Glycinebetaine: un protector eficaz contra el estrés abiótico en

plantas

Glycinebetaine (GB) ha sido estudiado ampliamente como un soluto compatible debido a la

disponibilidad de plantas transgénicas acumuladoras de GB que albergan una variedad de
transgenes para la biosíntesis de GB. Tanto la aplicación exógena de GB como la biosíntesis
diseñada genéticamente de GB aumentan la tolerancia de las plantas al estrés abiótico. Como se
analizó aquí, los estudios de tal aumento de la tolerancia al estrés abiótico han llevado a un progreso
considerable en la caracterización de las funciones de GB en tolerancia al estrés en las plantas. En
particular, los órganos reproductivos de las plantas transgénicas acumuladoras de GB exhiben una
tolerancia mejorada al estrés abiótico. Además, la acumulación de GB produce un aumento de los
potenciales de rendimiento en condiciones de no estrés.

Glycinebetaine (GB), un protector eficaz contra el estrés abiótico

GB es totalmente N-metil-sustituido derivado de glicina, y se encuentra en una gran variedad de
microorganismos, plantas y animales superiores [1] . GB pertenece a un grupo de compuestos que se conocen
colectivamente como "solutos compatibles": pequeños metabolitos orgánicos que son muy solubles en agua y
no tóxicos en altas concentraciones. GB se acumula en los cloroplastos y plastidios de muchas plantas
halotolerantes. Estas plantas acumulan altos niveles de GB en respuesta al estrés abiótico [2, 3] . Los niveles
de GB acumulados se correlacionan generalmente con el grado de tolerancia al estrés [1] . GB estabiliza
eficazmente las estructuras cuaternarias de enzimas y proteínas complejas, Y mantiene el estado altamente
ordenado de las membranas a temperaturas no fisiológicas y las concentraciones de sal [4] . Tanto la
aplicación exógena de GB ( Tabla 1 ) como la introducción, a través de transgenes, de la vía de biosíntesis GB a
plantas que no acumulan naturalmente GB ( Tabla 2 ) aumentan la tolerancia de tales plantas a diversos tipos
de estrés abiótico. Esta mayor tolerancia al estrés abiótico proporciona sistemas útiles para investigar los
mecanismos mediante los cuales GB protege las plantas contra el estrés abiótico. De la vía de biosíntesis GB en
plantas que no acumulan naturalmente GB ( Tabla 2 ) aumentan la tolerancia de tales plantas a diversos tipos
de estrés abiótico. Esta mayor tolerancia al estrés abiótico proporciona sistemas útiles para investigar los
mecanismos mediante los cuales GB protege las plantas contra el estrés abiótico.
Entre los solutos compatibles, GB es un protector particularmente eficaz contra el estrés abiótico [5 -
7] . Estudios de GB se han centrado en la tolerancia mediada por GB a varios tipos de estrés y en diversas
etapas del ciclo de vida de las plantas [8, 9].
Tabla 1 . Aumento de la tolerancia al estrés abiótico a través de glicina betaína aplicada exógenamente en plantas
superiores

Especies de plantas Tipos de estrés Ambiente Refs

sal Cámara de crecimiento [44]
Congelación Invernadero [45]
Arabidopsis thaliana Congelación Cámara de crecimiento [46]
Oxidativo Cámara de crecimiento [13]
Refrigeración Cámara de crecimiento [40]
Avena sativa Sequía, sal Invernadero, campo [12]
 Especies de plantas Tipos de estrés Ambiente Refs
Brassica rapa Sequía, sal Invernadero [47]
Sequía, sal Invernadero, campo [12]
Fragaria X ananassa Congelación Invernadero [48]
Hordeum vulgare Sequía, sal Invernadero, campo [12]
Refrigeración Cámara de crecimiento [5, 10, 11]
Sequía Campo [49]
Lycopersicon esculentum
Sequía, sal Cámara de crecimiento [50]
Sequía, sal Invernadero [47]
Medicago sativa Congelación Cámara de crecimiento [51]
Oryza sativa sal Cámara de crecimiento [52]
Phaseolus vulgaris Sequía Invernadero [53]
Congelación Cámara de crecimiento [2]
Triticum aestivum
Sequía, sal Invernadero, campo [12]
Zea mays Refrigeración Cámara de crecimiento [54]

