MATERIAL.

1 columna de vidrio de 10 cm de longitud, 1 soporte universal, 1 pinza para bureta, 1 vidrio de

reloj, 1 espátula, 1 pipeta graduada de 5 mL, 1 pipeta graduada de 10 mL, 2 probetas de 25 mL,
4 pipetas beral, 1 mortero de porcelana con pistilo, 1 embudo de separación de 125 mL con
tapón, 1 anillo metálico, 2 vasos de precipitados de 50 mL, 1 vaso de precipitados de 30 mL, 15
tubos de ensayo, 1 gradilla, 1 matraz Erlenmeyer de 30 mL, 3 piedras de ebullición.

PROCEDIMIENTO.

Para la practica se utilizo el siguiente procedimiento:

A) Una preparación de la muestra con pigmentos.

1. Se aseguro de que el matraz Erlenmeyer de 30mL, Un vaso de precipitados de 50 mL,
una probeta de 25 mL, La columna de vidrio y los tubos de ensaye estuvieran
perfectamente secos.
2. Se coloco el anillo o aro metálico al soporte correctamente con el embudo y la llave
cerrada.
3. Se peso aproximadamente 1 g de las hojas de espinaca.
4. Se trituro en 1 mortero y se añadió metanol para molerlas en este disolvente hasta
que vimos una papilla.
5. Se añadió 6 mL de hexano y de muele nuevamente, extrayendo con una pipeta beral el
excedente de líquido.
6. Y se añadió nuevamente una alícuota de 6 mL de hexano hasta que el color verde se
vea menos intenso y extraer nuevamente con una pipeta beral, colocando así nuestro
excedente de liquido en el embudo de separación.
7. Se añadió 10 mL de agua de la traja en el embudo se tapo y se agito vigorosamente.
8. Colocándolo en el embudo nuevamente esperando separación de fases y removimos
la fase acuosa.
9. Se repitió la extracción de la muestra orgánica con otros 10 mL de agua de la traja.
10. En caso de que se observase una tercera fase, extraerla.
11. Se transfirió el extracto orgánico obtenido al matraz Erlenmeyer de 30 mL y s ele
añadió sulfato de sodio anhidro en pequeñas porciones, hasta que se aclaro y la sal
permaneció como polvo fino.
12. Se retiro el extracto orgánico con ayuda de una pipeta bera.
13. Lavamos el sulfato de sodio con otra porción de hexano de 3 mL, Se retiro el extracto
orgánico y se adiciono al vaso de precipitados de 30 mL.
14. Lo reducimos a 3 mL.

B) Preparación de la columna cromatográfica.

1. Se utilizo una pequeña columna cromatográfica de vidrio.
2. Se introdujo un pedacito de algodón con ayuda de una varilla de vidrio hasta el fondo
de la columna ayudo como adsorbente en polvo.
3. Se le añadieron 5 g de sálica gel grado cromatográfico poco a poco y en seco, tomando
en cuenta que dejamos 2 cm para que estuviera el adsorbente de la columna.
4. Sujetamos la columna en el soporte con una pinza a una altura adecuada para
recolectar las fracciones.
5. Se tomo en cuenta antes de comenzar con adsorción y elución fue que durante el
desarrollo del proceso debes mantener siempre nivel del disolvente arriba.
C) Desarrollo cromatográfico.
1. Enumeramos consecutivamente 15 tubos de ensayo.
2. Se le añadió 5 mL de hexano a la columna.
3. Se tiene que tomar en cuenta que antes de que el disolvente llegue a la superficie del
adsorbente añadir el extracto con pigmentos con ayuda de una pipeta beral.
4.