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SALESIANA
BIOTECNOLOGÍA DE LOS
RECURSOSO NATURALES
BIORREMEDIACIÓN
PRINCIPIOS Y TÉCNICAS
1
DEFINICIÓN
La biorremediación puede ser definida como el
uso de organismos vivos, componentes celulares
y enzimas libres, con el fin de realizar una
mineralización o una transformación parcial, la
humificación de los residuos o de agentes
contaminantes y una alteración del estado redox
de metales.
2
BIORREMEDIACIÓN
El término biorremediación fue acuñado a
principios de la década de los '80. Los científicos
observaron que era posible aplicar estrategias de
remediación que fuesen biológicas, basadas en
la capacidad de los microorganismos de realizar
procesos degradativos.
3
HISTORIA
La Biorremediación es un proceso natural
desarrollado a lo largo de toda la historia
evolutiva de la Biosfera; como mecanismo de
autodepuración y de recuperación de nutrientes,
para mantener los ciclos biogeoquímicos,
responsables del equilibrio de los ecosistemas.
La biorremediación surge como una rama de la
biotecnología que busca resolver los problemas
de contaminación mediante el diseño de
microorganismos capaces de degradar
compuestos que provocan desequilibrios en el
medio ambiente.
4
HISTORIA
Edad antigua.
Edad media.
La revolución industrial.
1. Incremento de las fuerzas productivas.
2. Incremento de la población.
3. Incremento del consumo.
4. Creación de nuevos materiales y servicios.
5. Incremento de los residuos
5
HISTORIA
Economía de mercado
Globalización de la economía.
Problemas ambientales globales
6
BIORREMEDIACIÓN
Es similar a la biotecnología, en general sus
técnicas son específicas para casos particulares,
porque dependen directamente de las
condiciones del ecosistema a recuperar.
A veces, biorremediar un ambiente contaminado
puede requerir la elaboración de un
microorganismo genéticamente modificado que
sea eficiente sólo para ese caso.
7
COMPONENTES
Contaminantes.
Metodología de tratamiento.
Microorganismos capaces de biodegradar
xenobioticos.
Metodologías de análisis
Normas de Bioseguridad de laboratorio.
Normas de Bioseguridad ambiental
Marco Legal
8
CONTAMINANTES
Lodos industriales.
Lodos y cortes de perforación.
Lodos del tratamiento de residuos y aguas
residuales.
Pesticidas. Órgano clorados y órgano fosforados.
Metales pesados.
Bifenilos Policlorados.
Suelos contaminados con hidrocarburos.
Aguas residuales
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METODOLOGÍAS DE
TRATAMIENTO
Aerobias (ex situ, e in situ)
Bioventeo.
Bioaumentación
Bioestimulación
Landfarming
Compostaje
En Fase líquida
En Fase de lechada
En fase sólida
Fermentación
10
MICROORGANISMOS
1. Bacterias
2. Hongos
3. Algas
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BACTERIAS
Pseudomonas, corinebacterias y
micobacterias
Pseudomonas, Achromobacter,
Arthrobacter, Micrococcus, Nocardia,
Vibrio, Acinetobacter,
Brevibacterium,
Corynebacterium,
Flabobacterium,
BACTERIAS
Rhodococcus sp.
Stenotrophomonas maltophilia
Stenotrophomonas sp,
Pseudomonas sp,
14
Bacterias
Pseudomonas, corinebacterias y micobacterias
Pseudomonas, Achromobacter,
Arthrobacter, Micrococcus, Nocardia,
Vibrio, Acinetobacter,
Brevibacterium,
Corynebacterium,
Flabobacterium,
15
BACTERIAS
CULTIVOS
17
Clasificación bacteriana
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VARIEDADES MORFOLÓGICAS
Morfología bacteriana
Estreptococos
Tetracocoss
Estafilococos
19
TIPOS Y CRITERIOS DE
CLASIFICACIÓN BACTERIANA
Tipos de Clasificación
artificial
natural
Numérica
filogenética: las relaciones se establecen en base
a criterios evolutivos.
Las Características consideradas son: Caracteres
fenotípicos, Caracteres bioquímicos, Criterios
antigénicos y caracteres genéticos ( relación G+C
%, secuencias de ARNr, grado de hibridación)
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COLECCIONES DE CULTIVOS
TIPO
Todas las cepas/aislados y especies nuevas son
depositadas en una de estas colecciones, cuya
función es la de mantener y distribuir cultivos de
organismos vivos. Algunas son:
CECT: Colección Española de Cultivos Tipo
(Burjasot, Valencia).
ATCC: American Type Culture Collection.
DSM: Deutsche Sammlung von Mikroorganismen
und Zellkulturen GmbH.
21
BACTERIAS FOTOSINTÉTICAS
Existen tres grupos de bacterias Gram-
fotosintéticas:
1. Cianobacterias.
2. Bacterias rojas.
3. Bacterias verdes
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BACTERIAS FOTOSINTÉTICAS
Característica Cianobacterias Bacterias rojas Bacterias
verdes
Fotosíntesis Oxigénica Anaoxigénica Anaoxigénica
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CIANOBACTERIAS
Géneros:
Sin heterocistes: Oscillatoria y Spirulina
Con heterocistes: Anabaena.
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BACTERIAS ROJAS
Incluidas en el phylum Proteobacteria.
Unicelulares, móviles por flagelos.
Metabólicamente
muy versátiles
Bacterias rojas del azufre: Chromatium
Bacterias rojas no del azufre: Rhodospirillum y
Rhodobacter.
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BACTERIAS VERDES
Pequeño grupo de bacterias similares fisiológica,
nutricional y ecológicamente a las bacterias rojas.
Bacterias verdes del azufre
Phylum Chlorobi. Fotoautótrofos anaerobios.
Gen. Chlorobium.
Bacterias verdes no del azufre
Phylum Chloroflexi. Gén. Chloroflexus
(fotoheterótrofo, pudiendo ser fotoautótrofo o
quimioheterótrofo de forma facultativa).
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BACTERIAS
QUIMIOLITÓTROFAS
Organismos capaces de crecer en un medio
estrictamente mineral y en ausencia de luz,
obteniendo su ATP y poder reductor de la
respiración de un substrato inorgánico y
utilizando el CO2 como fuente de carbono. Este
tipo de metabolismo es exclusivo de bacterias y
arqueas.
La mayoría de las bacterias se incluyen entre las
Proteobacterias.
27
BACTERIAS
QUIMIOLITÓTROFAS
BACTERIAS NITRIFICANTES
Llevan a cabo la oxidación biológica de amoniaco
a nitrito y de éste a nitrato (nitrificación). Se
subdividen en dos grupos metabólicos:
· NH4 + a NO2 - Nitrosomonas, Nitrosococcus
· NO2 - a NO3 - Nitrobacter, Nitrococcus,
Nitrospira.
