Porcedimiento para determinar azúcares por el Método de Lane y

Eynon
M.Sc. Iván Toro

PREPARACION DE LA MUESTRA:
1. Pesar de la cantidad adecuada de muestra y homogeneizar con 50 ml de agua. Llevar la
solución a un matraz aforado de 100 ml y enrasar hasta volumen con agua destilada.
Filtrar 25 ml de la solución anterior en un matraz aforado de 250 ml. Agregar 2 a 5 ml de
solución clarificante hasta lograr una precipitación completa. Llevar a volumen y filtrar usando
lana de vidrio.
2. En caso de usar acetato básico o neutro de plomo como solución clarificante, agregar una
pequeña cantidad de oxalato de sodio para eliminar el exceso de plomo. Filtrar nuevamente.

Esta es la sol. Clarificada que se colocará en una bureta y se utilizará en la determinación de

azúcares reductores.
ESTANDARIZACION DE LA SOLUCION DE FEHLING:
Para poder cuantificar los azúcares reductores presentes en la muestra problema, se debe
estandarizar la solución de Fehling. Como las titulaciones deben hacerse en un tiempo menor de tres
minutos se llevarán a cabo dos titulaciones, una preliminar que le permitirá conocer el volumen
aproximado de solución de glucosa que se gasta y una titulación final donde podrá proceder más
rápidamente.
Titulación preliminar:
1. Colocar 5 ml de la solución A y 5 ml de la solución B en una fiola de 250 ml. Añadir 15 ml de
agua destilada y algunas perlas de vidrio.
2. En una bureta de 10 ml colocar la solución de glucosa al 0,5 %. Dejar caer desde la bureta 8 ml
de sol. de glucosa y llevar a ebullición. Cuando el fluido hierva seguir calentando durante dos
minutos.
3. Agregar 2 a 3 gotas de azul de metileno al 1% o 1 ml al 0,2%.
4. Continuar agregando pequeñas cantidades de solución de glucosa, calentando continuamente
hasta que el líquido que se encuentra sobre el precipitado rojo, sea prácticamente incoloro.
5. Anotar el volumen de la solución de glucosa necesaria para reducir 10 ml de reactivo de Fehling
(A+B).

Titulación final:
1. Repetir el paso descrito en 1. de la titulación preliminar.
2. Tomar como base el resultado obtenido en la titulación preliminar y repetir la operación, pero
agregando de una vez el volumen de solución de glucosa igual al volumen gastado en la
titulación preliminar menos 0,5 ml.
3. Continuar la titulación agregando volúmenes muy pequeños de la solución de glucosa hasta
llegar al punto final, lo cual debe lograrse en un tiempo no mayor de 3 min.
4. Tomar en cuenta el valor de solución de glucosa gastado en la titulación final y calcular el título
del licor de Fehling expresado en mg de glucosa anhidra. Tomar nota del volumen de liquido
final en la fiola “VT” (10 ml de mezcla de Fehling + 15 ml de agua + cantidad de solución de
glucosa añadida).

Título de Fehling (TF) = 0,005 (g/ml) x ml gastados

M.Sc. Iván Toro H.

2019
DETERMINACION DE AZUCARES REDUCTORES:

Titulación preliminar:
Las muestras a titular deben estar lo más claras posibles.
1. Colocar en una fiola de 250 ml, 5 ml de sol. de Fehling A, y 5 ml de Fehling B y unas perlas de
vidrio.
2. Llevar a ebullición la mezcla de Fehling y verter rápidamente la sol. azucarada, desde la bureta.
A medida que la coloración azul cúprica se debilita, indica que la titulación está llegando a su
fin. Una vez alcanzado este punto agregar 2 - 5 gotas de azul de metileno (1%). Continuar
titulando hasta que desaparezca la coloración azul de la solución.
3. Anotar el volumen de la solución azucarada gastada.

Titulación final:
1. Restar del volumen final logrado en la estandarización del licor (VT), el volumen final logrado
en la titulación preliminar anterior y completar la diferencia con agua.
2. Repetir la titulación como se indicó en la titulación preliminar, pero vertiendo antes de calentar
el volumen total de la solución azucarada menos 1 ml.
3. Llevar ebullición durante 2 min. Agregar 2 - 3 gotas de azul de metileno (1%) y verter gota a
gota la solución azucarada, hasta decoloración del indicador. La duración total de la titulación
debe ser 3 min.
4. Anotar el volumen gastado de la solución azucarada.

TFx1000
% AR = x100
VxM

TF: Título de Fehling

V: volumen de muestra gastado en la titilación (ml)
M: Peso de la muestra (g)

DETERMINACION DE AZUCARES TOTALES:

1. Medir 50 ml de la solución clarificada con una pipeta volumétrica y colocarlos en un matraz

aforado (de 100 ml). Agregar 4 gotas de anaranjado de metilo, y después gota a gota HCl 4 N
hasta viraje a rojo.
2. Añadir 15 ml de HCl 0,1 N y calentar en baño de agua hirviente durante 30 min. Enfriar
rápidamente a 20 oC.
3. Añadir NaOH 0,125 N hasta alcanzar pH neutro (anote el volumen utilizado).
4. Aforar a 100 ml con agua destilada.
5. Determinar los azúcares totales como el caso de los azúcares reductores.

TFx2000
% AT = x100
VxM

TF: Título de Fehling

V: volumen de muestra gastado en la titilación (ml)
M: Peso de la muestra (g)

M.Sc. Iván Toro H.

2019