Guia de Laboratorio 2015

Universidad Nacional Abierta y a Distancia – UNAD - Vicerrectoría Académica y de Investigación - VIACI
ESCUELA DE CIENCIAS DE BÁSICAS TENOLOGÍA E INGENIERÍA ECBTI

CURSO METODOLÓGICO DE 3 CREDITOS
BIOQUÍMICA 201103
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA
GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO
BIOQUÍMICA
ALBERTO GARCÍA JEREZ

Docente - Director
Bucaramanga
BIOQUÍMICA 201103
1 Contenido
2 INTRODUCCIÓN................................................................................................................ 5
3 PRE INFORME DE LABORATORIO.................................................................................. 6
3.1 Portada......................................................................................................................... 6
3.2 El Índice General .......................................................................................................... 6
3.3 Introducción .................................................................................................................. 6
3.4 Revisión bibliográfica.................................................................................................... 6
3.5 Materiales y Métodos ................................................................................................... 6
3.6 Plan de Trabajo ............................................................................................................ 6
3.7 Nomenclatura ............................................................................................................... 7
3.8 Referencias .................................................................................................................. 7
3.9 Anexo ........................................................................................................................... 7
4 INFORME DE LABORATORIO .......................................................................................... 8
4.1 Portada......................................................................................................................... 8
4.2 Resumen ...................................................................................................................... 8
4.3 El Índice General .......................................................................................................... 8
4.4 Introducción .................................................................................................................. 8
4.5 Revisión bibliográfica.................................................................................................... 8
4.6 Materiales y Métodos ................................................................................................... 8
4.7 Resultados ................................................................................................................... 8
4.8 Discusión...................................................................................................................... 8
4.9 Conclusiones ................................................................................................................ 9
4.10 Recomendaciones..................................................................................................... 9
4.11 Revisión bibliográfica ................................................................................................ 9
4.12 Referencias ............................................................................................................... 9
4.13 Anexo ........................................................................................................................ 9
5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO ............................................. 10
5.1 NORMAS PERSONALES .......................................................................................... 10
5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS............................ 10
5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN................................... 11
5.4 NORMAS DE EMERGENCIA..................................................................................... 11
5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS........................................................................ 12
6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS. ........................... 13
6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO .......................................................................... 14
6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA ............................................................................ 15
6.3 REACCIÓN DE BIURET ............................................................................................ 16
6.4 REACCION XANTOPROTEICA. ................................................................................ 16
6.5 REACCION DE MILLON ............................................................................................ 17
6.6 REACCION DE SAKAGUCHI..................................................................................... 17
6.7 PREGUNTAS: ............................................................................................................ 19
7 Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS ............................................................ 20
7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES .......................................................................... 21
7.2 REACCIÓN DE BIURET ............................................................................................ 22
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BIOQUÍMICA 201103
7.3 REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS ......................................................... 22

7.4 DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS: MÉTODO DE
BRADFORD......................................................................................................................... 23
7.5 PREGUNTAS: ............................................................................................................ 25
8 Práctica 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS..................................................... 26
8.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. ......................................................................... 29
8.2 PRUEBA DE BENEDICT............................................................................................ 29
8.3 REACCIÓN DE FEHLING .......................................................................................... 30
8.4 REACCIÓN DE MOLISCH ......................................................................................... 30
8.5 PRUEBA DE TOLLENS ............................................................................................. 31
8.6 REACCIÓN DE LUGOL (YODO)................................................................................ 32
8.7 PREGUNTAS ............................................................................................................. 33
9 Practica 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS ......................................... 34
9.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO. ......................................................................... 34
9.2 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS....................................................................................... 35
SAPONIFICACIÓN........................................................................................................... 35
9.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III................................................................................. 36
9.4 PREGUNTAS: ............................................................................................................ 36
10 BIBLIOGRAFÍA.............................................................................................................. 37
Tablas
Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos. ............................................................................... 13

Tabla 2 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema de tres letras y sistema de
una sola letra, impuesto en genética molecular....................................................................... 13
Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos..................................................... 14
Tabla 4 Materiales y reactivos. ................................................................................................ 14
Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina. ............................................ 15
Tabla 6 Procedimiento a realizar para la reacción de Reacción de Biuret. ............................. 16
Tabla 7 Procedimiento a realizar para la reacción Xantoprotéica............................................ 16
Tabla 8 Procedimiento a realizar para la reacción de millón. .................................................. 17
Tabla 9 Procedimiento a realizar para la reacción de Sakaguchi. ........................................... 17
Tabla 10 Resumen de las reacciones de aminoácidos en las diferentes técnicas. ................. 18
Tabla 11 Descripción de reactivos y métodos. ........................................................................ 20
Tabla 12 Materiales y Materiales y reactivos. .......................................................................... 21
Tabla 13 Procedimiento a realizar para la reacción de Biuret. ................................................ 22
Tabla 14 Reacción De Aminoácidos Azufrados, Grupos SH. .................................................. 22
Tabla 15 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta................ 24
Tabla 16 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta................ 24
Tabla 17 Diferentes ensayos para reconocimiento en carbohidratos. ..................................... 27
Tabla 18 Materiales y reactivos. .............................................................................................. 29
Tabla 19 Prueba de Benedict (detecta la presencia de azúcares reductores)......................... 29
Tabla 20 Reacción de Fehling (detecta la presencia de azúcares reductores) ....................... 30
Tabla 21 Reacción de Molisch................................................................................................. 30
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BIOQUÍMICA 201103
Tabla 22 Prueba De Tollens. ................................................................................................... 31