Tabla 2 . Plantas transgénicas diseñadas para sintetizar glicina betaína y su mayor tolerancia al estrés abiótico

Máxima Tolerancia
Especies de plantas Gene Ubicación subcelular Refs
acumulación mejorada
Coda Cloroplastos 1,2 μmol g -1FW Refrigeración [21]
Enfriamiento
Coda Cloroplastos 1,2 μmol g -1FW [24]
sal
Coda Cloroplastos 1,2 μmol g -1FW Calor [22]
Coda Cloroplastos 1,2 μmol g -1FW Luz fuerte [55]
Coda Cloroplastos 1,2 μmol g -1FW Congelación [46]
Arabidopsis
thaliana Coda Cloroplastos 1,2 μmol g -1FW sal [8, 44]
Sal, sequía,
timonel Citosol 1,9 μmol g -1DW [56]
congelación
CMO + BADH Desconocido ~ 900 μmol g -1 DW sal [57]
Sal,
ApGSMT Citosol ~ 2,0 μmol g -1 FW [18]
escalofriante
+ ApDMT [+5 mM de glicina] CuSO $ ₄ $
Brassica napus timonel Citosol 13 μmol g -1DW Sequía, sal [56]
Brassica juncea Coda Cloroplastos 0,82 μmol g -1FW sal [58]
Diospyras kaki Coda Cloroplastos 0,3 μmol g -1FW sal [59]
Gossypium hirsutum beta Citosol 354,3 μmol g -1 DW Sequía [60]
Lycopersicon 0,3 [hoja] μmol g -
Coda Cloroplastos 1 Refrigeración [9]
esculentum FW
 Máxima Tolerancia
Especies de plantas Gene Ubicación subcelular Refs
acumulación mejorada
1,2 [Flor] μmol g -
1 sal
FW
23 nmol mg - Enfriamiento
Coda Cloroplastos 1 [20]
clorofila sal
95 nmol mg -
Coda Citosol 1 Oxidativo
clorofila
120 nmol mg -
Coda Cloroplastos + citosol 1
clorofila
timonel Citosol 13 μmol g -1DW sal [56]
Sal,
Nicotiana tabacum beta Citosol 35 nmol g ^ {- 1} FW [61]
escalofriante
BADH Cloroplastos 4,6 μmol g -1FW Calor [31, 35]
Sal,
Coda Citosol 5,3 μmol g -1FW [15]
escalofriante
Sal,
Coda Cloroplastos 1,1 μmol g -1FW [15]
escalofriante
BetA(modificado) Mitocondrias 5,1 μmol g -1FW Sal, sequía [62]
Oryza sativa timonel Cloroplastos 3,1 μmol g -1DW sal [19]
Sal,
temperatura
CMO Cloroplastos 0,43 μmol g -1DW [63]
día / noche
(28/13 ° C)
Coda Cloroplastos 2,12 μmol g -1DW sal [64]
Oxidativo, [sesenta y
Solanum tuberosum Coda Cloroplastos 1,43 μmol g -1FW
sal, sequía cinco]
beta Citosol 5,7 μmol g -1FW Refrigeración [dieciséis]
Zea mays
beta Citosol 5,7 μmol g -1FW Sequía [17]

Aplicación exógena de GB
La aplicación exógena de GB puede mejorar la tolerancia de numerosas especies de plantas a diversos tipos de
estrés abiótico, y puede mejorar el crecimiento y rendimiento subsiguientes ( Tabla 1 ).

