DETERMINACIÓN DE PSEUDOMONAS AERUGINOSAS

“CAFETERIA CENTRAL DEL CENTRO BIOTECNOLÓGICO DEL CARIBE”

Fernando Hernandez Carrillo 1, Nicola Bolaño 2, Johnny Villalobos3, Osvaldo Martínez4,

David Amaya5.
Elaborado: Marzo 16 de 2019

RESUMEN
Los componentes físicos, químicos y microbianos pueden alterar las características propias del agua
sin afectar necesariamente de forma directa la salud. Para determinar la potabilidad del agua será
necesario evaluarle diferentes parámetros los cuales deberán cumplir con los requisitos establecidos
en el CAA, anexándose los requisitos de envasado en el caso de aguas embotelladas. Este trabajo tiene
como objetivo analizar la presencia de Pseudomonas aeruginosa en aguas de consumo para determinar
la inocuidad de la misma. La Pseudomonas aeruginosa es una bacteria oportunista con afinidad por el
agua y posee alta resistencia al cloro, afectando individuos inmunocomprometidos así como fábricas
lácteas y elaboradoras de agua envasada. Para determinar su presencia en aguas se trabajó con todas
las muestras (pozo, red, de red que pasaron por tanque, de pozo que pasaron por tanque, de mesa
envasada) recibidas en el laboratorio en un periodo de tiempo preestablecido, realizándose las pruebas
presuntivas y confirmatorias correspondientes. Se llegó a la conclusión que salvo las muestras de red
que pasaron por tanque, el resto dio presencia de Pseudomonas aeruginosa, por lo que se propusieron
algunas recomendaciones para obtener aguas seguras.

-Palabras clave: Agua, Potabilidad, Pseudomonas, Inocuidad.

ABSTRACT
The physical, chemical and microbial components can alter the characteristics of the water without
necessarily affecting the health directly. To determine the potability of water, it will be necessary to
evaluate different parameters which must comply with the requirements established in the CAA,
anexándose the packaging requirements in the case of bottled water. This work aims to analyse the
presence of Pseudomonas aeruginosa in drinking water to determine the safety of the same.
Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic bacterium with affinity for water and has high resistance
to chlorine, affecting immunocompromised individuals as well as dairy and packaging water
processing plants. To determine its presence in water was worked with all the samples (well, net, of
network that passed by tank, of well that passed by tank, of packaged table) received in the laboratory

1
in a preestablished period of time, performing the tests Presuntivas and Corresponding confirmatory.
It was concluded that except the samples of red that passed by tank, the remainder gave presence of
Pseudomonas aeruginosa, so some recommendations were proposed to obtain safe water.
Key words: Water, potability, Pseudomonas, innocuousness.
esterilizado sin tocar la boca del mismo ni el
1. INTRODUCCIÓN
interior del tapón.
Las pseudomonas desempeñan un papel El volumen a tomar debe ser el adecuado para
importante en la descomposición de materia que en una sola muestra se puede efectuar
orgánica presente en el medio ambiente, simultáneamente la totalidad de los análisis
algunas de ella según las diversas especies son microbiológicos y estará en función de las
patógenas para las plantas, animales e incluso técnicas analítica a utilizar para los análisis a
pueden afectar al hombre. utilizar.
P. aeruginosa se puede aislar de muestras de
2. MATERIALES Y METODO
suelos, aguas prístinas y contaminadas, así
como plantas y animales. Esta bacteria es capaz  MATERIALES
de utilizar una enorme variedad de compuestos
Instrumentos para preparar las muestras están
orgánicos como sustrato para crecer capacidad
previamente esterilizados
que le permite colonizar nichos.
 Gradillas
Una vez retirados los filtros u otros accesorios
 Tubos de ensayo tapa rosca
se procederá a una cuidadosa limpieza con agua
 Micropipetas
o alcohol.
 Balanza analítica
Con el grifo cerrado se flameara extremo del
 Espátula
mismo, mediante la llama obtenida con un
 Frasco Scott
poco de algodón empapado de alcohol y
 Haza
sosteniendo con una pinza o bien una lámpara
 Portaobjeto
de soldar.
 Agar cetrimide
Se abrirá el grifo para que el agua fluya
abundantemente y se renueve la contenida en la  Cajas de Petri estériles

tubería que la alimenta.se destapara el frasco  Filtros

 EQUIPOS

2
 Toma de muestras
 Baño de maría
 Autoclave En un frasco Scott se aplicó el glicerol y
mezclamos con el agua ya medida. Agitamos y
 Incubadora a 37ºC +/- 2ºC.
diluimos la mezcla.
 Incubadora a 45 -50°C
 Mechero Pesamos la cantidad correspondiente de agar
 Equipo de filtración cetrimide en la balanza electrónica, y se vertió
.
 PROCEDIMIENTO en un frasco Scott hasta diluir la mezcla.
Métodos: estría
Luego auto lavamos todos los elementos
Para el método de siembra se utilizó el método
Luego procedimos a dosificar 1 ml de muestra
de superficie el cual consiste en dividir las cajas
a los tubos de ensayo y luego se realizó lo
Petri y rotularlas de 10-1
mismo con el otro tubo seriada mente.
Se le adiciona el agar cetrimide, se dejó Llevamos a incubar.
gelificar, luego tomamos el aza la colocamos en
Dosificamos la cantidad necesaria en cada caja
contacto con la llama y esperamos a que cambie
(rotulada) de agar cetrimide hasta dejar
de color, le damos unos toques al agar y lo
gelificar, una vez listo tomar la aza, esterilizarla
colocamos dentro del caldo y lo pasamos en
en el fuego y tomar muestra de cada uno de los
forma de zigzag en el agar con cuidado para no
tubos y sembramos la caja correspondiente por
tocar las otras, así con 10-1
agotamiento. Llevamos a incubar

METODO: FILTRACION POR

MEMBRANA

Este método se basa en hacer pasar una muestra

de agua a través de una membrana micro
porosa, donde en su superficie quedan retenidos
microorganismos, posteriormente a la filtración
se hizo una siembra de la membrana en un
Figura 1. Siembra por estría
cultivo

3
 Figura 3. Toma de muestra

Figura 2. Equipo de filtración 3. RESULTADOS

Ausencia de pseudomona aeroginosa

Toma de las muestras de agua del sitio de
muestreo. 3. DISCUSIÓN (O ANÁLISIS DE RESULTADOS)

La muestra es de la fuente de la cafetería publica

1. Preparación de los envases para la toma
del centro biotecnológico del caribe (CBC), la
de muestra.
cual es para consumo humano, analizando los
2. Preparación de las hojas de cadena de
resultados, se observa que la muestra no
custodia.
presenta colonia de este tipo de
3. Coordinación para el transporte de las
microorganismos, lo cual de alta confiabilidad
muestras.
para su consumo.
4. Preparación de los equipos de seguridad.
5. Organización de la logística para la 4. CONCLUSION
campaña de muestreo.
La fuente de donde se tomó la muestra es de
TOMA DE MUESTRAS alta confiabilidad para ser consumida por el ser
humano.
Procedimiento de muestras de agua:
El agar cetrimide permite el crecimiento
• Se Llenó el recipiente de muestreo con una
selectivo de p aeroginosa y estima la formación
porción de agua del cuerpo hídrico muestreado.
de pigmentos. (procedimientos sanitarios para
el muestreo de agua pseudomonas aeruginosa)

4
 5. ANEXO:

Fig.1. Preparación de muestra y disoluciones

Fig.2.procedimiento (filtración por membrana)