Tabla 23 Reacción de almidones con lugol (yoduro potásico)................................................. 32
Tabla 24 Clasificación de lípidos. ............................................................................................ 34
Tabla 25 Materiales y Materiales y reactivos. .......................................................................... 34
Tabla 26 Determinación de solubilidad en lípidos. .................................................................. 35
Tabla 27 Ensayo de Saponificación. ....................................................................................... 35
Tabla 28 Tinción: Reacción con el Sudán III. .......................................................................... 36
Ilustraciones
Ilustración 1 Clasificación de carbohidratos............................................................................. 26
Ilustración 2 Molécula de glucosa............................................................................................ 29
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BIOQUÍMICA 201103
2 INTRODUCCIÓN
La guía de prácticas de laboratorio introduce al estudiante en los procedimientos

experimentales más ampliamente usados en bioquímica. Incluye análisis de macromoléculas
como carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. El estudiante también se
familiarizará de las instalaciones y los equipos usados en las prácticas de bioquímica. Es de
gran importancia la lectura y compresión del documento con anterioridad a la asistencia de las
prácticas, además del desarrollo de las consultas que permitan entender cada procedimiento.
Los objetivos de las prácticas del curso de bioquímica son:
1. Que el estudiante sea capaz de comprender e integrar los conceptos teóricos con la
actividad práctica incluyendo una adecuada manipulación de las técnicas de laboratorio,
desde la actividad procedimental hasta la entrega de resultados o informe final.
2. Que el estudiante adquiera una preparación en Bioquímica que le permita comprender la

transversalidad que tiene la actividad práctica, tanto en otros cursos del programa de estudio
como en las actividades profesionales que él desempeñará, así mismo que le permitan
desarrollar una actitud de pensamiento crítico y de liderazgo en el trabajo que se de en el
grupo.
3. Que el estudiante realice las a actividades las practicas, teniendo en cuenta las normas de
seguridad y las indicaciones que del docente responsable de la práctica considere.
4. Que el estudiante adquiera los elementos formativos que incluye: lectura previa de esta
guía, planeación de la actividad, asistencia a las prácticas, resolución de problemas con la
metodología empleada, interpretación de resultados y presentación de resultados en el
informe de laboratorio.
La bioquímica es una rama de la ciencia encargada de descifrar los mecanismos esenciales

de los seres vivos, con una fase teórica y una fase práctica, la primera se da a través de los
distintos referentes bibliográficos y el segundo se apoya en el desarrollo de la guía de
prácticas de laboratorio del curso de bioquímica.
El desarrollo del trabajo práctico se apoya en una serie de pasos que van describiendo el
progreso de una técnica a través de mediciones, cálculos, observaciones cualitativas y
cuantitativas de los procedimientos planteados en la guía. La práctica de laboratorio integra,
en el estudiante la habilidad de trabajar en el laboratorio, utilizando las técnicas más
habituales de un laboratorio bioquímico y aprendiendo a interpretar los resultados
experimentales.
5
BIOQUÍMICA 201103
3 PRE INFORME DE LABORATORIO
En la redacción de los preinformes se deben conjugar los verbos en tiempo presente