Cuando se aplica a las hojas de las plantas, GB es fácilmente absorbido por los tejidos foliares [10] . GB
también puede ser tomado a través de raíces [11] . Cuando GB se aplica a las hojas de planta de tomate
( Lycopersicon esculentum ), la mayor parte de la GB que es absorbido por las hojas se localiza en el citosol y
sólo una pequeña fracción de la GB cytosolic se transloca a los cloroplastos [10] . Cuando se aplicó [ 14 C]
glicina betaína a hojas de plantas de nabo de verano ( Brassica rapa L.), el GB marcado con radio se translocó a
las raíces en dos horas [11] . Durante las siguientes 24 h, el GB marcado con radio fue trasladado a todas las
partes de la planta. En plantas de tomate, Grandes cantidades de foliar aplicado GB fueron trasladados a los
tejidos que contienen meristemas, incluidos los capullos de las flores y ápices foliares. Se demostró que la GB
fue trasladado a activamente creciendo y expandiendo las porciones de plantas, la translocación de larga
distancia de GB está mediada por el floema
Las especies reactivas de oxígeno (ROS) se producen continuamente como productos de varias vías
metabólicas, incluso cuando las plantas están creciendo bajo condiciones de no estres. Estos ROS son
eliminados por una variedad de sistemas de defensa antioxidante que impiden que los ROS alcancen niveles
tóxicos. Todas las formas de estrés abiótico, incluyendo alta sal, enfriamiento, congelación y sequía, causan una
explosión oxidativa en las células vegetales. La aplicación de radicales hidroxilo (OH *) a las raíces
de Arabidopsis dio lugar a una masiva, dependencia de la dosis eflujo de iones K + de las células epidérmicas en
la zona de alargamiento [13] . Sin embargo, la presencia de GB a 5 mM en el medio de incubación redujo
significativamente este eflujo de iones K + . Además, en plantas de tomate, la aplicación Exógenamente de GB
redujo significativamente el enfriamiento producido por la producción de H2O2 [10] . Debido a que GB no
limpia directamente ROS, GB debe mitigar los efectos dañinos del estrés oxidativo de otras maneras, por
ejemplo activando o estabilizando enzimas que eliminan ROS y / o reprime la producción de ROS por un
mecanismo desconocido.

Biosíntesis de GB ingenierizada genéticamente

GB se sintetiza ya sea por la oxidación (o deshidrogenación) de la colina o por la N-metilación de la
glicina [14] . Los genes que codifican las enzimas biosintéticas GB han sido clonados de diversos
microorganismos y plantas, y se han producido plantas transgénicas de diversas especies que expresan uno o
varios de estos genes ( Tabla 2 ). Las plantas transgénicas acumulan GB en una variedad de niveles y exhiben
mayor tolerancia a una variedad de estrés abiótico ( Tabla 2 ). En plantas que no acumulan GB naturalmente,
los niveles más altos de GB acumulado se han encontrado en hojas de plantas de arroz codA- transgénico
( Oryza sativum ) [15] . En un acumulador natural de GB, el maíz ( Zea mays ), el mayor nivel reportado de
GB en hojas de plantas de maíz transgénicas-betA es de 5,7 μmol g -1 FW [16,17] . Por lo tanto, en términos de
niveles máximos de GB en plantas transgénicas, no parece haber ninguna diferencia significativa entre las
plantas que acumular GB naturalmente y las que no lo hacen. Además, las enzimas de metilación de glicina,
tales como ApGSMT y ApDMT ( Aphanothece halophyticaglicina sarcosina metiltransferasa y A.
halophytica dimetilglicina metiltransferasa, respectivamente, véase el Recuadro 1 ),

Cuadro 1
Acumulación de glicina betaína (GB) en la cianobacteria halotolerante Aphanothece halophytica

