Centrifugación

Es un método por el cual se pueden separar sólidos de líquidos de diferente

densidad por medio de una fuerza giratoria. La fuerza centrífuga es provista por una
máquina llamada centrifugadora, la cual imprime a la mezcla un movimiento de
rotación que origina una fuerza que produce la sedimentación de los sólidos o de
las partículas de mayor densidad.
Los componentes más densos de la mezcla se desplazan fuera del eje de rotación
de la centrífuga, mientras que los componentes menos densos de la mezcla se
desplazan hacia el eje de rotación.1 De esta manera los químicos y biólogos pueden
aumentar la fuerza de gravedad efectiva en un tubo de ensayo para producir
una precipitación del sedimento en la base del tubo de ensayo de manera más
rápida y completa.
Fundamento teórico
El objetivo de la centrifugación es separar sólidos insolubles (de partículas muy
pequeñas y difíciles de sedimentar) de un líquido. Para ello, se aplica un fuerte
campo centrífugo, con lo cual las partículas tenderán a desplazarse a través del
medio en el que se encuentren el mas lento
Tipos de centrifugación
Centrifugación diferencial: Se basa en la diferencia en la velocidad de
sedimentación de las moléculas.2 Esta diferencia debe ser grande para que sea
observada al centrifugar. Las partículas que posean densidades similares
sedimentarán juntas. Este método es inespecífico, por lo que se usa como
centrifugación preparativa para separar componentes en la mezcla (por ejemplo,
para separar mitocondrias de núcleos y membrana) pero no es útil para separar
moléculas.
Centrifugación isopícnica: Partículas con el mismo coeficiente de sedimentación
se separan al usar medios de diferente densidad. Se usa para la separación de ADN
con mucha frecuencia.
Centrifugación zonal: Las partículas se separan por la diferencia en la velocidad de
sedimentación a causa de la diferencia de masa de cada una. La muestra se coloca
encima de un gradiente de densidad preformado. Por la fuerza centrífuga las
partículas sedimentan a distinta velocidad a través del gradiente de densidad según
su masa. Se debe tener en cuenta el tiempo de centrifugación ya que si se excede,
todas las moléculas podrían sedimentar en el fondo del tubo de ensayo.
Ultracentrifugación: Permite estudiar las características de sedimentación de
estructuras subcelulares (lisosomas, ribosomas y microsomas) y biomoléculas.
Utiliza rotores (fijos o de columpio) y sistemas de monitoreo. Existen diferentes
maneras de monitorear la sedimentación de las partículas en la ultracentrifugación,
el más común de ellos mediante luz ultravioleta o interferómetros.
Equipos para centrifugación
La centrifugación en el laboratorio se realiza por medio de un aparato llamado
centrífuga, en el cual se colocan tubos de ensayo que contienen la mezcla; la
centrífuga gira con tal velocidad que separa el sólido y lo deposita en el fondo del
tubo. Luego se efectúa una filtración o una decantación. Este procedimiento, es muy
útil cuando el sólido que está disperso en el líquido es muy fino y no sedimenta.