atemporal y en tiempo futuro cuando se indiquen las acciones que se van a realizar. Esta
elaboración es individual.
Ejemplo La centrifuga gira a 1600 revoluciones por minuto.
La estructura de los preinformes es la siguiente:
3.1 Portada
La página de acuerdo a lo establecido por las normas para trabajos escritos, en el entorno de
gestión encuentra un manual de normas APA. La portada contiene el nombre la universidad,
la escuela a que pertenece el nombre de los integrantes del grupo con los datos necesarios
para su identificación.
3.2 El Índice General
Presenta toda la información del contenido, incluyendo el índice general, el índice de tablas, el
índice de figuras y el índice de anexos
-Índice General
-Índice de Tablas
-Índice de Figuras
-Índice de Anexos
3.3 Introducción
Describirá las prácticas a desarrollar explicado las principales características de las técnicas,
así como, descripción de objetivos generales y específicos que da lugar al trabajo
experimental. Esta es una sección realizada, redactando las ideas de los autores o sea
ustedes.
3.4 Revisión bibliográfica
Consiste en presentar y describir un tema de acuerdo con las temáticas propuestas por la
guía del componente práctico. Se toman los principales aspectos teóricos de acuerdo a la
metodología que se platea para desarrollar en la guía. Tenga presenta que hay que dar los
créditos respectivos a los autores consultados y las ideas resultantes son redactadas por el
estudiante.
3.5 Materiales y Métodos
Describir los principales equipos, instrumentos y reactivos indicando las precauciones a tener,
así como describir la información relávate que permita el buen desarrollo de la práctica.
3.6 Plan de Trabajo
6
BIOQUÍMICA 201103
Primero que todo identifique quien es el docente encargado de la práctica, describa los
principales datos personales, así como la identificación de la fecha lugar de la práctica. Tenga
presente las normas de bioseguridad y como debe asistir al desarrollo del componente
práctico (Uso de pantalón jean, zapato cerrado, bata blanca, guantes etc.). Define aquí que
elementos debe tener en cuenta para el desarrollo de la práctica de acuerdo a las
indicaciones que haga el docente de la práctica y la descripción que se de en la guía.
3.7 Nomenclatura
La Nomenclatura deberá ser presentada en tablas, que presenten ordenadamente sustancias
químicas o unidades, identificadas con símbolos, abreviaturas.
3.8 Referencias
Es un conjunto de datos precisos y detallados con los que un autor facilita la remisión a
fuentes documentales, o a sus partes, y a sus características editoriales. Por lo general y de
acuerdo con la normas para trabajos escritos, la información básica a ofrecer es Autor(es).
/Año de publicación./Título:/subtítulo./Mención del traductor y/o editor./Edición./Ciudad y/o
país de publicación en caso necesario, /Casa editora. /Páginas o volúmenes. / (Mención de
serie)
Esta información se detalla el final del documento y su descripción es de acuerdo a las
normas para trabajos escritos.
3.9 Anexo
En éstos se deben colocar toda aquella información referente a fichas de seguridad, reactivos,
equipos y otra información que se considere relévate.
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BIOQUÍMICA 201103
4 INFORME DE LABORATORIO
En la redacción de los informes se deben conjugar los verbos en tiempo pasado. Esta
actividad es grupal.
La estructura de los informes es la siguiente:
4.1 Portada
La página de acuerdo a lo establecido por las normas para trabajos escritos, en el entorno de
gestión se encuentra un manual de normas APA. La portada contiene el nombre la
universidad, la escuela a que pertenece el nombre de los integrantes del grupo con los datos
necesarios para su identificación
4.2 Resumen
Indicar una breve reseña de lo hecho durante la práctica y los objetivos, principales resultados
y las conclusiones del trabajo realizado.
4.3 El Índice General
El contenido, incluyendo el índice general, el índice de tablas, el índice de figuras y el índice
de anexos
-Índice General
-Índice de Tablas
-Índice de Figuras
-Índice de Anexos
4.4 Introducción
Describirá las prácticas a desarrollar explicado las principales características de las técnicas,
así como, descripción de objetivos generales y específicos que da lugar al trabajo
experimental. Esta es una sección realizada, redactando las ideas de los autores o sea
ustedes.
guía del componente práctico. Se toma los principales aspectos teóricos de acuerdo a la
metodología que de platea para desarrollar en la guía. Tenga presenta que hay que dar los
estudiante.
4.6 Materiales y Métodos
Describir los principales equipos, instrumentos y reactivos indicando las precauciones a tener,
así como describiendo la información relávate que permita el buen desarrollo de la práctica.
4.7 Resultados
Presentar la información sobre el desarrollo de las prácticas de forma estructurada, completa
y ordenada de la actividad experimental. Presentando gráficos, tablas, cálculos y demás notas
que describa la ejecución de la práctica.
4.8 Discusión
8
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La discusión contendrá un análisis crítico de los resultados obtenidos de la actividad práctica y

los conceptos teóricos.
4.9 Conclusiones
Derivan de los resultados y la discusión del trabajo.
4.10 Recomendaciones
El trabajo realizado debería mostrar nuevos caminos para otras experiencias de
laboratorio similares. En esta sección se enumerarán claramente las actividades que
podrían realizarse para proyectar la información obtenida en la investigación.
acuerdo con la normas para trabajos escritos la información básica a ofrecer es Autor(es)./Año
de publicación./Título:/subtítulo./Mención del traductor y/o editor./Edición./Ciudad y/o país de
publicación en caso necesario,/Casa editora. /Páginas o volúmenes./ (Mención de serie )
Esta información se detalla el final del documento.
guía del componente práctico. Se toman los principales aspectos teóricos de acuerdo a la
metodología que se platea para desarrollar en la guía. Tenga presenta que hay que dar los
estudiante.
4.12 Referencias
acuerdo con la normas para trabajos escritos la información básica a ofrecer es Autor(es)./Año
de publicación./Título:/subtítulo./Mención del traductor y/o editor./Edición./Ciudad y/o país de
publicación en caso necesario,/Casa editora. /Páginas o volúmenes./ (Mención de serie )
Esta información se detalla el final del documento.
4.13 Anexo
En éstos se deben colocar toda aquella información referente a fichas de seguridad, reactiva y
equipos esta otra información que se considere relévate.
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BIOQUÍMICA 201103
5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO
Referente teórico seguridad y normas de laboratorio

Se entiende la práctica de laboratorio, como la estrategia pedagógica que facilita la
consolidación del aprendizaje y el desarrollo de competencias disciplinares. La práctica de
laboratorio puede desarrollarse en una sesión o en varias sesiones de acuerdo a las
indicaciones que se den en la programación de cada periodo académico.
En el laboratorio se realiza, para el caso del curso de bioquímica, prácticas experimentales: en

donde se aprenden a manipular equipos, reactivos químicos, conformándose pequeños
grupos de trabajo para el desarrollo de la actividad. Para llevar a cabo las prácticas de
laboratorio se requiere que el estudiante tenga un conocimiento teórico básico sobre el tema y
lea detenidamente la guía de laboratorio.
5.1 NORMAS PERSONALES
La vestimenta deberá ser apropiada y cómoda, que facilite la movilidad para la actividad que
se desarrolla en los laboratorios. Debe cubrir áreas considerables de la piel con pantalones
(jeans), blusas con mangas, la bata y guantes.
Use calzado cerrado que cubra completamente el pie. El alumno debe portar en todo
momento Bata blanca de Laboratorio.
Nunca ingerir alimentos, beber o masticar chicle dentro del laboratorio, igualmente evitar tocar
partes del rostro y llevar las manos a la boca o introducir lapiceros u otros en boca nariz y
oídos.
Asistir puntualmente en la fecha y hora programada, igualmente al entrar a las instalaciones

