efecto del pH y la Tª

 Inhibidores

 Inhibición reversible
• Competitiva
• No competitiva

 Inhibición irreversible
 Factores que modifican la actividad enzimática

La velocidad de una reacción catalizada por una enzima depende de:

 La concentración de moléculas de sustrato

(Ecuación de Michaelis-Menten)

 Cantidad de enzima
La V0 es proporcional a la concentración de enzima, al menos en un
determinado rango de concentraciones.

 El pH

 La temperatura

 La presencia de inhibidores
 Efecto de la temperatura

 Las enzimas poseen una temperatura óptima a la cual la enzima presenta

máxima eficiencia catalítica.
 Existe un intervalo en el cual son estables.

Actividad enzimática

Temperatura (ºC)
 Efecto del pH

 pH óptimo de actuación, a valores superiores o inferiores la velocidad disminuye.

 El pH del medio afecta:

 Catálisis
 Unión al sustrato
 Conformación (estructura espacial) de la enzima

Quimotripsina
Actividad enzimática

Pepsina

pH
 Inhibición enzimática

Inhibidores: pequeña moléculas químicas o iones que interfieren con las

reacciones ralentizándolas o deteniéndolas

 Importantes para el estudio de:

 Mecanismo de acción enzimática

 Especificidad de sustrato

 Naturaleza del centro activo

 Identificación residuos fundamentales para la catálisis

 Utilidad

 Determinación rutas metabólicas

 Medicina. Antibióticos
 Inhibición enzimática

Hay dos tipos de inhibidores enzimáticos:

 Reversibles: Unión no covalente de un inhibidor a la enzima

 Competitiva
 No competitiva
 Acompetitiva

 Irreversibles: Unión covalente del inhibidor al enzima

Elementos naturales, tóxinas específicas, venenos, iones, fármacos

 Inhibición reversible competitiva

Unión del inhibidor al centro activo del enzima, compite con el sustrato
Inhibidor
Sustrato competitivo

Enzima Enzima

[E][I]
Sin inhibidor Ki =
[ EI ]
Velocidad

Kmap = a Km

[sustrato]
 Inhibición reversible competitiva

Inhibidor
Sustrato competitivo
Kmap = a Km

Enzima Enzima [I]

a = 1 +
Ki

( )
Aumento
[I] [I]
Kmap = 1 + Km
Ki

(sin inhibidor)

Pendiente = Aumenta Km

= Vmáx
 Inhibición reversible competitiva

Inhibidor
Sustrato competitivo

Enzima Enzima

Metanol Formaldehído

Etanol Alcohol DH Acetaldehído

Etilenglicol Ac. Oxálico

La intoxicación con etilenglicol o metanol se trata con etanol

 Inhibición reversible competitiva

Quimioterapéuticos: metrotrexato

Agentes antibacterianos: Sulfamidas

 Compiten con el p-amino-benzoico,

necesario para la síntesis de DNA
de bacterias.
Metotrexato

Estatinas

 Inhiben HMG-CoA reductasa,

Tetrahidrofolato
enzima limitante síntesis de
colesterol.
 Inhibe síntesis de DNA

 Compite por la dihidrofolato reductasa

 Inhibición reversible no competitiva

Unión del inhibidor a un sitio distinto del centro activo, no compite con el sustrato

Sustrato Sustrato
Inhibidor no
competitivo

Enzima Enzima

Sin inhibidor
Velocidad

[sustrato]
 Inhibición reversible no competitiva

Sustrato Sustrato
Inhibidor no
competitivo Kmap = Km

Enzima Enzima
[I]
a = 1 +
Ki

Vmáx
Vmáxap =
(
1 +
[I]
Ki
)
Disminuye Vmáx

= Km
 Inhibición reversible no competitiva

Tipranavir PETT2
(inhibidor de la Proteasa) (Inhibidor de la Trascriptasa Inversa)
 Inhibición irreversible

 Reaccionan con un grupo químico de la enzima, modificándola

covalentemente.
 Bloquean unión al sustrato

 Inhiben actividad

 Sus efectos dependen del tiempo de actuación del inhibidor.

 Por lo general son altamente tóxicos. Casi todos los inhibidores

enzimáticos irreversibles son sustancias tóxicas (naturales o sintéticas).

 Penicilina inhibe la síntesis de la pared bacteriana

 Aspirina inhibe la síntesis de PG

 Gases nerviosos: diisopropil fluorofosfato (DIFP), inhiben neurotransmisores

 Hg2+, Pb2+ , CN-, As

 Inhibición irreversible

 Fármacos antitumorales que actúan como análogos de la citidina

Inhibidores irreversibles del metabolismo del DNA