Práctica No.

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Barrido Espectral

Introducción

La espectroscopia estudia las interacciones de la materia con la radiación electromagnética, la

radiación electromagnética se manifiesta por medio de una componente eléctrica responsable de
fenómenos como la absorción, reflexión y otros fenómenos y una componente magnética
perpendicular responsable de la absorción de ondas de radiofrecuencia, el espectro
electromagnético abarca una gran cantidad de longitudes de onda y de frecuencias, el intervalo es
tan grande que se necesita de una escala logarítmica. (1:125) El espectro electromagnético incluye
desde las longitudes de onda largas y poco energéticas en la región de ondas de radio hasta las
más cortas y más energéticas en la región de los rayos gamma. Los colores son una manifestación
de la emisión de cierta longitud de onda por parte de los átomos que componen los objetos, el ojo
humano solamente puede percibir una pequeña fracción del espectro electromagnético a la que
se le denomina región visible en donde se hallan todos los colores que pueden observarse a simple
vista. Los métodos cuantitativos basados en la absorción de radiación electromagnética requieren
dos medidas de potencia (o intensidad) una antes de que el haz haya pasado a través del medio
que contiene el analito (Po) y la otra después (P), la transmitancia y la absorbancia son los dos
términos que se utilizan ampliamente en la espectrometría de absorción y se relacionan por medio
de Po y P. (1:146 – 148)

La transmitancia se expresa con frecuencia como un porcentaje:

%T = [P/Po] x 100%

En su lugar la absorbancia A de un medio se define por la ecuación:

A = -log10T = log[Po/P]

Debe de notarse que a diferencia de la transmitancia la absorbancia de un medio aumenta cuando

la atenuación del haz se hace mayor, es común en la actualidad el uso de la medida de
absorbancia en lugar de la transmitancia.

La ley de Beer-Lambert predice que la Absorbancia determinada para un analito es proporcional a

la concentración del mismo, es decir que cuanto más concentrado se encuentre un analito, mayor
será la lectura de absorbancia. (la ley de Beer será profundizada en la práctica No. 2)

Los instrumentos espectroscópicos característicos incluyen cinco componentes, a saber:

1. Una fuente estable de energía radiante.

2. Un recipiente transparente para contener las muestras (cubeta).
3. Un dispositivo que aísle una región restringida del espectro para la medida.
4. Un detector de radiación, que convierte la energía radiante en una señal utilizable (en
general eléctrica).
5. Un sistema de procesamiento y lectura de la señal detectada en una escala de medida. (1:
151-152).
Procedimiento

 Barridos para determinación de longitudes de onda y absorción máxima de radiación

electromagnética.

1. Preparar soluciones de los colorantes a estudiar (rojo, amarillo, azul y 2 colores

secundarios).
2. Encender el espectrofotómetro UV-Visible (CARY 50 BIO).
3. Seleccionar la función SCAN.
4. Hacer click en la pestaña preparar y seleccionar los siguientes paramétros:
Modo: longitud de onda.
Modo: absorbancia.
Velocidad de barrido: medio.
5. Seleccionar el rango en que se hará el barrido (200 a 800 nm).
6. Colocar el blanco dentro de la cubera.
7. Leer el blanco hasta que la respuesta del aparato sea 0.
8. Colocar la muestra dentro de la cubeta.
9. Hacer doble click en INICIAR.
10. Remover la celda del compartimiento y repetir los pasos 3 a 9 para las demás soluciones
coloreadas.
11. Tomar nota de las instrucciones y precauciones proporcionadas por el auxiliar de cátedra
en cuanto al uso del espectrofotómetro.
12. Cuando todas las mediciones sean completadas, apagar el espectrofotómetro.

Análisis de resultados

 ¿Cuál es la longitud de onda a la que cada color presenta un máximo de absorbancia y por
que se da este fenómeno?
 ¿Tiene relación la longitud de onda a la que emiten los colores en el espectro
electromagnético con la longitud de onda a la que absorben en el procedimiento
experimental? (para esta última pregunta consulte bibliografía y cítela de manera correcta
en su reporte)

Cuestionario

1. ¿En qué longitudes de onda absorben los colores primarios y secundarios?

2. ¿Qué son los colores secundarios?

3. ¿Qué longitudes de onda son de mayor energía, las largas o las cortas y por qué?

4. ¿Qué es el espectro electromagnético y cuál es el rango de longitud de onda de sus

regiones?

Bibliografía

1. Skoog, D.A. Análisis Instrumental. 5ta Edición, Editorial McGraw-Hill, México.