del laboratorio se recomienda que se haga cuando esté presente el docente encargado de la
práctica, así como no ausentarse antes de terminar la práctica.
El área del laboratorio es exclusivamente para realizar el trabajo de la práctica; cualquier tipo
de acción social como cortejar, charlas ajenas a la práctica e igual que las bromas pueden
causar pérdida de tiempo y posibles incidentes de alta gravedad.
5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS
Cuando se tiene que hacer una reacción química se debe escoger el recipiente adecuado a la
cantidad que se va a usar. Los ensayos se hacen en tubos de ensayo o en placas de gotas,
nunca en vasos, matraces, etc.
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BIOQUÍMICA 201103
No usar recipientes alimenticios para contener productos químicos e igualmente cualquier

recipiente que se utilice para la recepción productos es necesario rotular, brindando la mayor
información sobre la sustancia contenida.
De los materiales de laboratorio No utilice vidrio agrietado, el material de vidrio en mal estado
aumenta el riesgo de accidente. No deben utilizarse para pipetear jeringuillas provistas de
aguja hipodérmica o aspirar con la boca pipetas de vidrio. Compruebe la temperatura de los
materiales antes de cogerlos directamente con las manos.
Si cuenta con sistemas de extracción y renovación mecánica de aire activados, manténgalos

siempre en funcionamiento. Utilizar las campanas extractoras siempre que sean posible.
Para detectar el olor de una sustancia, no se debe colocar la cara directamente sobre el
recipiente: utilizando la mano abierta como pantalla, es posible hacer llega una pequeña
cantidad de vapor hasta la nariz. Los frascos deben cerrarse inmediatamente después de su
uso.
Al momento de trabajar con ácido, para diluirlos vierta el ácido sobre el agua, nunca al
contrario.
No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados. Nunca
debe sacar sustancias químicas del laboratorio sin autorización.
5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN
Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza se utilizará un recipiente

adecuado.
Se debe mantener perfectamente limpio y seco el lugar dónde se encuentre situado cualquier
instrumento con contactos eléctricos. Leer las instrucciones de uso de los instrumentos.
Debe revisarse el material de vidrio para comprobar posibles fisuras, especialmente antes de
su uso a vacío o presión.
5.4 NORMAS DE EMERGENCIA
En caso de tener que evacuar el laboratorio, cerrar la llave del gas y salir de forma ordenada
siguiendo en todo momento las instrucciones que haya impartido el Profesor. Localizar al
iniciar la sesión de prácticas los diferentes equipos de emergencia en el correspondiente
laboratorio: Duchas y lavaojos, Botiquín, Absorbente para derrames, Alarma de emergencia,
Salida de emergencia y Recipiente para el vidrio roto.
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BIOQUÍMICA 201103
Al finalizar la práctica, limpia el área de trabajo y entrega los materiales utilizados limpios y en
buenas condiciones. Por último esperar las indicaciones para retirarse de las instalaciones del
laboratorio.
5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS.
Se hará la discusión sobre las normas de seguridad antes descriptas y las que encuentran en
el Reglamentación y Normas de Bioseguridad en los Laboratorios de la
UNAD y Otras Disposiciones.
Identifique la señalización que encuentra en el laboratorio, fotografié o dibuje los pictogramas

y describa en el informe de laboratorio que significan con que elementos de seguridad se
cuenta. (Duchas, extintores, cámaras extractoras, etc.)
Preguntas
a) Escriba el nombre del reactivo y la formula química de los productos usados en la
práctica.
Ejemplo, Nitrato de plata (AgNO3)
c) Escriba una propiedad física de la sustancia.
Ejemplo, Son cristales blancos Densidad: (20/4): 4,352
d) Mencione posibles riesgos que representa la sustancia para la salud.
En contacto con la piel y ojos puede provocar irritación y quemaduras. Por ingestión puede
causar irritaciones en las mucosas de la boca, garganta, esófago y tracto intestinal.
e) Indique cual es el equipo o la vestimenta de seguridad necesaria para manipular la
sustancia.
Usar equipo respiratorio adecuado. Utilizar guantes y gafas apropiadas. Utilizar ropa de
trabajo adecuada (bata de laboratorio) y lavarse las manos y la cara antes y al finalizar
el trabajo.
f) Resuma la información obtenida en el área de reactividad del símbolo de diamante
En cuanto a la salud (rombo azul), el número 2 indica que es un reactivo peligroso. En cuanto
a inflamalidad (rombo rojo), el número 0 indica que no es inflamable. En cuanto a la
reactividad (rombo amarillo), el número 0 indica que es estable. En cuanto a algún riesgo
específico (rombo blanco), no presenta alguno.
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BIOQUÍMICA 201103
6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.
Referente teórico de aminoácidos
Los aminoácidos se denominan así por tener un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-
COOH).
Es posible agrupar los aminoácidos en clases principales basadas en las propiedades de sus
grupos R, en especial de su polaridad, o tendencia a interaccionar como el agua a pH
biológico (cerca del pH 7.0). La polaridad de los grupos R varía enormemente desde
totalmente apolar o hidrofóbico (insoluble en agua) hasta altamente polar o hidrofílico (soluble
en agua).
Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos.
Grupos R Propiedades de los aminoácidos