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BACTERIAS
QUIMIOLITÓTROFAS
OXIDADORES DE AZUFRE
Denominadas bacterias incoloras del azufre. Dos
grandes clases:
· Bacterias oxidadoras de H2S con formación de
depósitos intracelulares de S V.g. : deslizantes
filamentosos, tales como Beggiatoa y Thiothrix.
· Bacterias oxidadoras de H2S con formación de
depósitos extracelulares de S. Pequeño tamaño
celular V.g.: Thiobacillus, Thiomicrospira
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BACTERIAS
QUIMIOLITÓTROFAS
BACTERIAS DEL HIERRO
Algunas bacterias oxidan Fe(II) a Fe(III) y pueden
formar precipitados pardo-rojizos de óxidos o
hidróxidos del mismo. En la mayoría de los casos
se trata de quimioheterótrofos que no obtienen
energía del proceso (Vg. bacterias con vaina tipo
Leptothrix).
Sólo son verdaderos quimiolitoautótrofos T.
ferrooxidans y Leptospirillum ferrooxidans (Ph
ácido, aguas de minas, biolixiviación) y
Gallionella (aguas dulces, pH neutro).
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BACTERIAS GRAM- AEROBIAS
Metabolismo respiratorio aerobio (todas son
catalasa +). Si son móviles, lo son por flagelos.
Estas bacterias pueden oxidar prácticamente
cualquier tipo de substrato orgánico como fuente
de C y E. Clásicamente los géneros se
establecían en función de la morfología celular y
la inserción de los flagelos. Hoy en día están
distribuidas entre las alfa, beta y gamma
Proteobacterias.
31
BACTERIAS GRAM- AEROBIAS
PSEUDOMONAS Y GRUPOS AFINES.
La antigua familia Pseudomonadaceae (incluía a
las bacterias Gram- quimioheterótrofas aerobias
que presentan flagelos con inserción polar) hoy
está distribuida entre:
Proteobacteria:
orden Burkholderiales
fam. Burkholderiaceae, gen. Burkholderia, v.g. B.
cepacia.
fam. Comamonadaceae, gen. Comamonas.
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BACTERIAS GRAM- AEROBIAS
En esta fam. se incluyen también las bacterias
con vaina filamentosas Sphaerotilus y Leptothrix.
Orden Rhodocyclales, gen. Zooglea, v.g. Z.
ramigera.
Proteobacteria:
Orden Pseudomonadales, fam.
Pseudomonadaceae, gen. Pseudomonas, v.g. P.
putida, P. aeruginosa.
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BACTERIAS FIJADORAS DE
NITROGENO
RIZOBIOS (Orden RHIZOBIALES)
Bacterias quimioheterótrofas aerobias Gram- con
flagelación subpolar o, por degeneración,
peritrica. Géns. Rhizobium (V.g. R.
leguminosarum:, R. melitoti) y Bradyrhizobium.
Gén. Agrobacterium (V.g. A. tumefaciens).
AZOTOBACTERIAS (actualmente incluidas en la
Fam. Pseudomonadaceae)
Fijan N2 en condiciones de crecimiento aerobio y
vida libre. Frecuentes en suelos y aguas de
regiones templadas.
34 Géns.: Azotobacter , Azomonas.
BACTERIAS GRAM -
ANAEROBIAS FACULTATIVAS
Existe dos familias: Fam. Enterobacteriaceae.
Fam. Vibrionaceae. Las bacterias coliformes
como índice de contaminación fecal.
Enterobacteriaceae, está constituido por 40
géneros entre los que podemos citar:
Escherichia, Salmonella, Shigella, (bacterias
coliformes intestinales), Enterobacter, Serratia,
Proteus (de suelos y aguas) y Yersinia (patógeno
de animales).
35
BACTERIAS GRAM -
ANAEROBIAS FACULTATIVAS
Orden Vibrionales, fam. Vibrionaceae. Muy
similares a los anteriores pero con flagelación
polar, forma curva y oxidada +. Acuáticas.
Géneros: Vibrio, hotobacterium.
Algunas especies de Vibrio y Photobacterium son
bioluminiscentes, pudiendo ser utilizadas como
biosensores y en analítica para detectar
contaminación en aguas.
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BACTERIAS GRAM-
ANAEROBIAS
I. BACTERIAS FERMENTADORAS
Anaerobias estrictas, metabolismo
exclusivamente fermentativo. Grupo filogenético
independiente (Phylum Bacteroidetes, gen.
Bacteroides; Phylum Fusobacteria, gen.
Fusobacterium).
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BACTERIAS GRAM-
ANAEROBIAS
II. BACTERIAS REDUCTORAS DEL AZUFRE /
SULFATORREDUCTORAS
Anaerobios estrictos. Obtienen su energía
mediante respiración anaerobia (utilizan SO42- o S0
como aceptor de e-). Incluidas en las
proteobacterias.
Hábitat: sedimentos anaerobios.
Géneros: Desulfovibrio, Desulfobacter SO42-.
Desulfuro monas S0
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BACTERIAS GRAM-POSITIVAS
I: UNICELULARES FORMADORES DE
ENDOSPORAS
Aerobios: gen. Bacillus. La mayoría de las
especies son saprófitas y se encuentran en el
suelo (mayoritarios), agua, aire y vegetación,
siendo importantes agentes mineralizadores de
la materia orgánica.
B. subtilis, B. cereus , B. anthracis, B.
thuringiensis (insecticida biológico contra orugas
y mosquitos), B. stearothermophilus (indicador
biológico esterilización autoclave, compostaje.
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BACTERIAS GRAM-POSITIVAS
Anaerobios: gen. Clostridium. Grandes, a veces
pleomorfos. Esporas deformantes (centrales o
terminales). Habitantes del suelo, incluyendo
algunas especies patógenas (exotoxina, sin
capacidad invasiva).
C. botulinum, C. tetani, C. perfringes, C.
pasteurianum (fija N2 atmosférico), C. butiricum
y C. acetobutilycum.
40
BACTERIAS GRAM-POSITIVAS
II: UNICELULARES NO ESPORULANTES:
BACTERIAS DEL ÁCIDO LÁCTICO
Fam I. Lactobacillaceae
Gen. Lactobacillus (bacilos regulares). V.g. L.
bulgaricus, L. lactis, L. brevis, L. salivarus
Fam. IV. Enterococcaceae
Gen. Enterococcus (E. faecalis)
41
BACTERIAS GRAM-POSITIVAS
Fam. V. Leoconostocaceae
Gen. Leuconostoc
Fam. VI. Streptococcaceae
Gens. Streptococcus (S. pneumoniae , S.
pyogenes); Lactococcus (L. lactis, L.
cremoris)
42
BACTERIAS GRAM-POSITIVAS
III: ACTINOMICETES
ACTINOBACTERIAS Y MICROCOCOS. Escaso
o nulo desarrollo miceliar. Son saprófitas del
suelo donde actúan como importantes agentes
mineralizadores (Arthrobacter) o forman parte de
la biota normal (Micrococcus, Actinomyces).