Las cianobacterias son procariotas con maquinaria fotosintética que se parece a la de las plantas tanto
estructural como funcionalmente [42] , y estas cianobacterias son capaces de realizar fotosíntesis oxigenica. Las
cianobacterias han colonizado con éxito una amplia gama de ambientes. Varias cepas de cianobacterias crecen
naturalmente en el agua hipersalina, como el Mar Muerto y el Lago Solar en el desierto del Sinaí [42] . Las
especies más halotolerantes pueden crecer en concentraciones de NaCl tan altas como 3 M [42,43] . Estas
cianobacterias son extremadamente tolerantes al estrés salino y sintetizar y acumular GB en su citoplasma [42,
43] . El crecimiento sostenido bajo estrés salino de Aphanothece halophytica, Una cianobacteria
extremadamente tolerante a la sal aislada del Mar Muerto, está mediada por la acumulación de GB [42, 43] . GB
es el principal soluto compatible en esta cianobacteria [43] . La mayoría de las vías biosintéticas conocidas para
GB incluyen la oxidación en dos etapas de la colina [14] . En A. halophytica , por el contrario, GB se sintetiza a
partir de glicina por una reacción de metilación en tres etapas que es catalizada por dos N-metiltransferases
(ApGSMT y ApDMT) [14, 18] . ApGSMT es responsable de las dos primeras reacciones de metilación que
convierten glicina en sarcosina y luego convertir sarcosina en dimetilglicina. ApDMT es responsable de la
metilación específica de la dimetilglicina para generar GB [14, 18] .

La cianobacteria Synechocystis sp. PCC 6803 pertenece a un grupo de cianobacterias de tolerancia a la sal
intermedia [42] . Puede crecer a concentraciones de NaCl de hasta 1,3 M. Estas cianobacterias sintetizan
glucosilglicerol como un soluto compatible a través de las acciones de dos enzimas, a saber glucosilglicerol
fosfato sintasa y glucosilglicerol fosfato fosfatasa. En algunos casos, también sintetizan la sacarosa como un
soluto compatible.
Un tercer grupo, del cual Synechococcus elongates es miembro, contiene cianobacterias que son menos
tolerantes al estrés salino que las cianobacterias mencionadas anteriormente [42] . S. elongates puede crecer a
concentraciones de NaCl de hasta 0,4 M. Sintetiza sacarosa y / o trehalosa como solutos compatibles.

En conclusión, para las cianobacterias, GB parece ser el soluto compatible más eficaz para la tolerancia de los
niveles extremos de sal en su hábitat natural.
Se generaron líneas de arroz transgénico productoras de GB en las que se expresó el gen cox para la colina
oxidasa de Arthrobacter pascens , fusionado a una secuencia dirigida al cloroplasto, bajo el control de un
promotor inducible de ácido abscísico (ABA) [un promotor inducible por estrés (SIP)] o el promotor de un gen
constitutivamente expresado para la ubiquitina (UBI) [19] . El nivel más alto de GB que se acumuló en
condiciones de alta NaCl [2,60 μmol g -1 de peso seco (DW)] en las líneas SIP no fue tan alto como en las líneas
UBI (3,12 μmol g -1 DW). Por lo tanto, el uso de un promotor inducible por ABA no fue particularmente eficaz
para la producción de GB de novo .

Acumulación de GB en cloroplastos
Dos factores principales que influyen en la tolerancia de las plantas al estrés abiótico son la concentración y la
localización de GB en la célula. En muchos estudios de ingeniería de la acumulación de GB en las plantas, las
enzimas biosintéticas GB se han dirigido a los cloroplastos. En algunos estudios, las enzimas han sido dirigidas
al citosol o a las mitocondrias, o al citosol y los cloroplastos simultáneamente ( Tabla 2 ).

En las plantas transgénicas- codA, el producto génico ha sido dirigido predominantemente a los
cloroplastos [14] . Las plantas transgénicas resultantes acumulan GB principalmente en sus cloroplastos, y
muestran tolerancia a diversos tipos de estrés abiótico [5 - 9] . En las plantas de arroz transformadas con una
construcción de codA dirigida a los cloroplastos, la maquinaria fotosintética estaba protegida contra el estrés
salino y el estrés en frío más eficientemente que en plantas de arroz transformadas con un codA dirigido al
citosol, aunque las plantas transgénicas de coda orientada al citosol acumularan , Cinco veces mayores niveles
de GB en las hojas [15] .

