DEPARTAMENTO DE QUIMICA

CENTRO DE CIENCIAS BASICAS

LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGIA

RESUMEN DEL ARTICULO:

“Functional analysis of BADH gene promoter from
Suaeda liaotungensis K. / Análisis funcional del
promotor del gen BADH de Suaeda liaotungensis K”

ALUMNA: Victoria Elizabeth Vargas Andrade

MAESTRO: Jose Francisco Morales Domínguez
ID:187848
FECHA DE ENTREGA: 17/10/19
En la actualidad el cambio climático y las alteraciones de la naturaleza de nuestro planeta
ha ocasionado tensiones ambientales para las plantas de uso cotidiano como las sequias,
las altas temperaturas o lo contrario muy bajas y otra tensión muy importante y con la que
se plantearon este estudio es la salinidad ya que esta ocasiona reducción del rendimiento y
calidad de sembradíos.
A pesar de que las plantas a lo largo del tiempo han tenido que lidiar con estos cambios
gracias a mecanismos de protección para conservar el metabolismo celular y prevenir daños
a todos sus componentes, hablando de la salinidad las plantas han evolucionado para tener
una adaptación metabólica que es la acumulación de osmoprotectores, uno de los mas
conocidos es la glicina betaina este esta compuesto de amonio y es una respuesta ante el
estrés salino. El fin de la glicina es dar una protección a la célula manteniendo elo equilibrio
osmótico junto con el medio ambiente esto estabiliza la estructura de proteínas complejas
y puede resistir ante el estrés.
Se demostró que existe una región del gen que codifica la betaina aldehído deshidrogenasa
BADH aislado de Suaeda liaotungensis, el estudio de la secuencia promotora indica que
existen varios elementos CIS supuestos por la base de datos. Pero esto va a depender de las
características de cada promotor BADH.
Primero 5 construcciones quiméricas se colocaron en los fragmentos del promotor a
diferentes tamaños de pares de bases (–1,993, –1,466, –1,084, –573 y –300 a +62) estas con
relación al sitio de inicio de la transcripción. La región codificante del gen GUS es transferido
a Nicotiana tabacum esto se realizó con transformación de disco de hoja mediada por
Agrobacterium t. ya que se tuvieron fragmentos de promotor cada uno tenia propiedades
distintas que fueron examinadas con una tinción histoquímica GUS y con ensayos de análisis
cuantitativos de fluorescencia en las hojas del tabaco transgénicas, pero con diferente
tratamiento de la concentración de NaCl. Esto dio como resultado que aquellas plantas
sanas disminuyeron la actividad de GUS en las hojas y en las que contenían mayor
concentración de NaCl es donde hubo una mayor actividad de GUS estos niveles fueron de
ayudapara ajustes finos de la expresion de la proteína.
El comportamiento de la actividad GUS aumenta 6.3 en las hojas transgénicas que tienen el
promotor en el fragmento -300pb con 400 mmol/l NaCl a comparación de las demás
concluyendo que en este fragmento ya esta la presencia de los elementos esenciales para
activar la actividad para la inducción de NaCl.
Esquema del análisis del promotor:

Para comprender mejor los mecanismos de regulación transcripcional de la expresión del gen BADH en respuesta a la señal
de NaCl

Se presenta una caracterización funcional de la región promotora del gen BADH, basada en plantas
transgénicas que llevan el gen informador GUS fusionado a diferentes fragmentos del promotor BADH.

El análisis comparativo entre plantas transgénicas que albergan el promotor P5 y el promotor CaMV 35 S
revela que el primero es un fuerte promotor inducible por NaCl. El fragmento mínimo (P5, –300 a +62
pb) contenía los elementos básicos y algunos motivos relacionados con el estrés abiótico, como TATA-
box, CAAT-box, GT-1, MYC Recognition Site y HSE.

El sitio de reconocimiento MYC (CANNTG) se encontró en los promotores de rd22, CBF3 y muchos
otros genes en Arabidopsis, ya que confieren deshidratación, ABA, inducción por frío y congelación, y
HSE fueron responsables de la capacidad de respuesta al estrés por calor, lo que podría estar asociado
con una mayor expresión.

Los niveles de expresión en la construcción P4 disminuyeron en comparación con la construcción P5 en

condiciones normales (0 mmol / l NaCl), lo que indica la presencia de elementos reguladores negativos.

El promotor BADH parece ser activado por NaCl en las hojas, pero mostró baja actividad en las raíces. Otros
resultados sugieren que todas las construcciones del promotor de deleción del gen BADH en condiciones
normales podrían conducir la expresión del gen GUS, excepto P4, que mostró niveles de expresión más bajos.

La inspección de la secuencia del promotor BADH no reveló la presencia de elementos inductores de NaCl inducibles