CORINEBACTERIAS.
C. diphteriae, agente de la difteria.
Mycobacterium: M. tuberculosis y M. leprae son
los agentes causales de la tuberculosis y la lepra.
Nocardia. Micelio fragmentario. Saprófitas del
43 suelo donde degradan muchos compuestos.
ARQUEAS
En base a sus características fisiológicas y
ecológicas se subdividen en tres grupos:
1. Metanógenas: ocupan ambientes anaerobios
y su único modo de obtener E es mediante la
formación de CH4
2. Halófilas extremas: viven en ambientes
hipersalinos
3. Termófilas S-dependientes: ocupan Hábitat
extremadamente calientes y, en ciertos casos,
también muy ácidos.
44
ARQUEAS
METANOBACTERIAS
Methanobacteriales, v.g. Methanobacterium
Methanococcales, v.g. Methanococcus
Methanomicrobiales, v.g. Methanospirillum
Methanosarcinales, v.g. Methanosarcina,
Methanosaeta
45
ARQUEAS
46
ARQUEAS
ARQUEOBACTERIAS TERMOFILAS
DEPENDIENTES DEL AZUFRE.
Todas obtienen energía reduciendo u oxidando
azufre. Son quimiolitoautótrofas, mixótrofas o
heterótrofas.
Thermococcus.
Thermoproteus, Desulfurococcus.
Sulfolobus, Acidianus.
47
Bacterias Gram negativas Bacillus
cereus
48
Bacterias Gram positivas
Serratia marcescens .
49
Pared celular Gram negativa
50
Pared celular Gram positiva
51
Mecanismos de asimilación
52
Macro y micronutrientes
Elemento % en peso seco Fuente Función
Macronutrientes
Carbono 50 Componentes orgánicos o CO2 Constituyentes del material celular
Oxígeno 20 H2O, componentes orgánicos, CO2, y O2 Constityentes del material celular y agua celular, el
O2 es el aceptor de electrones de la respiración
aeróbica.
Nitrógeno 14 NH3, NO3, componentes orgánicos, N2 Constituyentes de los amino ácidos, ácidos
nucléicos, nucleotidos, y coenzymas
Micronutrientes
Sulfuro 1 SO4, H2S, So, compuestos orgánicos Constituyentes de cysteina, methionina,
sulfurados. glutathione y varias coenzymas
54
Medio de cultivo para
Cyanobacterias
Componente g/litro Propósito
MgSO47H2O 0.075 Fuente de magnesio y azufre
55
Mezcla de microelementos
Componente g/litro
H3BO3 2.86
MnCl24H2O 1.81
ZnSO47H2O 0.22
NaMoO42H2O 0.39
CuSO45H2O 0.079
Co(NO3)26H2O 0.049
56
Medio de aislamiento para
pseudomonas
Component grams/liter Purpose
57
HONGOS
Penicillum
Aspergillum
Mucor
Candida,
Rhodotorula
Sporobolomyces
Phanerochaetes
Chrysosporium
HONGOS
Hongo ligninolítico Stereum hirsutum.
59
ALGAS
Ulva
Chlamidomonas
Nostoc
Anabaena
ANABAENA
NOSTOC
Plantas
Pasto elefante
Esterilla.
Junquillo
Totora
Kikuyo
Lenteja de agua
Nenúfar
Lirio de agua
63
Plantas acuáticas
64
Plantas de pantano
65
CAMPOS DE APLICACIÓN
Tratamiento de residuos industriales
Tratamiento de metales pesados
Minería
Tratamiento de suelos contaminados con
pesticidas e hidrocarburos.
Tratamiento de residuos agroindustriales.
Generación de energía.
Tratamiento de aguas residuales urbanas
66
CAMPOS DE APLICACIÓN
Tratamiento de residuos industriales
Tratamiento de metales pesados
Minería
Tratamiento de suelos contaminados con
pesticidas e hidrocarburos.
Tratamiento de residuos agroindustriales.
Generación de energía.
Tratamiento de aguas residuales urbanas
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MÉTODOS EN MICROBIOLOGIA I. AISLAMIENTO Y
CULTIVO DE MICROORGANISMOS
PRINCIPIOS DE NUTRICIÓN MICROBIANA y
MEDIOS DE CULTIVO
Para crecer los microorganismos en el laboratorio
se emplean medios de cultivo. Estos deben de
poseer todas los nutrientes necesarios a las
concentraciones adecuadas para permitir el
crecimiento del microorganismo en cuestión. La
materia viva está compuesta por:
- C, O, N, H, P, S, K, Na, Ca, Mg (98%)
- Cl, Fe, Mn, Co, Cu, Mo y Zn,
68
MÉTODOS EN MICROBIOLOGIA I. AISLAMIENTO Y
CULTIVO DE MICROORGANISMOS
por lo que todos estos elementos deben estar
disponibles para el microorganismo. Repasar
forma de aportar los principales macronutrientes
(C, O, N, P, S).
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Definiciones básicas
Medio sintético o definido: compuesto por
nutrientes químicamente definidos.
Medio complejo o indefinido: contiene
ingredientes de composición desconocida
(v.g.: extracto de levaduras).
Prototrofía: capacidad para sintetizar todos
los compuestos orgánicos que se necesitan a
partir de la principal fuente de carbono.
Auxotrofía: incapacidad de sintetizar algún
compuesto (v.g.: vitaminas).
70
FACTORES QUE INCIDEN
Concentración de contaminantes
Disponibilidad de carbono y nutrirntes (NPK)
Temperatura
pH
Humedad
Conductividad
Aireación
Estimulantes
Metales pesados
Estructura del residuo y del suelo
Tipo de residuo
71
Temperatura
Temperatura
Determina la velocidad de crecimiento y puede
también ser determinante sobre el tipo de
microorganismos que ocupan un ecosistema. La
velocidad de una reacción química es
función de la temperatura, y sigue la Ley de
Arrhenius:
Log10 V= - AH + C
2.303RT
72
Efecto de la temperatura
73
Mínimos, óptimos y máximos de
temperatura
Bacterias Habitat Mínimo Óptimo Máximo
Listeria monocytogenes Animales, suelo, vegetación, agua 1 30-37 45
76
Relación de los microorganismos
con el oxígeno
Organismo Habitat Relación de oxígeno
78
Influencia del pH
79
Influencia del pH
Organismo Habitat Mínimo pH Óptimo pH Máximo pH
81
Halo-tolerancia
Organismo Habitat Minimo de actividad acuosa
para el crecimiento
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OTROS FACTORES
Potencial redox
Radiación electromagnética
CO2
Presencia de agua líquida
Presión atmosférica, hidrostática y osmótica.