Otros tres tipos de plantas de tomate transgénicas se generaron utilizando un codAgen que fue dirigido a
cloroplastos (plantas Chl-codA), al citosol (plantas Cyt-codA), o para ambos,cloroplastos y citosol
simultáneamente (plantas ChlCyt-codA) [ 20] . Las plantas de Cyt-codA y ChlCyt-codA acumularon hasta 5.0 y
6.6 veces, respectivamente, los niveles más altos de GB en sus hojas que plantas Chl-codA (0,3 mmol g1 FW).
Los tres tipos de plantas transgénicas mostraron mayor tolerancia al frio que las plantas silvestres. En las plantas
de Chl-codA, la tolerancia al estrés del fotosistema II (PSII) y la frecuencia de germinación de las semillas
fueron similares a las de los otros dos tipos de plantas transgénicas. Sin embargo, La tolerancia al estrés durante
el crecimiento de plántulas de plantas Chl-codA fue mayor que las de plantas transgénicas, a pesar de que el
nivel de GB fue el más bajo en las plantas anteriores. Estas observaciones llevaron a la conclusión de que la
acumulación de GB en los cloroplastos es más eficaz que la acumulación de GB en el citosol para la protección
de las plantas contra el estrés abiótico. Parecía haber una correlación significativa entre los niveles de GB en los
cloroplastos y el grado de tolerancia al estrés oxidativo. Por el contrario, no hubo correlación evidente entre el
nivel de GB en el citosol y el grado de tolerancia al estrés.

En plantas de maíz transformadas con betA , la cantidad total de GB en las hojas fue mucho mayor que en las
hojas de plantas de tipo salvaje [16, 17] . Los niveles de GB en los cloroplastos tanto de las plantas transgénicas
como de tipo salvaje fueron muy bajos (~ 0,1 μmol g -1 FW en ambos casos). No obstante, hubo una diferencia
significativa en la tolerancia a la sequía entre estos dos tipos de plantas [16] . Por lo tanto, parece probable que,
en las plantas de maíz, la tolerancia mejorada a la sequía de estrés resultó de la GB en el citosol.
El fuerte efecto protector de GB en los órganos reproductivos
Las plantas son más sensibles al estrés abiótico en la etapa reproductiva. Por otra parte, la protección de las
plantas contra el estrés abiótico en la etapa reproductiva es esencial para los altos rendimientos en las zonas
propensas al estrés en todo el mundo. Parece que la introducción de la vía de biosíntesis GB en las plantas de
cultivo es una estrategia eficaz para aumentar el rendimiento de las plantas de cultivo bajo estrés abiótico.

Análisis de los niveles de GB en plantas de Arabidopsis con codA transgénico reveló que los diversos órganos
acumuladan diferentes niveles de GB, a pesar de que el codA gen fue impulsado por un constitutivo CaMV 35S
promotor [9] . En plantas completamente maduras, los niveles de GB en las flores, y los ápices de
inflorescencia eran aproximadamente cinco veces mayores que los de las hojas. Tales niveles elevados de GB
en los órganos reproductores de las plantas transgénicas podrían haber contribuido al aumento del número de
flores, inflorescencias y semillas cuando las plantas fueron cultivadas bajo condiciones de estrés. La exposición
transitoria de plantas de tipo silvestre al estrés salino durante tres días resultó en el aborto de las yemas florales
y un número reducido de semillas por fruto. El examen microscópico de estructuras florales reveló que, en
plantas de tipo silvestre ( Figura 1 una ), el estrés sal inhibió el desarrollo de las anteras, pistilos y los pétalos, y
la producción de los granos de polen y óvulos fue dramáticamente inhibida. En plantas trasgenicas con
capacidad de acumular GB ( Figura 1 b), estos efectos de estrés salino se redujeron significativamente. Las
plantas transgénicas produjeron un 21% y 45% más de frutos y semillas, respectivamente, que las plantas de
tipo silvestre después de la exposición transitoria de las plantas a 100 mM NaCl durante tres días [9] . Estos
resultados revelaron que la acumulación de GB en los órganos reproductivos puede proteger eficazmente la
formación de flores y semillas contra el estrés salino en plantas que acumulan GB.

Las plantas de tomate son susceptibles al estrés de por frio en la etapa reproductiva. Se examinaron los efectos
del tratamiento de frio a 3 ° C durante una semana en plantas maduras [5] , y las plantas que albergaron
el transgén codA mostraron un aumento significativo en la retención de flores y en el conjunto de frutas después
de la exposición a tales condiciones de enfriamiento. En general, las plantas de tomate transgénico acumuladas
en GB produjeron un promedio de 10% a 30% más de frutas después del tratamiento de enfriamiento que las
plantas de tipo salvaje.

