UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE INGENIERIA

GUÍA DE PRÁCTICAS VERSIÓN: 1

PERIODO ACADÉMICO: octubre 2019 – marzo 2020 Página 1 de 2

CARRERA: Agroindustria (R) DOCENTE: MSc. SEMESTRE: Cuarto

Estefanía Peña PARALELO: A

NOMBRE DE LA ASIGNATURA: CÓDIGO DE LA LABORATORIO A UTILIZAR:

Microbiología Agroindustrial ASIGNATURA: Control de calidad
AGP330943
Práctica No.: Tema: Duración No. Grupos No. Estudiantes (por
Producción de (horas) Grupo)
3 5 grupos
bioetanol a partir 4 3 grupos de 4
de lactosuero. estudiantes
2 grupos de 5
estudiantes

Objetivos de la Práctica:
- Utilizar los conceptos y técnicas de fermentación alcohólica para la obtención de bioetanol
- Separar por destilación el alcohol obtenido.

Equipos, materiales e insumos:

Equipos Materiales Materiales
de adicionales
laboratorio
Incubadora Matraces - Melaza
pH metro de 100 ml - Lactosuero
Microscopi Vaso de - Saccharomyc
o precipitació es cerevisiae
Autoclave n - Lactosa
Probeta
Caja Petri
Pipeta
Procedimiento:
 Lavarse las manos al inicio y final de la práctica
 Pre-tratamientos del suero de queso
- Autoclavado del suero de leche
- Hidrolisis enzimática de suero queso: Se utilizará una enzima en forma líquida (βgalactosidasa)
obtenida de ENMEX con el nombre comercial de Lactoset©, la cual será almacenada a 4°C hasta el
momento de su utilización.
La actividad de la enzima es de 10,000 u/g de enzima (1 mol de onitrofenol/min, en condiciones
óptimas). La hidrolisis de lactosa se realizará bajo los siguientes parámetros: temperatura (35-40 °C),
pH (6.5-7.5), tiempo (10-20 min) y concentración de enzima (0.46, 1, 1.5 µL/L).
- Producción de alcohol:
Una vez hidrolizadas las muestras se centrifugarán a 10 000 rpm por 10 minutos a 4°C, el
sobrenadante será filtrado en papel filtro Whatman No. 1, el pH se ajustará a 4.5 y la cuantificación
de azúcares reductores en el hidrolizado se realizará mediante el método de DNS (Miller, 1959).
 Se inocularán matraces de 1000 mL con un volumen de trabajo de 500 mL de suero hidrolizado, con
una concentración de inoculo de 1x107 cel/mL, la temperatura y el tiempo de la fermentación serán
de 28°C y 92 horas como tiempo máximo.
- Destilación
Las muestras fueron destiladas y el porcentaje de etanol se estimó con base a la ecuación de Gay-
Lussac para fermentación alcohólica
Resultados:

- Determinar las condiciones más favorables para la fermentación alcohólica del lactosuero.
- El estudiante será capaz de identificar las condiciones de pH, concentración de azúcar, producción
de CO2 para la producción óptima de etanol a partir de lactosuero.

Anexos:
http://www.ecorfan.org/bolivia/researchjournals/Sistemas_Experimentales/vol3num9/Revista_de_Sistema
s_Experimentales_V3_N9_7.pdf
Referencias bibliográficas:
Yousef, A. E., & Carlstrom, C. (2006). Microbiologia de los alimentos: manual de laboratorio (No. Sirsi)
i9788420010663).

Fecha de Revisión y Aprobación: ……………………….

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Firma Director de Carrera Firma Docente