El desarrollo de los microorganismos (cómo de
cualquier ser vivo) se rige por dos principios:
Ley del Mínimo de Liebig (1840).
Ley de la Tolerancia de Shelford.
83
AISLAMIENTO
Para trabajar con un microorganismo en
condiciones definidas en el laboratorio es
necesario primero proceder a su aislamiento, es
decir a separarlo del resto de las poblaciones con
las que coexiste en la naturaleza.
Para el aislamiento se de organismos utilizan
medios sólidos (agar. Ventajas) o líquidos.
84
MEDIOS SÓLIDOS
Siembra (extensión o vertido) en placa.
Separación e inmovilización de organismos de
forma individualizada en un medio nutritivo
sólido.
Cada individuo al multiplicarse origina una
colonia.
Método: diluciones consecutivas de la muestra.
85
MEDIOS LÍQUIDOS
Solo utilizable para aislar la especie
predominante en un cultivo mixto. Método de la
dilución límite.
86
MEDIOS SELECTIVOS
Medios que favorecen el crecimiento de un
microorganismo específico. Se emplean cuando
el organismo que quiere aislarse se encuentra en
forma minoritaria. Pueden utilizarse para:
Enriquecer: medios líquidos que tienden a
seleccionar los organismos de tasa de
crecimiento más elevada entre todos aquellos
que pueden hacerlo bajo las condiciones
impuestas
87
MEDIOS SELECTIVOS
Aislar directamente: medios sólidos que permiten
aislar colonias. Suelen llevar un inhibidor que
impide el desarrollo de los demás
microorganismos.
88
CUANTIFICACIÓN DE
MICROORGANISMOS
Recuento de viables.
Se utiliza una técnica similar al aislamiento en
placa: diluciones seriadas y siembra en placas
(30-300 bacterias/placa).
Recuento de totales.
Medida del número de células:
1. Directo mediante microscopio (cámaras de
recuento de Newbaver).
2. Contador electrónico de partículas (contador de
Coulter)
89
CUANTIFICACIÓN DE
MICROORGANISMOS
Medida de la masa celular.
Turbidimetría (densidad óptica). Se utiliza un
colorímetro (Repasar la ley de Lamber- Beer:
A=ebC, o log Ii/It = k*C). Es el método más
utilizado.
Peso seco
90
Ecosistemas microbianos
91
Fuentes termales marinas
92
CINÉTICA MICROBIANA
CRECIMIENTO MICROBIANO
“El crecimiento de células, microorganismos, células
vegetales y animales, puede mirarse bajo dos aspectos o tipos
de crecimiento reproductivo.
a) Células individuales o población de células en
crecimiento sincronizado para estudio del ciclo de vida
celular. Procesos en laboratorio.
b) División estocástica de la población, o división al
azar.
CINÉTICA MICROBIANA
MEDICIÓN DEL CRECIMIENTO MICROBIANO .
El cálculo del número de células que existen en una
suspensión se puede llevar a cabo mediante el recuento
celular (microscopía, número de colonias), masa celular
(peso seco, medida del nitrógeno celular, turbidimetría) o
actividad celular (grado de actividad bioquímica con relación
al tamaño de la población). Todos estos métodos se clasifican
en dos apartados: métodos directos y métodos indirectos.
CINÉTICA MICROBIANA
Métodos directos:
¨ Recuento del número de células en una cámara Thoma
¨ Peso seco celular
¨ Determinación de nitrógeno o de proteínas totales
¨ Determinación de DNA
CINÉTICA MICROBIANA
Métodos indirectos:
¨ Recuento de colonias en placa
¨ Recuento sobre filtro de membrana
¨ Consumo de oxígeno
¨ Liberación de dióxido de carbono
¨ Concentración de un enzima constitutivo
¨ Decoloración de un colorante
¨ Incorporación de precursores radiactivos
¨ Medida de la turbidez
CINÉTICA MICROBIANA
El peso seco (contenido de sólidos) de las células bacterianas
que se encuentran en una suspensión se obtiene por el secado
de un volumen en un horno a 105°C hasta peso constante.
Esta técnica es útil para grandes volúmenes de muestra,
debido a que diferencias del orden de los miligramos
representan el peso de un gran número de bacterias. La
desventaja de este método es que componentes volátiles de la
célula pueden perderse por el secado y puede existir alguna
degradación. También la muestra seca puede recobrar
humedad durante el pesado, principalmente si el ambiente
tiene una humedad relativa alta.
CINÉTICA MICROBIANA
PESO ESPECÍFICO ANHIDRO:
Xf = x o e μ t
CINÉTICA MICROBIANA
Puesto que xf es también igual a 2kt xo, la relación entre k y
μ puede derivarse combinando las dos ecuaciones:
Xo e μ t = 2kt xo
Suprimiendo los factores comunes, tomando logaritmo
natural y despejando μ, se obtiene:
μ = k(ln 2) = 0.693 k
Así, se puede calcular μ, el ritmo de crecimiento instantáneo
para un quimiostato, multiplicando k por 0.693
TÉCNICAS EXISTENTES
Aerobias (ex situ, e in situ)
Bioventeo.
Bioaumentación
Bioestimulación
Landfarming
Compostaje
En Fase líquida
En Fase de lechada
En fase sólida
Fermentación
112
TIPOS DE BIORREMEDIACIÓN
Tratamiento anarobio. En ausencia de oxígeno,
produce gases indeseables como: metano,
amoníaco, gas sulfhídrico, mercaptanos.
Tratamiento aerobio. En presencia de oxígeno,
produce gas carbónico, vapor de agua y
compuestos simples inertes.
TECNICAS
In situ. Son las aplicaciones en las que el suelo
contaminado es tratado, o bien, los
contaminantes son removidos del suelo
contaminado, sin necesidad de excavar el sitio.
Es decir, se realizan en el mismo sito en donde
se encuentra la contaminación.
TECNICAS
Ex situ.La realización de este tipo de tecnologías,
requiere de excavación, dragado o cualquier otro
proceso para remover el suelo contaminado
antes de su tratamiento que puede realizarse en
el mismo sitio (on site) o fuera de él (off site).
TRATAMIENTO VENTAJAS DESVENTAJAS
SUELO
Diseño
Hidrocarburo Agua Suelo Tratado paisajístico
121
BIOVENTEO
Estimula la biodegradación natural de
cualquier compuesto biodegradable en
condiciones aerobias. El aire se suministra en
el sitio contaminado a través de pozos de
extracción, por movimiento forzado
(extracción o inyección), con bajas
velocidades de flujo, con el fin de proveer
solamente el oxígeno necesario para sostener
la actividad de los microorganismos
degradadores
LANDFARMING
La superficie del suelo contaminado es
tratado en el mismo sitio por medio del arado.