Cuando las plantas de maíz transformadas con betA fueron expuestas al estrés por sequía en el campo, se
encontró que cantidades mucho mayores de GB se acumulaban en hojas de plantas transgénicas que en hojas de
plantas de tipo salvaje [16,17] . Cuando las plantas silvestres y transgénicas fueron sometidas a estrés por tres
semanas, el número de granos de polen disminuyó y la formación de las mazorcas se retrasó en ambos tipos de
plantas. Sin embargo, el desarrollo reproductivo (medido por el número de granos de polen y el tiempo de
sedimentación) de las plantas transgénicas fue menos inhibido por la sequía que el de las plantas
silvestres. Después de un tratamiento de sequía durante tres semanas, la biomasa de las raíces, la altura de la
planta, la biomasa del tallo y la biomasa foliar de las plantas transgénicas fueron todas mayores que las de las
plantas silvestres. El peso de los granos por planta en las líneas transgénicas fue de 10% a 23% mayor que el de
las plantas de tipo silvestre debido al aumento tanto del número como del peso de los granos. Así, las plantas
transgénicas de maíz, que acumulaban niveles elevados de GB, eran menos susceptibles que las plantas
silvestres al estrés por sequía.

Efecto de GB en flores, frutos y semillas en condiciones de no estrés

Hemos examinado el rendimiento y la calidad de las plantas transgénicas tolerantes al estrés abiótico cultivadas
bajo condiciones no estresantes y estresantes. En condiciones no estresantes, la codA transgén no tuvo efectos
negativos sobre la germinación de semillas de Arabidopsis [21] y en el crecimiento de las plantas
jóvenes [22] . Sin embargo, codA -transgenic Arabidopsis plantas produjeron 22% más flores (y silicuas) y 28%
más semillas que las plantas de tipo salvaje cuando se cultivan en condiciones de no estrés [9] .

Cuando las plantas de tomate de tipo salvaje y codA- transgénicas se cultivaron en condiciones normales, no
hubo diferencias visibles entre las plantas antes de la floración [23] . Sin embargo, la presencia
del transgén codA resultó claramente en el aumento de tamaño de los capullos y las flores en condiciones
normales ( Figura 2 a ) [23] . Los aumentos en los tamaños de todos los órganos florales eran también
evidentes. Sin embargo, el número de segmentos de pétalo fue el mismo en flores silvestres y transgénicas. Los
frutos maduros de las plantas transgénicas de tomate también eran considerablemente más grandes que los de
las plantas silvestres ( Figura 2b); Los frutos maduros de plantas transgénicas fueron, en promedio, 54% más
pesado que los de plantas de tipo salvaje [23] . Un examen microscópico de los tejidos del carpelo y pétalo
reveló que el agrandamiento de las flores en las plantas transgénicas codA estaba relacionado con la división
mejorada de las células y la expansión post-mitótico mejorada de las células en la pared externa del pericarpio
durante el desarrollo de las yemas florales.

Protección de la maquinaria fotosintética

En los años noventa, los estudios in vitro demostraron que a concentraciones tan altas como 1,0 M, GB
estabiliza el complejo PSII que evoluciona con el oxígeno contra altas concentraciones de sales o alta
temperatura protegiendo PSII contra la disociación de los polipéptidos extrínsecos [4] . Sin embargo, las
concentraciones de GB que son eficaces en la protección de las plantas transgénicas contra el estrés abiótico son
del orden de μmol g -1 FW ( Tabla 2 ). Incluso si GB se acumula exclusivamente en los cloroplastos, la
concentración de GB se calcula que es inferior a 100 mM [24] .

El estrés abiótico, como una alta concentración de NaCl, podría inactivar la maquinaria de traducción
directamente [25, 26] y / o podría actuar indirectamente a través de ROS, que se generan en la inhibición de la
fijación de CO2 [27, 28] e inhibir la Traducción [29-33] . Esta última hipótesis se basa en la conclusión de que
la Rubisco es inactivada bajo estrés térmico moderado [34, 35] y también en presencia de una alta
concentración de NaCl [36] . En el caso de la inactivación indirecta, el objetivo primario del estrés abiótico se
postula como Rubisco o Rubisco activase.

