CUESTIONARIO PRÁCTICA 4 BACTER

1. ¿Qué es un medio de cultivo bacteriano?

2. ¿El medio de EMB (o MacConkey) es diferencial o selectivo? Explique por qué.
3. El medio de agar 110 es selectivo. Explique sus propiedades químicas
4. El medio de Manitol y Sal es diferencial y selectivo. Explique por qué
El agar manitol es selectivo gracias a la alta concentración de sal que posee. La
salinidad actúa como sustancia inhibitoria y evita el crecimiento de bacterias Gram
negativas.

También es diferencial debido a la presencia del carbohidrato manitol y al indicador de

pH rojo de fenol. A partir de este, las bacterias capaces de fermentar el manitol
producen ácidos, acidificando el medio, tornándose las colonias y el medio de color
amarillo (Gil, 2019).

5. ¿Por qué algunos medios son considerados como selectivos y diferenciales?

Son medios de cultivos que nos permiten distinguir entre varios géneros y especies de
microorganismos. Por ejemplo si al medio se le ha añadido un carbohidrato y un indicador y la
bacteria que se cultiva es capaz de fermentar dicho carbohidrato, se produce una acidificación
del medio con el consiguiente viraje de color del indicador por el cambio de pH.

Suelen ser a la vez selectivos, por lo tanto solo crecerán determinadas bacterias (pueden ser dos
o más tipos) que al actuar sobre alguno de los componentes específicos del medio, demuestran
algunas de sus propiedades o características y nos permite diferenciar entre ambos tipos (López
Tévez & Torres, 2019).
6. Investigue que son los medios altamente selectivos, mencione algunos ejemplos
y cuál es su utilidad.
7. ¿Qué es un medio enriquecido y uno de enriquecimiento?
8. ¿Cuáles indicadores de pH son utilizados con mayor frecuencia en
microbiología? Señale ejemplos, así como los cambios que se pueden observar
en cada uno de ellos.
Se utilizan principalmente: fucsina básica, verde brillante, verde de malaquita, cristal violeta,
eosina, azul de metileno, tionina, rojo neutro, etc.
Ejemplos:
La caja de agar sal-manitol contiene rojo de fenol como indicador de pH, cuya coloración
cambia de pH alcalino (rojo) a pH ácido (amarillo). Cuando hay producción de ácido a causa de
la fermentación del manitol, las colonias aparecen rodeadas de un halo amarillo (St. Aureus),
en cambio, cuando no hay fermentación del manitol, las colonias no presentarán cambio de
color (St. Epidermidis).

La caja de agar MacConkey contiene rojo neutro, lo que permite diferenciar las colonias rojas
características de las bacterias que atacan a la lactosa como E. Coli, de las que no atacan que
son incoloras como Salmonella.

9. Realice una tabla donde señale: la base de la clasificación, designación y

ejemplos de las clases de medios.

Clases de medios
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Base de la clasificación Designación Ejemplo

Según su estado físico Líquidos (caldos) Agua de peptona
Sólidos TSA
Semisólidos Agar de Hugh-Leiffson
Según su utilidad Nutritivos Agua de peptona, caldo de
tripticasa-soja
De enriquecimiento Agua de peptona-alcalina
Selectivos MacConkey, sal-manitol
Diferenciales MacConkey, sal-manitol
Transporte Stuart, Vankat-Ramakrishnan
Según su composición Naturales Sangre, agua
Sintéticos Agar
Semisintéticos Agar-sangre

10. ¿Por qué se flamean los bordes de los tubos antes y después de realizar la
siembra?

Para eliminar por incineración los microorganismos contaminantes que se encuentren

en esa zona, el mechero Bunsen no permite crear una zona aséptica de trabajo.

11. ¿Por qué se debe flamear el asa de cultivo al rojo vivo cada vez que se va a
realizar una siembra?
El mechero Bunsen no sólo crea una zona aséptica de trabajo, también nos permite esterilizar
diverso instrumental como el asa de siembra o el asa de vidrio, mediante la aplicación directa
de calor.

El asa de siembra debe de esterilizarse a la llama antes de usarla y después de haber sido
usada. Debe de esterilizarse antes para evitar la contaminación de los microorganismos en
estudio con otros microorganismos que estuvieran presentes en el filamento metálico. Debe de
esterilizarse después de su uso para evitar que los microorganismos que hemos tomado
contaminen el laboratorio o sean incluso un riesgo biosanitario.

12. Generalmente, ¿a qué temperatura deben incubarse los tubos y cajas y por qué?
Se incuban en un rango de temperatura de 25°C–40°C ya que estas son las temperaturas de
crecimiento óptimo de la mayoría de muchas bacterias.

13. Explique los fines que se persiguen en cada una de las técnicas de siembra.
14. ¿Qué condiciones deben de tener los medios de cultivo y el material del
laboratorio empleado para la siembra?
15. ¿Por qué deben evitarse corrientes de aire, reír, hablar, etc. al efectuar la
siembra?
16. ¿Cuál es la diferencia entre un cultivo puro y un mixto?
17. ¿Una colonia aislada es garantía de ser un cultivo puro?
18. En esta práctica ¿obtuvo una separación del medio de cultivo mixto? y ¿cómo lo
demostró?
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19. Las características de crecimiento en los diferentes medios de cultivo y por las
diferentes técnicas ¿podrían ser utilizados para identificar una bacteria?
Fundamente su respuesta.

REFERENCIAS.
Gil, M. (2019). Agar sal y manitol: fundamento, preparación y usos - Lifeder. Retrieved 20
September 2019, from https://www.lifeder.com/agar-sal-y-manitol/

López Tévez, L., & Torres, C. (2019). Medios de Cultivo. Retrieved 20 September 2019,
from http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp4.pdf