El suelo contaminado se mezcla con agentes
de volumen y nutrientes, y se remueve
periódicamente para favorecer su aireación.
Las condiciones del suelo (pH, temperatura,
aireación) se controlan para optimizar la
velocidad de degradación y generalmente se
incorporan cubiertas u otros métodos para el
control de lixiviados.
Landfarming
SUELOS Y LODOS
ESTABILIZADOS
Muestreo
Orgánicos
Hongos Bacterias Disposición final
124
FITORREMEDIACIÓN
Proceso que utiliza plantas para remover,
transferir, estabilizar, concentrar y/o destruir
contaminantes (orgánicos e inorgánicos) en
suelos, lodos y sedimentos, y puede aplicarse
tanto in situ como ex situ. Los mecanismos de
fitorremediación incluyen la rizodegradación,
la fito-extracción, la fitodegradación y la
fitoestabilización.
BIORREACTORES
Plataforma
Encapsulantes
Materia orgánica (nutrientes)
Residuos.
Material de relleno.
Personal.
Manual de bioseguridad para las operaciones.
Encapsulantes
Materiales que permiten atrapar
contaminantes presentes en los residuos
industriales tales como: metales pesados,
hidrocarburos, materia orgánica.
1. Biosoil
2. Zeolitas
3. Carbón activado.
4. Cascarilla de arroz
Materia orgánica
Residuos orgánicos tales como:
1. Citricos (frutas en general)
2. Hortalizas.
3. Estiércol de ganado.
4. Restos de forrajes.
5. Restos de jardinería
COMPONENTES
Plataforma
Encapsulantes
Materia orgánica (nutrientes)
Residuos.
Material de relleno.
Personal.
Manual de bioseguridad para las operaciones.
Residuos
Suelos contaminados con hidrocarburos.
Lodos y residuos industriales.
Lodos del tratamiento de aguas.
Aceites y derivados de hidrocarburos.
Residuos de actividades agropecuarias.
Residuos químicos
Herbicidas y pesticidas.
Material de relleno(esponjante)
Cascarilla de arróz.
Viruta
Aserrin.
Musgo/líquenes
Restos de coco y palmiste
Tratamiento de lodos y suelo
Lodos y suelo
Lixiviados Tratamiento
Adición de aguas Impermeabilización
cascarilla
136
AGUAS
RESIDUALES
Tratamien
Decantadores
to de
aguas
Lechos en Lechos de lijado Lechos en
línea paralelo
Filtración Biodegradación
Anaerobia
Lechos de pulido
Aerobia
Filtración Biodegradación
Microaspersión
NPK
orgánico Cascarilla Bacterias Riego por
goteo
Cítricos Aserrín Hongos
Volteo
verduras Vagaso manual
semanal
138 Desechos
orgánicos
Derrame Exxon- Valdez
139
EXPERIENCIAS PRÁCTICAS
Tratamiento de Fluidos, cortes y ripios de perforación.
Tratamiento de suelos contaminados con hidrocarburos.
Tratamiento de residuos industriales
Tratamiento de aguas negras urbanas y de camales.
Tratamiento de residuos agroindustriales
140
PROCESO TÍPICO
Visita de campo
Muestreo
Identificación y aislameinto de microorganismos.
Pruebas de biodegradabilidad.
Preparación del pool bacteriano
Reproducción masiva de m/o.
Trabajos de biorremediación
141
Operaciones de preparación
142
Suelos en tratamiento
143
SUELOS CONTAMINADOS CON
HIDROCARBUROS
Sistema in situ
Sistema ex situ
Tratamiento anaerobio
Tratamiento aerobio.
1. Landfarming en plataforma.
2. Landfarming en piscinas
144
DESCRIPCIÓN
Estabilización de residuos
Deshidratación
Maduración
Tendido y adición de materia orgánica en fermentación.
Mezclado
Control de parámetros
Muestro
Recirculación de lixiviados
145
PROCESO
Visita de campo
Muestreo
Identificación y aislamiento de
microorganismos.
Pruebas de biodegradación.
Preparación del pool bacteriano
Reproducción masiva de m/o.
Trabajos de biorremediación
PROCESOS
Estabilización de residuos
Deshidratación
Maduración
Tendido y adición de materia orgánica en
fermentación.
Mezclado
Control de parámetros
Muestro
Recirculación de lixiviados
Estabilización de residuos
Los residuos se estabilizan con ayuda de
sustratos especializados, que permiten su
manejo seguro, que evitan su diseminación en el
entorno.
Los sustratos más utilizados son: Biosoil,
guaspan, Humisol, y otros.
DESHIDRATACIÓN
Los residuos húmedos, una vez estabilizados se
someten a deshidratación en plataformas
impermeabilizadas, camas metálicas.
El excedente de humedad es recogido y
almacenado en fosos para su tratamiento en el
sistema de aguas residuales.
MADURACIÓN
Los residuos estabilizados y deshidratados, se
dejan en reposo o maduración por un tiempo
aproximados de dos a tres semanas, para que
los microorganismos presentes en el sistema, se
adapten, y se inicien procesos naturales de
oxidación y reducción, necesarios para el
tratamiento biológico.
TENDIDO DE RESIDUOS
Los residuos estabilizados se disponen en
la plataforma de tratamiento, en forma
uniforme. Se adicionan dos componentes:
1. Materiales esponjantes, en relación 2-1
2. Materia orgánica (fuente de nutrientes y
microorganismos), según las ecuaciones de
balance de masas.
MEZCLA
Al adicionar el material esponjante, se logra la
creación de poros, que contribuyen a la aireación
de los residuos y facilitan la biodegradación
aeróbica.
La mezcla debe ser lo más homogénea posible
ADICIÓN DE MATERIA
ORGÁNICA
BIORREMEDIACIÓN DE LODOS
INDUSTRIALES CAMPAMENTO BASE DE
WEATHERFORD
171
Residuos industriales
Residuos que se caracterizan por su elevado contenido de
sustancias inorgánicas u orgánicas de elevada resistencia a la
biodegradación y alta toxicidad para los ecosistemas.
Este es el tipo de residuos que se trataron en la empresa
Weatherford, que en el presente curso utilizamos como
modelos de Gestión Integral de Residuos Industriales.
Estudio de caso
Gestión Integral de residuos industriales, Campamento Base
de Weatherford (General Pipe), El Coca.
Weatherford es una compañía de servicios petroleros
dedicada al mantenimiento, limpieza, venta y reparación de
tuberías y herramientas de perforación, con más de 18 años
en el mercado nacional, acantonada en la Provincia de
Orellana, junto al aeropuerto de la ciudad de El Coca.
