Práctica no.

4
Proteína C Reactiva

SUBMODULO: Realiza Análisis Inmunológicos.

SEMESTRE: 4

GRUPO: BLC

NOMBRES DE LOS INTEGRANTES DEL EQUIPIO:

 Flores Martínez Evelyn

González Morales Liliana Itzel
Olivo Quijano Jonathan Saúl
Reyes Martínez Alín
Sánchez Pérez Melissa
Salazar de la Cruz Fernanda Itzel
FUNDAMENTO
La PCR se detecta en suero por reacción con un anticuerpo específico adsorbido
sobre un soporte inerte de látex. La PCR se une a los anticuerpos adsorbidos
produciendo la aglutinación de las partículas de látex (aglutinación indirecta).

OBJETIVO
Ejecutan la técnica cualitativa y sami cuantitativa de determinación de Proteína C
Reactiva.

INTRODUCCIÓN

Tillet y Francis (1930) observaron que el suero de pacientes que sufren de

enfermedades inflamatorias precipita con un extracto de neumococo no proteico
llamado polisacárido C. La proteína que causa este tipo de reacción fue llamada
Proteína C Reactiva.
La Proteína C Reactiva (CRP, por sus siglas en inglés) se produce sobre todo en el
hígado y constituye un marcador muy sensible de inflamación o daño tisular en
respuesta a una gran variedad de estímulos. Evidencias recientes han mostrado
que las elevaciones de pequeña magnitud de la concentración de PCR circulante,
aun dentro de límites que antes se consideraba “normales” (por debajo de 10 mg/l),
son predictivas de episodios cardiovasculares agudos en individuos en apariencia
saludables y asintomáticos, por lo que la medición de la concentración de PCR
podría usarse como parte de la evaluación de riesgo de enfermedad cardiovascular
La PCR se encuentra comúnmente aumentada en: artritis reumatoide activa,
infecciones virales, tuberculosis, fiebre reumática activa, infarto agudo de miocardio,
etc. También se la puede hallar luego de una operación quirúrgica y en gran
porcentaje luego de transfusiones sanguíneas. La determinación de PCR no sólo
indica la intensidad de la enfermedad sino también la respuesta del paciente a un
tratamiento dado.
MATERIAL:
 Equipo vacutainer para toma de muestra (punción venosa).
 Centrífuga
 Pipetas Pasteur con bulbo
 Pipetas graduadas de 1 mililitro
 Portaobjetos
 Aplicadores de madera
 Agitador mecánico rotatorio de velocidad regulable a 80 – 100 r. p. m.

REACTIVOS
 Suero fresco (problema). Estable 7 días a 2 – 8º. C (las muestras con restos
de fibrina deben ser centrifugadas antes de la prueba. No utilizar muestras
hemolizadas o lipémicas.
 Suspensión de partículas de látex cubiertas con IgG de cabra anti-PCR
humana, pH 8.2. Azida sódica 0.95 g/L.
 Control + (suero humano con una concentración de PCR mayor a 20 mg/L).
Azida sódica 0.95 g/L. Tapón rojo.
 Suero animal Control -. Azida sódica 0.95 g/L. Tapón azul.

METODO CUALITATIVO
1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La
sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas.
2. Depositar 50 microlitros de la muestra a ensayar y una gota de cada uno
de los controles Positivo y Negativo, sobre círculos distintos de un
portaobjetos.
3. Homogeneizar suavemente el reactivo de Anti PCR – látex antes de usar.
Depositar una gota (50 microlitros) junto a cada una de las gotas anteriores.
4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la muestra por toda
la superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.
5. Situar el portaobjetos sobre un agitador rotatorio a 80 – 100 r. p. m. y agitar
durante dos minutos. El exceso de tiempo puede originar falsos positivos.