Apolares alifáticos Los grupos R de esta clase de aminoácidos son apolares e hidrofóbicos.
Las cadenas laterales de la alanina, valina, leucina e isoleucina tienden a agruparse entre sí en las
proteínas, estabilizando las estructuras proteicas a través de interacciones hidrofóbicas.
Otros aminoácidos que conforman este grupo son: glicina, metionina y prolina.
Aromáticos Fenilalanina, Tirosina y Triptófano, con sus cadenas laterales aromáticas, son relativamente apolares
(hidrofóbicos). Todos ellos pueden participar de interacciones hidrofóbicas.
Polares sin carga Los grupos R de estos aminoácidos son más solubles en agua, que los aminoácidos apolares, debido a
que contienen grupos funcionales que forman puentes de hidrógeno con el agua.
Incluye este grupo la serina, treonina, cisteína, asparagina y glutamina.

Cargados Estos aminoácidos pueden tener el grupo R cargado positivamente (básicos) o negativamente (ácidos),
siendo más hidrofílicos que los demás aminoácidos.
Los aminoácidos en los que los grupos R tienen una carga neta positiva significativa a pH 7.0 Lisina,
arginina e histidina
Con una carga neta negativa a pH 7.0 son: aspartamo y el glutamato.
La cadena R es de estructura variable y es la responsable de las características particulares de los AA y de su

clasificación, en función de ésta podemos agrupar a los 20 aminoácidos, en diversas categorías así mismo, la
nomenclatura puede hacerse utilizando un código de tres letras o de una, tal como se observa en la siguiente
tabla:
Tabla 2 Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema de tres letras y sistema de una sola
letra, impuesto en genética molecular.
Nomenclatura
Una letra Tres letras Nombre Clasificación
A Ala Alanina
G Gly Glicina
I Ile Isoleucina Ae Apolares alifáticos
L Leu Leucina Ae
V Val Valina
F Phe Fenilalanina Ae
Apolares aromáticos
W Trp Triptófano Ae
C Cys Cisteina
Apolares con azufre
M Met Metionina Ae
N Asn Asparagina
Polares alifáticos y sin carga
Q Gln Glutamina
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S Ser Serina
T Thr Treonina Ae
Y Tyr Tirosina Polar aromático y sin carga
R Arg Arginina
H His Histidina Ae Polar con carga positiva
K Lys Lisina
D Asp Ac. Aspártico o Aspartato
Polar con carga negativa
E Glu Ac. Glutamico o Glutamato
P Pro Prolina Iminoacido
Ae = Aminoácido esencial
Tomado de: Manual de Prácticas de Laboratorio de bioquímica, Universidad Nacional Autónoma de México
Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos.

Prueba bioquímica Descripción de la reacción química entre los aminoácidos y los reactivos.
El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la ninhidrina:
Reacción con la ninhidrina violeta azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es primario, amarillo
(Hidrato de para la prolina e hidroxiprolina y café para la asparagina que tiene un grupo amido en la
cadena lateral. Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino libres presentes en
tricetohidrindeno) péptidos y proteínas
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio a pH
Reacción de Millón ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina y las
proteínas que la contienen.
Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con ácido nítrico
Reacción Xantoprotéica concentrado formando nitroderivados de color amarillo o anaranjado por lo cual esta
reacción permite reconocer la presencia de Tirosina, Fenilalanina y Triptófano.
El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina reacciona con soluciones
Reacción de Sakaguchi de alfa naftol en presencia de Bromo en medio alcalino formando complejos coloreados
rosados o rojos.
La presencia de anillos aromáticos fenólicos o nitrogenados en la cadena lateral de los
Aminoácidos se puede identificar mediante la reacción con ácido sulfanílico y nitrito de
Reacción de Ehrlich Sodio por formación de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo así detectar
la presencia de Tirosina e Histidina libres o formando péptidos y proteínas.
Reacción de El anillo indólico presente en la cadena lateral de los alfa-aminoácidos libres o haciendo
parte de péptidos y proteínas se puede reconocer mediante reacción con el ácido glioxílico
Adamkiewick o Hopkins a pH ácido, puesto que forma complejos de coloración violeta o
Cole
Los Aminoácidos azufrados como Metionina, Cisteína y Cistina se reconocen por la
Reacción con acetato de formación de precipitados de Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se forman
Plomo alcalino cuando reacciona con Acetato de Plomo en medio alcalino.
6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

Tabla 4 Materiales y reactivos.
Reactivos Materiales Cantidad
Reactivo ninhidrina Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
NaOH Gradilla 2
Sulfato cúprico (CuSO) Pinza para tubos 2
Ácido acético(CH3COOH) Pipetas Pauster con bulbo 4
Cloruro de sodio (NaCl) Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
albúmina Estufa 1
Ácido nítrico (HNO3) Cámara de flujo laminas 1
Hidróxido de sodio Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4
(NaOH)
Acetato de Plomo Pera de goma para pipetas 4
α Naftol
Hipoclorito de sodio
Reactivo de Hopkins- Cole
Ácido sulfúrico (H2SO)
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Reactivo de Millón
Aminoácidos: Glicina,
tirosina, triptófano,
fenilalanina y arginina
Fenol
Albumina de huevo
Procedimiento
6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA
El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la ninhidrina: violeta
azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es primario, amarillo para la
prolina e hidroxiprolina y café para la asparagina que tiene un grupo amido en la cadena
lateral.
Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino libres presentes en péptidos y
proteínas.
Precauciones la ninhidrina es toxica.
Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina.

