Prácticas de Bioquímica Mgr.

Soledad Bornás Acosta

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PRÁCTICA 4

CARBOHIDRATOS Y LIPIDOS

1. INTRODUCCION

Los carbohidratos, llamados también glúcidos o hidratos de carbono, son compuestos

polifuncionales que contienen grupos carbonilo (aldehído o cetónico) y grupos hidroxilo o
alcohólicos. Por lo tanto, poseen propiedades de aldehídos o cetonas y de alcoholes
polihidroxílicos. Estos biopolímeros están muy difundidos en la naturaleza y pueden
clasificarse en monosacáridos (como la glucosa, fructosa, ribosa y otros), oligosacáridos
(dentro de este grupo podemos mencionar a los disacáridos como la sacarosa, lactosa,
celobiosa, maltosa y otros) y polisacáridos (tenemos al almidón, celulosa, pectinas y otros).
Constituyen una importante fuente de energía, a comparación de otros nutrientes producen
una combustión más limpia en las células y deja menos residuos en el organismo. La glucosa
es un combustible celular por excelencia, oxidándose aeróbicamente hasta obtener CO 2 más
H2O y liberar la energía metabólica, la cual es utilizada para el desarrollo, construcción de la
parte estructural del organismo, también sirven como material para la síntesis de otro tipo de
compuestos y juega un rol importante en la bioenergética de la célula.
Los carbohidratos pueden ser identificados mediante su poder reductor, especialmente los
monosacáridos y algunos disacáridos, por poseer su grupo funcional intacto, ya que a través
del mismo pueden reaccionar como reductores con otras moléculas.
Los lípidos son compuestos orgánicos, de cadenas largas que forman parte de los tejidos y
fluidos corporales. Se caracterizan por ser insolubles en agua y solubles en solventes
orgánicos. Están constituidos por ácidos grasos (unidades básicas), los cuales pueden
unirse a otras sustancias para conformar estructuras lipídicas más complejas (triglicéridos,
fosfolípidos, ésteres de colesterol y otros).
Su importancia está dada por las funciones que cumplen en los organismos, como
componentes estructurales de membranas, depósitos de reserva, combustible metabólico,
forma de transporte, actividades enzimáticas, agentes de protección de bacterias,
exoesqueletos de insectos, piel de invertebrados. Los lípidos que se ingiere a través de los
alimentos son degradados, absorbidos y transportados por lipoproteínas por la vía linfática
y sanguínea para posteriormente ser metabolizados a partir de carbohidratos y aminoácidos.
Todos los lípidos tienen ácidos grasos libres; algunos lo tienen en mayor cantidad, ya sea
por acción enzimática, por acción microbiana, por descomposición o almacenamiento por
largo tiempo. Entonces se puede inferir la determinación de la acidez, por titulación con una
base, para ver el grado de deterioro de los lípidos.

2. OBJETIVOS
• Demostrar el poder reductor de los carbohidratos presentes en una muestra
biológica.
• Determinar el grado de acidez de los lípidos presentes en una muestra biológica.

3. MATERIAL Y METODOS

3.1. MATERIALES
3.1.1. Materiales biológicos
• Leche
• Vinagre
• Miel

3.1.2. Materiales de vidrio

• Tubos de ensayo
• Pipetas

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• Bureta
• Matraz
• fiolas
• Cubetas

3.1.3. Reactivos
• Dextrosa 0,5%
• Reactivo Fehling A y B
• Azul de metileno
• Agua destilada
• NaOH 0,1N
• Fenolftaleína 0,1%

3.1.4. Equipos y otros

• Espectrofotómetro
• Cocina eléctrica

3.2. METODOS
Mediante la observación y exploración se aplicará el método de absorción utilizando el
espectrofotómetro y método de titulación.

4. PROCEDIMIENTO
4.1. Determinación de azúcares reductores por titulación
• Colocar una solución de dextrosa 0,5% a una bureta para la titulación.
• En un matraz colocar el reactivo Fehling A 5mL y el reactivo Fehling B 5mL
• Luego agregar 4 gotas de azul de metileno y 25mL de agua destilada.
• Calentar hasta ebullición constante y titular, hasta el viraje de color azul al color rojo
ladrillo.
• Repetir el procedimiento utilizando una muestra de miel (10g enrazar hasta 100mL
de agua destilada).

4.2. Determinación de azucares reductores por DNS

• Preparar los siguientes sistemas:
B S D

Agua destilada 0,5mL

Glucosa 2g/L 0,5mL

Muestra 0,5mL

Reactivo de DNS 2,5mL 2,5mL 2,5mL

• Llevar a ebullición los sistemas por 5 minutos y dejar enfriar por 10 minutos
aproximadamente en un recipiente con hielo.
• Luego agregar 3mL de agua destilada y agitar.
• Leer la absorbancia registrada en el espectrofotómetro a 540nm de longitud de onda
(dentro de los 30minutos).

4.3. Determinación de acidez (ácidos grasos libres)

• En un matraz colocar 10mL de leche más 25mL de agua destilada y gotas de
fenolftaleína.

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• En otro matraz colocar 2mL de vinagre más 25mL de agua destilada y gotas de
fenolftaleína.
• A ambos matraces titular con NaOH 0,1N hasta que vire el indicador de transparente
a rosado.

5. RESULTADOS
• Esquematizar el procedimiento de los experimentos.
• Mediante cálculos matemáticos determinar la concentración de azúcares
reductores.
• Mediante cálculos matemáticos determinar los ácidos grasos libres o acidez.

6. CONCLUSIONES

7. CUESTIONARIO
7.1. ¿Por qué la sacarosa no es un carbohidrato reductor?
7.2. ¿Mediante qué otras pruebas podemos determinar a los carbohidratos y lípidos?
7.3. ¿Cuál es el ácido graso representativo de la leche y del vinagre?
7.4. ¿Qué importancia tiene el tubo blanco y el tubo estándar en el método de
espectrofotometría?
7.5. ¿Explique el fundamento del DNS para determinar azúcares reductores?

8. BIBLIOGRAFIA