Antecedentes
En el 2005, el departamento de QHSE de Weatherfor, en
fiel cumplimiento a las disposiciones emanadas de las
políticas ambientales de Weatherfor Internacional, inició un
ambicioso programa de Gestión Integral de los Residuos
Industriales generados en las actividades operativas del
Campamento Base
Antecedentes
Con la asistencia técnica de la Compañía Oilenergy, se
implementó un sistema de tratamiento de aguas industriales y
un sistema de gestión de residuos aceitosos mediante
Landfarming.
Realizó el Estudio de Impacto Ambiental de sus operaciones
a solicitud del I. Municipio de El Coca.
Antecedentes
Realizó modificaciones operativas, para reducir la generación
de residuos.
Emprendió un programa de capacitación ambiental y
profesionalización de su personal.
Introdujo desengrasantes biodegradables, para las
operaciones de lavado de tuberías.
Campamento base
TALLERES
ACEITE
Diseño del
Floculación AGUA Floculación
sistema
FILTRACIÓN
de Gestión
LODOS
Sistema Móvil
LODOS de
Residuos
Industriale
s
ALMACENAMIENTO
Estabilización
“Ex Situ”
Almacenamiento
Muestreo “ Ex Situ”
Almacenamiento
Cuneta
Manejo de
Guaipes Aceite- diesel Óxidos Otros
residuos
Recolección
Almacenaje Almacenaje
Cisterna Reciclado
de
Biorremediación almacenamiento
Compactación
Incineración
Transporte
Cenizas Disposición
Vaccum final
Cementera Oleoducto
Landfarming en Plataforma
Fue el sistema elegido para el tratamiento de residuos de
hidrocarburos y otros residuos industriales generados en el
Campamento Base.
Al efecto se adecuó el área, anteriormente utilizada como
zona de almacenamiento de residuos, por mas de 8 años.
Se construyeron camas de maduración y posteriormente la
plataforma de landfarming.
Residuos a
tratar
Landfarming
SUELOS Y LODOS
ESTABILIZADOS
Muestreo
Orgánicos
Hongos Bacterias Disposición final
Camas de
maduración
DESCRIPCIÓN
Estabilización de residuos
Deshidratación
Maduración
Tendido y adición de materia orgánica en fermentación.
Mezclado
Control de parámetros
Muestro
Recirculación de lixiviados
Estabilización de residuos
Camas de
maduración
Adición de materia orgánica
Mezclado
Plataform
a de
tratamient
o
Vista de plataforma
Jardineras
para
disposición
de
residuos
tratados
Jardín frente al casino
Frutos cultivados en residuos
tratados
Producción hortícola
Tratamiento de aguas
residuales
Inicialmente se implementó un sistema móvil de tratamiento
químico de aguas residuales.
Posteriormente se construyó una planta de tratamiento de
aguas en los espacios donde anteriormente se almacenaban
los residuos aceitosos y las aguas de lavado de tubería.
Se propuso un esquema de tratamiento, cuyos componentes
se detallan en el diagrama de flujo.
Tratamiento de aguas
AGUAS DE LAVADO
Separación de
fases
Crudo Agua
Transporte
Vaccum Filtración Aireación Muestreo Disposición
final
Landfarming Alcantarilla
Aguas de lavado de tuberías
Aguas residuales a tratar
Aguas
aceitosas
Aguas ácidas de chemplate
Sedimentos aceitosos
Aguas tratadas
Sistema de tratamiento de
aguas
Planta de
tratamient
o
RESULTADOS
Residuos industriales:
TPH = 97373 ppm a 1360 ppm, en 210 días
Cortes y fluidos de perforación
NO3 = 45000 ppm a 230 ppm en 37 días
Suelos contaminados.
TPH = 63366,30 ppm a 577,55 ppm en 176 días y en laboratorio en
42 días
Residuos de tanques de combustibles
TPH = 409041,98 ppm a 217354,95 ppm en 32 días
Decremento de TPHs
101000 3
9737
91000
81000 7
7120
71000
61000
mg/kg
51000 7
4739
41000
2
31000 3528
5
21000 2552 2459
6
8
1988 2 1559 6 1522 9 431 2
11000 1456 1
MA
1000 NO R
04
05
05
05
05
05
05
05
05
04
05
1/
2/
1/
2/
3/
3/
4/
4/
5/
6/
6/
/1
/1
/0
/0
/0
/0
/0
/0
/0
/0
/0
21
09
30
15
07
22
06
25
16
02
21
FECHA DE ENSAYO
TENDENCIA DE LOS TPHS DE MAYO 2006 HASTA AGOSTO
2007
1,4 60
1,2 50
1 Hidrocarburos Totales
40
0,8 LIMITE INF.
30
0,6 LIMITE SUP
20
0,4
0,2 10
0 ma l 0
ag io
ri
ero
ag o
yo
rzo
ma o
se osto
o
dic ubre
ab
jun
y
re r
ost
bre
ma
oc re
en
feb
b
t
iem
em
pti
TPHs en lixiviados
60
50 Datos Obtenidos
40
Limit. Permisi sin
m g/L
30 impermeabilización de
la base
20 Limit. Permisi. Con
impermeabilización de
10 la base
0
09/11/200 29/12/200 17/02/200 08/04/200 28/05/200 17/07/200
4 4 5 5 5 5
FECHA
TENDENCIA DE EL PH EN LIXIVIADOS DE ENERO
HASTA AGOSTO
14 25
12
20
10 Potencial Hidrogeno
8 15 Limite suo
6 10 limite inf
4
5
2
0 0
ril
io
ro
yo
e
bre
ab
jun
re
br
ma
feb
iem
em
pti
dic
se
TENDENCIA DE LA CONDUCTIVIDAD ELECTRICA DE ENERO
HASTA AGOSTO
9000 16000
8000 14000
7000 12000 Conductividad electica
6000 10000
5000 LIMITE
8000
4000 LIMITE INF
3000 6000
2000 4000
1000 2000
0 0
ma il
ag io
feb ro
ag yo
yo
rzo
r
ma o
pti o
o
dic tubre
ab
jun
rer
e
bre
se ost
ost
oc re
ma
en
b
iem
em
TENDENCIA DEL BARIO DE ENERO HASTA AGOSTO
6 35
5 30
25 Bario
4
20 LIMITE
3
15 LIMITE INF
2
10
1 5
0 ril 0
io
ero
yo
rzo
yo
o
o
pti o
dic re
ab
jun
rer
ost
ost
bre
bre
ma
ma
tub
ma
en
feb
ag
ag
iem
em
oc
se
Cadmio en lixiviados
0,6
0,4
0,3
impermeabilización
de la base
0,2
Limit. Permisi. Con
0,1 impermeabilización
de la base
0,0
09/11/2004 29/12/2004 17/02/2005 08/04/2005 28/05/2005 17/07/2005
FECHA
TENDENCIA DEL CADMIO DE MAYO 2006 HASTA AGOSTO
2007
0,12 6
0,1 5
cadmio
0,08 4
LIMITE
0,06 3
LIMITE INF
0,04 2
0,02 1
0 0
ril
io
ero
yo
rzo
yo
o
se osto
to
dic re
ab
jun
rer
bre
bre
os
ma
tub
ma
ma
en
feb
ag
ag
iem
em
oc
pti
Cromo en lixiviados
12
10 Datos obtenidos
8
Limit. Permi. Sin
mg/L
6 impermeabilización
de la base
4
Limit. Permisi. Con
2 impermeabilización
de la base
0
09/11/200 29/12/200 17/02/200 08/04/200 28/05/200 17/07/200
4 4 5 5 5 5
FECHA
TENDENCIA DEL CROMO DESDE MAYO 2006 HASTA AGOSTO
2007
1,2 12
1 10
0,8 8 cromo
0,6 6 LIMITE
0,4 4 LIMITE INF
0,2 2
0 0
ril
io
ero
yo
yo
rzo
o
se osto
o
dic re
ab
jun
rer
ost
bre
bre
ma
ma
tub
en
ma
feb
ag
ag
iem
em
oc
pti
TENDENCIA DEL VANADIO DESDE MAYO 2006 HASTA
AGOSTO 2007
0,45 2,5
0,4
0,35 2
0,3 vanadio
0,25 1,5
LIMITE
0,2 1
0,15 LIMITE INF
0,1 0,5
0,05
0 0
l
io
ri
ero
yo
yo
rzo
o
se osto
dic bre
o
ab
jun
re r
bre
ost
bre
ma
ma
en
ma
tu
feb
ag
ag
iem
em
oc
pti
Vanadio en lixiviados
3
Datos Obtenidos
2
impermeabilización
1 de la base
Limit. Permisi. Con
1 impermeabilización
de la base
0
09/11/200 29/12/200 17/02/200 08/04/200 28/05/200 17/07/200
4 4 5 5 5 5
FECHA
CONCLUSIONES
Conjunto de técnicas viables para tratar residuos.
