IVD Producto sanitario para diagnóstico in vitro - Uso reservado al personal cualificado

Agar sorbita-MacConkey (agar SMgar)

Agar sorbita-MacConkey Ref. pedidos 1.09207.0500 (500 g)

Agar selectivo para aislamiento y diferenciación directos de cepas enterohemorrágicas (EHECC) de

E. coli O157:H7 de alimentos y muestras clínicas.

El medio de cultivo corresponde a la norma DIN 10167 para detección de Escherichia coli (E. coli)
serotipo O157 en alimentos y a los métodos FDA-BAM para aislamiiento de E. coli
enterohemorrágicas (EHEC).

Ver también Modo general de empleo

Advertencias y medidas preventivas, ver ChemDAT®

Principio
Método microbiológico

Modo de acción
La mezcla de sales biliares y violeta cristal inhibe en gran medida la flora acompañante grampositiva.
La adición de cefixima-telurito potásico aumenta la selectividad para E. coli O157:H7 y reprime la
restante flora acompañante. Para la detección de E .coli O157:H7 el método con agar CT-SMAC
según un estudio de WEAGANT (1995) es más adecuado que el procedimiento con agar HC. La
sorbita, juntamente con el indicador de pH rojo neutro, sirve para la detección de la degradación de la
sorbita, que en los microorganismos sorbita-positivos conduce a una coloración roja de las colonias.
Por el contrario, las cepas sorbita-negativas aparecen como colonias incoloras.

Composición típica (g/litro)

Peptona 20,0; cloruro sódico 5,0; sales biliares nro. 3 1,5; sorbita 10,0; rojo neutro 0,03; violeta cristal
0,001, agar-agar 15,0.

Preparación y almacenamiento
Nro. art.1.09207 Agar sorbita-MacCONKEY (500 g)
Seco y bien cerrado es utilizable hasta la fecha de caducidad si se conserva entre +15 y +25 °C.
Protéjase de la luz. Una vez abierto el frasco por primera vez, seco y bien cerrado es utilizable
hasta la fecha de caducidad si se conserva entre +15 y +25 °C.

Agar SMAC:
Disolver 51,5 g en 1000 ml de agua desmineralizada, tratar en autoclave (15 min. a 121°C). Verter
placas.
pH: 7,1 ± 0,2 a 25 °C
Las placas del medio de cultivo son diáfanas y pardo-rojizas. Almacenadas entre +2 y +8 °C se
conservan durante 6 meses.
Agar CT-SMAC:
Disolver 25,8 g en 500 ml de agua desmineralizada, tratar en autoclave (15 min. a 121°C).
Al contenido de un frasco Suplemento CT (nro. art. 1.09202) se le añade aprox. 1 ml de agua
destilada estéril y se añade al medio de cultivo estéril enfriado a 50 °C. Verter placas.
pH: 7,1 ± 0,2 a 25 °C
Las placas del medio de cultivo son diáfanas y pardo-rojizas. Almacenadas entre +2 y +8 °C se
conservan durante 6 meses.

Muestras de examen
p. ej. heces, orina
Obtención de muestras, preparación de muestras y técnica operativa del examen, ver también Modo
general de empleo.
Uso y evaluación
Enriquecer 25 g de material de muestra en 225 ml de caldo mEC o caldo mTSB mediante incubación
durante 18-24 horas a 35-37° C.
Extender aproximadamente 0,1 ml de la muestra de alimento enriquecida sobre la superficie seca del
agar SMAC o del agar CT-SMAC de manera que se puedan conservar colonias individuales bien
aisladas. Condiciones de incubación: de 16 a 24 Stunden a 35-37° C.
Las muestras de heces se inoculan directamente como extensión por asa sobre las placas y
seguidamente se incuba durante 16-24 horas a 37 °C.
Las colonias incoloras sorbita-negativas deben aislarse a continuación y controlarse con antisueros
especiales.

Aditivos y auxiliares

Merck ref. Producto Tamaño de

pedidos envase
1.14582.0500 Caldo mEC con 500 g
novobiocina
1.09205.0500 Caldo mCASO con 500 g
novobiocina
1. 09202.0001 Suplemento CT 1x16 frascos

Control de calidad del medio de cultivo con el método de placas en espiral

Agar SMAC

Cepas de ensayo Inóculo Cuota de Color de la colonia Sorbita

(UFC/ml) recuperación
E. coli O157:H7 ATCC 35150 103-105 > 70% incoloro -
E. coli ATCC 11775 103-105 > 70% rojo +
Serratia marcescens ATCC 14756 103-105 > 70% rojo +
Bacillus cereus ATCC 11778 >105 < 0,01%

Agar CT-SMAC

Cepas de ensayo Inóculo Cuota de Color de la colonia Sorbita

(UFC/ml) recuperación
E. coli O157:H7 ATCC 35150 103-105 > 30% incoloro -
E. coli ATCC 11775 103-105 < 0,01%
E. coli ATCC 87639 >105 < 0,01%
Serratia marcescens ATCC 14756 >105 < 0,01%
Bacillus cereus ATCC 11778 >105 < 0,01%

Bibliografía

DIN Deutsches Institut für Normung e.V.: Nachweis von Escherichia coli O157 in Lebensmitteln.-
DIN 10167
FDA Bacteriological Analytical Manual, 8th Edition/1995, Chapter 4. Escherichia coli and the Coliform
Bacteria, página 4.20: Isolation Methods for Enterohemorrhagic E.coli (EHEC).
WEAGANT, S.D., J.L. BRYANT, y K.G. JINNEMAN, An improved rapid technique for isolation of
Escherichia coli O157:H7 from foods. - J. Food Prot., 58;7-12 (1995).
ZADIK, P. M., P. A. CHAPMAN, y C. A. SIDDONS, Use of tellurit for the selection of verocytotoxigenic
Escherichia coli O157. - J. Med. Microbiol., 39; 155-158 (1993)

© Versión 14-03-2008 Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Alemania, tel. ++49 (6151) 720, www.merck.de