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Introduccion
• Objetivo General
– Determinar los parámetros cinéticos de una cepa
“Parámetros cinéticos en cultivo de Aspergillus japonicus, creciendo en medio
sumergido.” líquido.
• Objetivos Específicos
Práctica de laboratorio N° 1 – Determinar cinética de crecimiento del cultivo.
– Establecer los perfiles de actividad amilolítica
producida durante el cultivo.
– Relacionar los perfiles de actividad enzimática que
produce la cepa con la curva de crecimiento.

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Activación del Hongo y preparación del

Metodología y condiciones de cultivo inóculo
• Se multiplicará Aspergillus japonicus en cultivo por lote, en
frascos erlenmeyer con bafles de 125 ml, conteniendo 30 ml
de medio de cultivo. Incubación, Extracción,
• Desarrollo 48 hs, T° 25 °C Agua c/tween
1. Activación del Hongo y preparación del inóculo.
2. Preparación del Medio de Cultivo e Inoculado Esporos de A Japonicus
3. Preparación del inóculo y cultivo en medio líquido. (almacenados a 5°C)
4. Toma de Muestra
Siembra en medio ADP
5. Procesamiento de las muestras Nuevos esporos
1. Filtrado
2. Obtención de Extractos Acuosos
6. Determinación de Recuento y
1. Peso seco Dilución
2. pH
3. Azucares Totales y Reductores Inóculo
4. Actividad α-amilasa Solución esporulada
(1*106 esp/ml) Agitación

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Siembra e Incubación Procesamiento de las Muestra

*cada frasco contiene 30 ml de
medio de cultivo esterilizado Incubación Para cada muestra
Lavar con Agua Fracción Analizador de H %,
Determinación de Peso
sólida
seco

Agitador orbital
Inóculo
T= 25 °C, 115 rpm
(1*106 esp/ml)
Centrifugación
5 min, 5000 rpm
Tabla de Muestreo Fracción
Muestra
Hora Dia Muestra Hora muestreo liquida
0 28/08/2017 #00 08:00 a.m
Filtrado
4 28/08/2017 #01 12:00 p.m (bomba de vacio,
8 28/08/2017 #02 16:00 p.m con filtro de Extracto Acuoso
12 28/08/2017 #03 20:00 p.m papel)
24 29/08/2017 #04 08:00 a.m
28 29/08/2017 #05 12:00 p.m Toma de Muestras
32 29/08/2017 #06 16:00 p.m
36 29/08/2017 #07 20:00 p.m
según cronograma
48 30/08/2017 #08 08:00 a.m
pH Azucares Totales Actividad
y Reductores enzimática

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Análisis de Datos, Resultados y

Conclusiones

Tabla de Muestreo Determinaciones

Azucares Azucares
Muestra Dia Hora Biomasa Act. Enzimática
Totales Reductores
#00 28/08/2017 0
#01 28/08/2017 4
#02 28/08/2017 8
#03 28/08/2017 12
#04 29/08/2017 24
#05 29/08/2017 28
#06 29/08/2017 32
#07 29/08/2017 36
#08 30/08/2017 48