Cuando la cianobacteria Synechococcus sp. El PCC 7942 (en lo sucesivo Synechococcus ) se transformó con
un gen codA , las células sintetizaron GB en presencia de colina suministrada exógenamente y la acumulación
de GB alcanzo niveles de 60 a 80 mM. GB acumulada en Synechococcus transgénico contrarrestó el efecto
inhibitorio del estrés salino en la reparación de la PSII, pero no afectó el photodrama del PSII [37] . Los
experimentos de etiquetado de pulsos de radio de persecución revelaron que el estrés salino inhibía tanto la
degradación de la proteína D1 en PSII como la síntesis de la proteína D1 de novo y se encontró que GB
contrarrestó la inhibición inducida por sal de la degradación y síntesis De D1. Ni el estrés salino ni la
acumulación de GB afectaron los niveles de transcripciones de psbA [37] . Estas observaciones sugieren que
GB puede contrarrestar los efectos inhibitorios del estrés salino tanto en la traducción como en la proteolisis,
resultando en la aceleración de la reparación del PSII bajo estrés abiótico.

Las plantas transgénicas de tabaco que se habían transformado con el gen BADHpara la betaína aldehído
deshidrogenasa de espinaca acumulaban del 63% al 87% del GB total en los cloroplastos [35] . El análisis de
estas plantas de tabaco transgénico indicó que el estrés térmico moderado, es decir, 40-50 ° C, estimuló la
fotoinhibición de PSII y que la acumulación de GB in vivo aumentó la resistencia de PSII a la fotoinhibición
estimulada por el estrés térmico [31] . El efecto protector de GB en PSII se debió a la mejora de la reparación de
PSII bajo estrés térmico moderado. Parece probable que la inhibición de la fijación de CO 2 bajo estrés térmico
moderado podría acelerar la generación de ROS, que, a su vez, inhiben la síntesis de proteínas, Incluyendo la
proteína D1 [38] . Por lo tanto, es muy probable que GB pueda estabilizar la Rubisco bajo estrés térmico
moderado y así disminuir la generación de ROS, dando como resultado la protección de la maquinaria de
fotosíntesis.

Por el contrario, en las cianobacterias, que carecen de Rubisco activase, el estrés por calor moderado parece
afectar a la maquinaria de fotosintesis directamente, y GB actúa contrarrestando este efecto negativo sobre la
síntesis de la proteína D1 [39] . Parece que la acumulación de GB in vivo aumenta la termotolerancia de las
cianobacterias al contrarrestar los efectos inhibitorios del estrés térmico moderado sobre la reparación de la
maquinaria del PSII .

GB inducida por la expresión de genes específicos

Las concentraciones efectivas de GB Después de la absorción de la aplicación exógenamente de GB o como
resultado de la síntesis por ingeniería genética de GB in vivo están en el rango milimolar, como lo son las
concentraciones eficaces de hormonas vegetales [40] . Por lo tanto, es razonable postular que los efectos de GB
podría manifestarse a través de la inducción de la expresión de genes específicos cuyos productos están
involucrados en el desarrollo de tolerancia al estrés.

La acumulación de tres proteínas con respuesta sensible al frío después de la aplicación exógena de GB a las
plantas de trigo se examinaron [2] . La extensa acumulación de WCOR410 (reguladora del frio en trigo
410), regula la proteína que era dependiente de la concentración de GB, mientras que la acumulación de las
otras dos proteínas, WCS120 ( trigo en frio- sESPECÍFICOS 120) y WCS413, no eran afectadas por la cantidad
de GB aplicada. Sin embargo, las transcripciones de los genes wcor410 y wcor413 se acumulan tras la
aplicación exógena de 250 mM de GB. En plantas de tomate,