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo
con 1.5 mL de Preparar los tubos de ensayo. Agregar 2 ml de solución de
1 ninhidrina
Glicina1%  ninhidrina (0.3%)
con 1.5 mL de Agregue a cada tubo de ensayo 1.5mL
2 ninhidrina
Albúmina1% de la solución correspondiente.
con 1.5 mL de 
3 ninhidrina
Tirosina 1% 2 ml de solución (0.3%) de ninhidrina a
con 1.5 mL de cada tubo.
4 ninhidrina
Glicina 1% 
con 1.5 mL de Tubos de ensayo en un baño de agua
5 ninhidrina
Triptófano 1% hirviente por unos 10 minutos.
 1.5 ml de solución respectiva
Observar y tomar apuntes de los +
con 1.5 mL de
6 ninhidrina cambios. Baño de agua hirviente por 10
Leucina al 1%
minutos.
15
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6.3 REACCIÓN DE BIURET
Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se
debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.
El reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente
alcalino, se une con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret)
cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.
Tabla 6 Procedimiento a realizar para la reacción de Reacción de Biuret.

con 5 ml de NaOH 2,5N
1 solución de + Preparar los tubos de ensayo. 1 ml de
Leucina al 1% sulfato cúprico  NaOH 2,5N
con 1.5 mL NaOH 2,5N Agregue a cada tubo de ensayo +
2 de + agregue 1 ml de 3 gotas de solución de
Albúmina1% sulfato cúprico NaOH 2,5N de la solución sulfato cúprico al 1%
con 1.5 mL NaOH 2,5N correspondiente.
3 de Tirosina + 
1% sulfato cúprico Agregue 3 gotas de solución de
NaOH 2,5N sulfato cúprico al 1% a cada
con 1.5 mL
4 + tubo de ensayo.
de Glicina 1%
sulfato cúprico 
Agite cada tubo de ensayo
con 1.5 mL NaOH 2,5N

5 de Triptófano +
Observar y tomar apuntes de los
1% sulfato cúprico 5ml de solución respectiva
cambios.
6.4 REACCION XANTOPROTEICA.

Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con ácido nítrico
concentrado formando nitroderivados de color amarillo o anaranjado por lo cual esta reacción
permite reconocer la presencia de Tirosina, Fenilalanina y Triptófano.
Tabla 7 Procedimiento a realizar para la reacción Xantoprotéica.

HNO3 Agregue, 0,5 ml de HNO3
con 1.5 ml de
+ Preparar los tubos de ensayo. +
1 solución de
NaOH 
Triptófano 1%
Agregue, 0,5 ml de HNO3
HNO3 concentrado en cada tubo, en la
con 1.5 mL de + campana de extracción.
2
Albúmina1% NaOH 
Retire los tubos del baño y déjelos
HNO3 enfriar.
3
con 1.5 mL de + 
Metionina 1% NaOH Agregue lentamente 1 ml de 1.5 ml de solución respectiva
16
BIOQUÍMICA 201103
Amoniaco (NH4OH) concentrado en +

la campana de extracción o 1.5 mL. Baño de agua hirviente por 10
de NaOH al 40%, minutos.
HNO3
 +
con 1.5 mL de +
4 Observar y tomar apuntes de los Agregue 1 ml de Amoniaco
Fenilalanina 1% NaOH
cambios. (NH4OH) ó 1.5 mL de NaOH al
40%.
+
observe el cambio de color
6.5 REACCION DE MILLON
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio a pH

ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina y las proteínas
que la contienen.
Tabla 8 Procedimiento a realizar para la reacción de millón.

con 1.5 ml Reactivo de Agregue 15 gotas del Reactivo
de solución Millón Preparar los tubos de ensayo. de Millón
1
de Tirosina +  +
1% sulfato cúprico agregue 15 gotas del Reactivo de
Reactivo de Millón a cada tubo de ensayo
con 1.5 mL
2 de
Millón 
+ Agregue 3 gotas de solución de
Albúmina1%
sulfato cúprico sulfato cúprico al 1% a cada tubo de
Reactivo de ensayo.
con 1.5 mL
3 de Leucina
Millón 
+ Retire con cuidado los tubos de
1%
sulfato cúprico ensayo del baño de María y
colóquelos en la gradilla. 1.5 ml de solución respectiva
 +
Observar y tomar apuntes de los Baño de agua hirviente por 10
cambios. minutos
+
Dejar enfriar.
6.6 REACCION DE SAKAGUCHI
El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina reacciona con soluciones de

alfanaftol en presencia de Bromo en medio alcalino formando complejos coloreados rosados o
rojos.
Tabla 9 Procedimiento a realizar para la reacción de Sakaguchi.

1 con 5 mL de Hidróxido de Enfríe en baño de hielo por 10
17
BIOQUÍMICA 201103
solución de Sodio (NaOH Preparar los tubos de ensayo. minutos.

