“2019. Año del Centésimo Aniversario Luctuoso de Emiliano Zapata Salazar. El Caudillo del Sur”.

Practica No 1 Extracción casera de ADN

Introducción

Las células son las unidades básicas de la vida y componen a todas las plantas, los animales y las bacterias. El ácido
desoxirribonucleico, o ADN, es la molécula que controla todo lo que sucede en la célula.
El ácido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN (o DNA) es una macromolécula que forma parte de
todas las células. Contiene la información genética usada en el desarrollo y el funcionamiento de los organismos vivos
conocidos y de algunos virus, siendo el responsable de su transmisión hereditaria.
En el ADN está formado por un azúcar (la desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser adenina→A, timina→T,
citosina→C o guanina→G) y un grupo fosfato. La disposición secuencial de estas cuatro bases a lo largo de la cadena es la
que codifica la información genética: por ejemplo, una secuencia de ADN puede ser ATGCTAGATCGC... En los organismos
vivos, el ADN se presenta como una doble cadena de nucleótidos, en la que las dos hebras están unidas entre sí por unas
conexiones denominadas puentes de hidrógeno. En la célula se encuentra en tres organelos: núcleo, mitocondria y
cloroplasto.

Objetivo

Utilizar técnicas sencillas para extraer el ADN de un producto natural.

Observar la estructura fibrilar del ADN.

Material proporcionado por equipo

1. Detergente “LÍQUIDO”.
2. Alcohol al 96% (evitar que diga desnaturalizado) 50ml. Colocarlo en el refrigerador una noche antes ya que
deberá esta frío para realizar la práctica.
3. Muestras vegetales: plátano, fresa (entre más madura mejor), saliva de alguno de los integrantes
4. Colador de cocina, cuidando que sea de malla muy cerrada
5. Palitos de madera
6. Cucharas de plástico
7. Bolsas de plástico gruesas (6 bolsas)
8. Sal de mesa (4 cucharadas)
9. Vasos de plástico (5 vasos de plástico)
10. Botella de agua (1litro)
11. Hojas blancas, bata de laboratorio, franela, toalla de manos.

Procedimiento

1. Se deberá colocar la fruta en una bolsa de plástico y cerrarla. Triturar la fruta con las manos. Es importante que
el tejido carnoso de la fruta quede completamente separado. Este paso se conoce como homogenización de
tejidos y en los laboratorios usualmente se realiza con nitrógeno líquido y en un mortero de porcelana.

2. Vaciar el licuado en un vaso de plástico por medio de un colador, para separar lo que no se haya triturado.
Procurar que el tamaño de los agujeritos del colador sean lo suficientemente pequeños para que sólo
obtengamos el jugo de la fruta.

3. Mediar el licuado en el vaso y añadir “1/4” de detergente líquido del total del licuado. Los detergentes son muy
buenos para eliminar grasas. En este caso, esas grasas son los lípidos que componen a las membranas celulares
y de los diferentes orgánulos: el cloroplasto, la mitocondria, el aparato de Golgi y el retículo endoplasmático, así
como el núcleo. Este paso nos permite lisar a las células, es decir, romperlas para liberar su contenido: proteínas,
ácidos nucleicos y diferentes compuestos orgánicos e inorgánicos.

4. Revolver “suavemente” con ayuda de una cuchara y evitando que se haga espuma.
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5. Añadir una cucharada de sal de mesa, revolver con cuidado y lentamente por aproximadamente 5 minutos. Si
se mezcla con demasiada rapidez o fuerza, se corre el riesgo de romper el ADN y no se pueda observar. Al lisar
a las células se libera una gran cantidad de proteínas, algunas de estas proteínas tienen como función degradar
al ADN de patógenos como son las bacterias y los virus. Si no detenemos a estas proteínas (conocidas como
nucleasas) nuestro ADN será degradado. Para evitarlo tendremos que agregar la sal a la mezcla.

6. Ladear el vaso y verter el alcohol frío con mucho cuidado haciendo que resbale por las paredes del vaso sin que
se mezclen las sustancias. Esperar unos 3-5 minutos y si nuestra homogenización de tejidos y el lisado de las
células fueron eficientes, observaremos unos hilillos blancos en la fase transparente. El objetivo aquí es crear
dos fases: en la parte inferior tendremos una fase del color de nuestra fruta, y en la parte superior una fase
transparente (alcohol). El ADN es soluble en agua, pero se precipita en soluciones no polares. El alcohol y la sal
nos ayudarán a sacar al ADN del jugo de las frutas. Es importante no mezclar las fases.

7. Utilizar el palito de madera para agitar suavemente y en círculos al alcohol, procura no mezclar las fases. La
agitación circular nos permitirá concentrar a nuestra sustancia de ADN en el centro del vaso. Una vez que esté
en el centro, intenta sacarlo del alcohol.

8. Realizar los mismos pasos para cada fruta. Para el caso de la saliva se deberá enjuagar la boca con medio vaso
de agua y sobre este enjuague realizar los pasos anteriores.

Resultados

Observación: Reportar cada uno de los pasos del procedimiento a través de dibujos y describiendo lo que está pasando
en cada fase en la hojas proporcionadas por el alumno

Conclusión.
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Cuestionario:

1. ¿Cuál es la función del ADN en la célula?

2. ¿En qué año y cuál es el nombre de los dos científicos que descubriron la estructura del ADN?

3. Dibuja el núclo de una célula con todas las estructuras que lo conforman, a mano y con color.

Fuentes de consulta:

Integrantes:

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