El análisis de microarrays de ADN se utilizó para identificar los genes cuya expresión se potenció por la
aplicación exógena de 100 mM GB a las hojas y las raíces de Arabidopsis [40] . Genes cuya expresión fue
reforzada por GB incluidos los genes de factores de transcripción, para el trafico de componentes de la
membrana, para enzimas de barrido de ROS y para el NADP dependiente de reductasa férrica que se
encuentra en la membrana plasmática. Northern blot reveló que la expresión de cuatro genes fue
significativamente mejorado durante el tratamiento de las raíces con GB durante 24 h. Las plantas de tipo
salvaje y los mutantes knockout que carecían de un gen RabAc4 intacto se trataron con o sin 100 mM de
GB. Después del tratamiento con GB durante 24 h, Las plantas se sometieron a enfriamiento a 4ºC durante 24 h
más y luego se incubaron en condiciones cálidas durante cuatro días. Las plantas de tipo salvaje respondieron al
tratamiento GB con un crecimiento claramente aumentado de raíces después del episodio de estrés por
enfriamiento, mientras que las plantas eliminadoras de RabA4C básicamente no fueron afectadas por el
tratamiento con GB. Los autores concluyeron que RabA4C es necesario para el efecto de GB en la tolerancia al
enfriamiento y que el tratamiento con GB mejora la tolerancia al estrés, al menos hasta cierto punto, a través de
la activación génica.

Se utilizó un microarrays de cDNA de tomate para comparar la expresión génica en capullos florales
de tomates de tipo salvaje y codA- transgénicos [23] . Se aumentó la expresión de 30 genes y se reprimió el de
29 genes en los capullos florales de las plantas transgénicas codA en comparación con las plantas de tipo
salvaje. Entre los genes cuya expresión se ha mejorado, se sabe que varios están implicados en la división
celular, tales como los genes para la ciclina D (CycD3 - 1), la proteína quinasa p34 / cdc2 dependiente de
ciclina (CDKA1) y la conjugación relacionada con la enzima ubiquitina (RCE1). Además, el análisis por
transcripción inversa semi-cuantitativa (RT) -PCR reveló que GB reprimió la expresión del gen fw2.2 ,

Tomadas en conjunto, las diversas observaciones analizadas anteriormente indican que GB, ya sea aplicado
exógenamente o sintetizado en plantas transgénicas, parece ser capaz de activar genes específicos. La
identificación de los genes inducibles por GB y las funciones de sus productos avanzarán nuestra comprensión
de la tolerancia al estrés aumentada por GB en las plantas.
Conclusión y perspectivas
Se ha empleado una variedad de genes para generar plantas transgénicas que se acumulan GB y son tolerantes al
estrés abiótico. Entre las propiedades de estas plantas transgénicas, los aspectos fisiológicos y morfológicos de
la tolerancia al estrés se han investigado más extensamente en las plantas transgénicas codA. Los estudios se
han centrado en la tolerancia al estrés en todas las etapas del ciclo de vida de las plantas, desde la imbibición de
las semillas hasta el crecimiento de las plantas jóvenes y la actividad fotosintética de las plantas maduras hasta
la producción de frutos y semillas.

Los efectos protectores de GB en los órganos reproductivos de plantas se han observado en Arabidopsis , maíz
y tomate. Esta protección podría haber sido mediada por los altos niveles de GB que se acumulan en los órganos
reproductivos como consecuencia de la translocación de GB de otros órganos, como las hojas. Además,
el transgén codA aumenta la productividad de las semillas y aumenta el tamaño de los frutos y flores en
condiciones de no estrés. Otros estudios deberían permitir el aumento de la tolerancia al estrés en numerosas
especies de cultivos, así como aumentos en el rendimiento. Los posibles mecanismos para la tolerancia
mejorada de las plantas a diferentes tipos de estrés abiótico incluyen, pero no se limitan a: (i) protección de la
maquinaria fotosintética; (Ii) inducción de genes específicos cuyos productos están implicados en la tolerancia
al estrés; (Iii) reducciones en los niveles de ROS bajo estrés; Y (iv) regulación de las actividades de las
proteínas del canal iónico, ya sea directamente o a través de la protección de la membrana plasmática.