Sistemas prácticos y simples, de bajo costo.
Los residuos orgánicos se pueden utilizar como fuente de
carbono y nutrientes.
Posibilidades de obtención de subproductos: energía,
abonos, biomasa.
Empleo de la biotecnología para mejorar los rendimientos.
Weatherford es la empresa pionera en la Gestión Integral de
Residuos Industriales.
RESULTADOS
Residuos industriales:
TPH = 97373 ppm a 1360 ppm, en 210 días
Cortes y fluidos de perforación
NO3 = 45000 ppm a 230 ppm en 37 días
Suelos contaminados.
TPH = 63366,30 ppm a 577,55 ppm en 176 días y en
laboratorio en 42 días
Residuos de tanques de combustibles
TPH = 409041,98 ppm a 217354,95 ppm en 32 días
219
Tasas de degradación de
TPHs
5,000
4,500
4,000
3,500 Ue1
lnCo/C TPHs
3,000 Ue2
2,500 Ue2(2)
2,000 Ue3
1,500 Ue3(2)
1,000
0,500
0,000
0 8 15 22 32
tiem po (dias)
220
Decremento de TPHs
101000 3
9737
91000
81000 7
7120
71000
61000
mg/kg
51000 7
4739
41000
2
31000 3528
5
21000 2552 2459
6
8
1988 2 1559 6 1522 9 431 2
11000 1456 1
MA
1000 NO R
04
05
05
05
05
05
05
05
05
04
05
1/
2/
1/
2/
3/
3/
4/
4/
5/
6/
6/
/1
/1
/0
/0
/0
/0
/0
/0
/0
/0
/0
21
09
30
15
07
22
06
25
16
02
21
FECHA DE ENSAYO
221
Degradación de TPHs,
laboratorio
REDUCCIÓN TPH Ue2(2)
Concentración ppm
70000
60000
50000
40000
Serie1
30000
20000
10000
0
04/06/2003
11/06/2003
18/06/2003
25/06/2003
09/07/2003
16/07/2003
02/07/2003
Tiempo
222
TPHs en lixiviados
60
50 Datos Obtenidos
40
Limit. Permisi sin
m g/L
30 impermeabilización de
la base
20 Limit. Permisi. Con
impermeabilización de
10 la base
0
09/11/200 29/12/200 17/02/200 08/04/200 28/05/200 17/07/200
4 4 5 5 5 5
FECHA
223
Cadmio en lixiviados
0,6
0,4
0,3
impermeabilización
de la base
0,2
Limit. Permisi. Con
0,1 impermeabilización
de la base
0,0
09/11/2004 29/12/2004 17/02/2005 08/04/2005 28/05/2005 17/07/2005
FECHA
224
Vanadio en lixiviados
3
Datos Obtenidos
2
impermeabilización
1 de la base
Limit. Permisi. Con
1 impermeabilización
de la base
0
09/11/200 29/12/200 17/02/200 08/04/200 28/05/200 17/07/200
4 4 5 5 5 5
FECHA
225
Cromo en lixiviados
12
10 Datos obtenidos
8
Limit. Permi. Sin
mg/L
6 impermeabilización
de la base
4
Limit. Permisi. Con
2 impermeabilización
de la base
0
09/11/200 29/12/200 17/02/200 08/04/200 28/05/200 17/07/200
4 4 5 5 5 5
FECHA
226
CONCLUSIONES
Conjunto de técnicas viables para tratar residuos.
Sistemas prácticos y simples, de bajo costo.
Los residuos orgánicos se pueden utilizar como fuente de
carbono y nutrientes.
Posibilidades de obtención de subproductos: energía,
abonos, biomasa.
Empleo de la biotecnología para mejorar los rendimientos.
227
ESTUDIO DE CASO
228
TRATAMIENTO DE AGUAS
RESIDUALES
¿Qué son?
Son sistemas de lechos sumergidos, que emulan los pantanos
húmedos naturales en el tratamiento de aguas residuales
industriales, negras y lixiviados
¿COMO TRABAJAN?
Submerged Bed Systems (SBS)
• Están diseñados para imitar los procesos que ocurren en
los pantanos naturales.
• Utilizan plantas y suelos propios de pantanos naturales.
• Emplean microorganismos asociados a las plantas para el
tratamiento de aguas
¿Cómo trabajan?
2. Tratamiento biológico.
Operación :
• Generación de malos olores.
• Generación de ruido.
• Incremento de caudales que sobrecargan las plantas de
tratamiento.
• Contaminación secundaria por formación de aerosoles,
gases, residuos de cloro, combustibles,lodos descargados
a los ríos.
Tratamiento químico convencional
Rendimiento:
• Remoción de contaminantes hasta un 70%.
• Baja efectividad para eliminar metales pesados.(ósmosis
inversa)
• Necesidad de , aireación para eliminar excesos de Fe,y
Mn.
• Necesidad de ablandamiento, para eliminar Ca y Mg.