Arginina 1% +  +
alfa-naftol Enfríe en baño de hielo por 10 minutos. 1 ml de Hidróxido de Sodio
+  (NaOH) al 5%
hipoclorito de 1 ml de Hidróxido de Sodio (NaOH) al 5% +
Sodio a cada tubo de ensayo. Dejar enfriar 10 minutos.
Hidróxido de  +
Sodio (NaOH Dejar enfriar 10 minutos. 2 gotas de alfa-naftol al 1%.
con 1.5 mL +  +
2 de alfa-naftol Agregue con un gotero, 2 gotas de alfa- 2 gotas de hipoclorito de Sodio al
Albúmina1% + naftol al 1% a cada tubo de ensayo. 10%.
hipoclorito de 
Sodio Agregue 2 gotas de hipoclorito de Sodio al
Hidróxido de 10% a cada tubo.
Sodio (NaOH 
con 1.5 mL + Observar y tomar apuntes de los cambios.
3 de proteína alfa-naftol
de trigo 1%. +
hipoclorito de
Sodio
5 ml de solución respectiva
Hidróxido de
Sodio (NaOH
+
con 1.5 mL
4 de Leucina
alfa-naftol
+
hipoclorito de
Sodio
Tabla 10 Resumen de las reacciones de aminoácidos en las diferentes técnicas.
NINHIDRINA
(+) Violeta o amarillo
(-) incolora (+) Rojo o amarillo
claro proteína,
No es proteína ni fuerte Hidroxiprolina o
polipéptido o
aminoácido prolina
aminoácido
BIURET
(-) Azul o amarillo (+) Violeta Proteínas
aminoácidos y polipéptidos
XANTOPROTÉICA
COAGULACIÓN
(+) Amarillo, naranja o (-) No coagula (+) Coagula
(-) Incoloro verde Tirosina, Histonas, protaminas o Albúminas o globulinas
Otros aminoácidos fenilalanina o polipéptidos
triptófano
ADAMKIEWICK o HOPKINS COLE
SULFATO DE AMONIO
(-) Incoloro (+) Precipita (-) No
(+) Azul o violeta
Tirosina o Globulinas Precipita
Triptófano
Fenilalanina Albúminas
MILLÓN
(+) Rojo (-) Incoloro
Grupo SH Tirosina Fenilalanina
18
BIOQUÍMICA 201103
SAKAGUCHI
(+) Negro o gris
(-) Incolora (+) Rojo
Cisteína, cistina,
Otros aminoácidos Arginina
metionina
Tomada:
6.7 PREGUNTAS:
Escriba la reacción para cada una de las pruebas realizadas.

Proponga de acuerdo a la pruebas una clasificación de los aminoácidos utilizados y relacione la
importancia de la aplicación de algunas de estas pruebas aplicadas a otras áreas del conocimiento
como: microbiología, química de alimentos entre otras.
Para el siguiente pentapéptido, diga cuales pruebas y porque serán positivas. (ALA-
VAL-GLY-GLU-LYS)
Defina los siguientes términos: aminoácidos, proteínas, análisis cualitativo, cuantitativo.
19
BIOQUÍMICA 201103
7 Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS
Referente teórico de proteínas y aminoácidos.

Las proteínas son uno de los principales componentes de todas nuestras células. Los
aminoácidos (compuestos orgánicos) son los ladrillos de construcción de la proteínas. Los
aminoácidos se agrupan de acuerdo con su comportamiento químico. La síntesis de las
proteínas ocurre mediante la unión entre sí de las cadenas de aminoácidos. Los distintos
aminoácidos imparten diferentes comportamientos químicos en la estructura de las
proteínas. Debido a la presencia de diferentes aminoácidos en las uniones peptídicas las
proteínas reaccionan con una variedad de compuestos formando productos coloreados.
Los aminoácidos tiene tres tipos de reacciones químicas importantes: (1) reacciones debido a
la presencia del grupo carboxilo (COO- ), (2) reacciones debidas al grupo amino (NH), y (3)
reacciones debido al grupo R.
Las reacciones debidas al grupo carboxilo y al grupo amino son generales y se dan para todos
los aminoácidos. Las reacciones del radical R son reacciones específicas; por ejemplo,
cisteína da una reacción para azufre, triptófano da ciertas reacciones de color debido a que su
molécula contiene el grupo indol, tirosina da otras reacciones de color debido a su grupo
fenólico, etc.
Existen reacciones de coloración que son específicas para aminoácidos de esas proteínas y
son importantes tanto para la detección como para el dopaje de aminoácidos y proteínas.
Existen también reacciones generales porque sirven para caracterizar grupos comunes a
todas las proteínas como grupos amino o uniones
Tabla 11 Descripción de reactivos y métodos.

Método Descripción Desventajas
Biuret Gornell AG, C. J. Bardawill, and M. M. DAVID. Determination of El método se usa para soluciones que
serum proteins by means of the biuret. reaction. J. BioZ. Chem. tienen de 0.5 a 10 mg proteína/ml.
177: 751-766, 1949
Se basa en la reacción de sales de Cu+2 con moléculas Es un método poco sensible. Es útil
que contienen más de dos enlaces peptídicos en un cuando se quiere analizar grandes
medio alcalino; el cobre es reducido a Cu+ formando lotes de proteína.
complejos color púrpura que tienen un máximo de
absorción a 540 nm.
Lowry Lowry, OH, NJ Rosbrough, AL Farr, and RJ Randall. J. Biol.
Chem. 193: 265. 1951
Este es un método muy sensible, por lo
Resulta de la reacción de Biuret sobre los enlaces peptídicos, que permite trabajar con soluciones muy
además de la reducción del reactivo de fosfomolibdato- diluidas de proteínas (0.02 - 0.5 mg
fosfotungstato (Folin-Ciocalteu) por las proteínas pretratadas proteína/ ml)
con cobre en medio alcalino, dando una coloración azul,
determinado a 650 nm.
El Cu+ y los grupos R de la tirosina, triptofano y cisteína