Tratamiento Químico
Costo m 3 tratam iento quím ico
10
Costo m 3 USD
5 TQ
0
1 2 3 4 5 10 11
Años
Tratamiento por PSA
Variación costo USD/ m3
6
5
Costo USD
4
3 SBS
2
1
0
1 2 3 4 5 10 11
Años
Nuestra propuesta
ESTUDIO DE CASO
“ENCANA”
PROYECTO LANDFARMING
Resultados obtenidos
Observaciones
Conclusiones
Recomendaciones
PROYECTO LANDFARMING
ETAPA PRE-OPERATIVA
INTRODUCCIÓN
Los lodos de perforación de la QMAX poseen altos
contenidos de nitratos, que superan los niveles
permitidos por la legislación ambiental ecuatoriana,
factor que limita la incorporación de dichos lodos a
actividades agrícolas y a proyectos de recuperación de
suelos erosionados y deforestados de la amazonía
ecuatoriana, constituyéndose en una fuente potencial de
contaminación de aguas superficiales y subterráneas.
INTRODUCCIÓN
Con la participación y asistencia técnica del personal
profesional de DISCAL, se desarrollo un producto eficaz
denominado BIOSOIL, que exitosamente se viene
empleando en la estabilización de lodos de perforación, en la
reducción de los niveles de metales pesados y en la mejora de
sus propiedades de fluidez y viscosidad.
INTRODUCCIÓN
Ahora se propone emplear BIOSOIL, en la desnitrificación
de lodos de perforación mediante Landfarming, con la
introducción de cepas bacteriales desnitrificadoras, de tal
forma que el nivel de nitratos; sea el adecuado como para
soportar y mantener el desarrollo de especies vegetales de
interés maderero e industrial.
PROYECTO LANDFARMING
Objetivos
Determinar la idoneidad del BIOSOIL para su
aplicación en landfarming.
Aislar e identificar cepas bacterianas con
potencial degradador de nitratos.
Establecer la mezcla óptima que garantice la
más alta tasa de desnitrificación.
PROYECTO LANDFARMING
Determinar la efectividad de la propuesta de
desnitrificación mediante landfarming.
Establecer la frecuencia de inyección de cepas
bacterianas en el tratamiento.
ETAPA I
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN SE
CEPAS BACTERIANAS
Actividades Realizadas
ADQUISICIONES
Compra del material de campo para
muestreo inicial
Implementación de laboratorio para
trabajo microbiológico
Actividades Realizadas
Etapa I
Recolección bibliográfica
Internet
Bibliografía especializada
Bergey”s Manual of Determinative
Bacteriology
APHA, Metodos Estandarizados
Principios de Biorrecuperación,
Actividades Realizadas
Etapa I
Recolección bibliográfica
Biotratamiento de Residuos Tóxicos y
Peligrosos
Microbiología del suelo
TRABAJO DE CAMPO
1. Toma de muestras en el sector de
Lumbaqui. Para obtener microroganismos
capaces de biodegradar nitratos.
2. Muestreo de cortes, ripios y lodos de
perforación, para identificar los
componentes y propiedades físico-químicas
MUESTREO
Se enviaron, las muestras de suelos y lodos a Gruntec, para
los análisis correspondientes, de contenido de metales
pesados, nitratos, HPA, y parámetros físicos como: pH,
conductividad (tabla de la ley 1215 para las Operaciones
Hidrocarburíferas).
MUESTREO
Aislamiento bacteriano.
1. Se han aislado 60 tipos de cepas morfológicamente
diferentes de las muestras de lodos y cortes de Lumbaqui.
2. Se identificaron 11 cepas con cualidades desnitrificadoras
ETAPA II
DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN DE
CELDAS EXPERIMENTALES
CONSTRUCCIÓN DE
UNIDADES EXPERIMENTALES
A G R A F IC O C O M P A R A T IV O
N itra to s vs T ie m p o
16000
14000
12000
10000
Nitratos (ppm)
8000
6000
4000
2000
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
T ie m p o (d ía s)
UE1 UE2 UE3 UE4 UE5
Resultados obtenidos
Pruebas de biodegradación
GRAFICO COMPARATIVO
Población vs Tiempo
7.E+09
6.E+09
Población bacteriana (ufc/g)
5.E+09
4.E+09
3.E+09
2.E+09
1.E+09
0.E+00
0 1 2 3 4 5 6 7 8
Tiempo (días)
GRAFICO COMPARATIVO
pH vs Tiempo
7.8
7.6
7.4
pH
7.2
6.8
6.6
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO EN DÍAS
UE1 UE2 UE3 UE4 UE5
Resultados obtenidos
Tasa de biodegradación
2
1.8
1.73
1.6
1.55
1.4 1.4
1.2
ln(Co/C)
1.04
1
0.8
0.63
0.6 0.57
0.4
0.35
0.29
0.24
0.2 0.17
0.103
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
TIEMPO (días)
0.515
0.505
0.5
K/h
0.5
0.495
0.49 0.49
0.485
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5
UNIDAD EXPERIMENTAL
PROYECTO LANDFARMING
Conclusiones
La relación Biosoil, lodo óptima recomendada es 2.0- 2.5
sacos de Biosoil por metro cúbico de lodo.
La relación lodo/ suelo recomendada es de 1/0.5 a 1/1
respectivamente.
El volumen de Bacmax por metro cúbico de lodo será de 15
– 20 litros/ m3, cada 48 horas.
La alcalinidad generada por la desnitrificación es
compensada por los ácidos húmicos, fúlvicos y cítrico
presentes en el BIOSOIL.
PROYECTO LANDFARMING
Conclusiones
BIOSOIL, es un sustrato idóneo para ser utilizado en
técnicas de landfarming
Fuente de nutrientes para la microflora
bacteriana
Mejorador de la estructura del suelo
Agente quelante de metales pesados
La desnitrificación de lodos y cortes de perforación es
factible mediante el empleo de cepas bacterianas
desnitrificadoras autóctonas.
ETAPA III
APLICACIÓN DE CAMPO
ACTIVIDADES
Reuniones de trabajo y planificación de campo.
Desbroce y adecuación de espacios.
Construcción de accesos.
Instalación de campers.
Construcción de piscinas.
Instalación del sistema de provisión bacteriana.
ACTIVIDADES
Construcción de pozos de control, bermas y canales
perimetrales.
Inicio de las operaciones de tratamiento.
Operaciones de tratamiento.
Control de parámetros de proceso.
Evacuación de cortes tratados.
ACTIVIDADES
Reconformación del relieve.
Forestación perimetral del área de tratamiento.
REUNIONES DE TRABAJO
Con el personal técnico de ENCANA.
1. QHSE.
2. Logistica.
Con el personal de apoyo de AZUL y CETAGUA.
Con la comunidad
DESBROCE Y ADECUACIÓN