reaccionan con el reactivo de Folin, produciendo un producto
inestable que es reducido a azul de molibdeno/tungsteno.
Bradford Bradford, M. M. (1976) Anal. Biochem. 72, 248 Muestra interferencias con
detergentes
Basado en el Azul Brillante de Coomasie G-250 cambia
de rojo a azul, al unirse a residuos aromáticos y arginina
en las proteínas.
20
BIOQUÍMICA 201103
La reacción entre el colorante y la proteína es muy

rápida (aproximadamente 2 min), y el completo proteína-
colorante permanece disperso en solución por un tiempo
relativamente largo.
Rango de detección: 0.5-10 mg proteína/ml.
7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES
Tabla 12 Materiales y Materiales y reactivos.

Reactivo ninhidrina Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
NaOH Gradilla 2
Sulfato cúprico (CuSO) Pinza para tubos 2
Ácido acético(CH3COOH) Pipetas Pauster con bulbo 4
Cloruro de sodio (NaCl) Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
albúmina Estufa 1
Ácido nítrico (HNO3) Cámara de flujo laminas 1
Hidróxido de sodio (NaOH) Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4
Acetato de Plomo Pera de goma para pipetas 4
α Naftol Vidrios reloj grandes
Hipoclorito de sodio Probeta 100 ml
Reactivo de Hopkins- Cole Balón aforado de 25 ml
Ácido sulfúrico (H2SO) Agitador de vidrio
Reactivo de Millón Balanza analítica
Aminoácidos: Glicina, tirosina, Espectrofotómetro
triptófano, fenilalanina y arginina
Fenol Micropipeta 10 μL
Albumina de huevo Micropipeta 20- 200 μL
Agua destilada Micropipeta 20- 200 μL
Ácido fosfórico Micropipeta 200-1000 μL
L
Etanol 1 caja con puntas de 200 μL (amarillas) para micropipeta
1 caja con puntas de 200 μL (amarillas) para micropipeta
1 caja con puntas de 1000 μL (azules) para micropipeta.

Agitador vórtex múltiple para tubos
21
BIOQUÍMICA 201103
7.2 REACCIÓN DE BIURET
Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su
identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las
proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH
que se destruye al liberarse los aminoácidos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y
sosa. El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se une con los enlaces peptídicos formando un
complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de
proteínas.
Tabla 13 Procedimiento a realizar para la reacción de Biuret.

Tubo Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo
con 3 mL de Preparar los tubos de ensayo.
CuSO4 al 1%
solución de  4 a 5 gotas de solución de
1 +
Albúmina de huevo Añadir de 4 a 5 gotas de CuSO4 al 1%
hidróxido sódico
1% solución de CuSO4al 1% +
 2 ml hidróxido sódico
con 3 mL de
Añadir 2 ml de solución de
solución de CuSO4 al 1%
hidróxido sódico al 20%.
2 aminoácidos +
Tirosina, Triptófano hidróxido sódico 
o Fenilalanina. Agitar para que se mezcle.

CuSO4 al 1% Observar y tomar apuntes de los
con 3 mL de Leche
3 + cambios.
1%
hidróxido sódico
CuSO4 al 1%
con 3 mL de Aceite
4 +
de cocina
hidróxido sódico
CuSO4 al 1%
con 3 mL de con 3 mL de solución
5 +
Glucosa respectiva
hidróxido sódico
+
Agitar y observar color
violeta, azul o amarillo.
7.3 REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS
Se pone de manifiesto por la formación de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se

basa esta reacción en la separación mediante un álcali, del azufre de los aminoácidos, el cual
al reaccionar con una solución de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.
Tabla 14 Reacción De Aminoácidos Azufrados, Grupos SH.

Tubo Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo
con 3 mL de hidróxido sódico Preparar los tubos de ensayo. 2 ml hidróxido sódico
solución de +  +
1
Albúmina de huevo acetato de Añadir 2 ml de solución de hidróxido solución de acetato
1% plomo de plomo al 5%
22
BIOQUÍMICA 201103
sódico al 20%. +
con 3 mL de 
hidróxido sódico
solución de Añadir 10 gotas de solución de
+
aminoácidos acetato de plomo al 5%
2 acetato de
Tirosina, 
plomo
Triptófano o Calentar el tubo hasta ebullición.
Fenilalanina. 
hidróxido sódico Observar y tomar apuntes de los
+ cambios.
con 3 mL de Leche
3
1%
acetato de 
plomo
El precipitado de color negruzco con 3 mL de solución
hidróxido sódico indica que se ha formado sulfuro de respectiva
+ Plomo, utilizándose el azufre de los +
con 3 mL de Calentar el tubo hasta
4 acetato de aminoácidos
Aceite de cocina ebullición.
plomo
hidróxido sódico
+
con 3 mL de
5 acetato de
Glucosa
plomo
7.4 DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS: MÉTODO DE

BRADFORD.
Práctica sugerida de acuerdo a la disposición de los recursos.

INTRODUCCION
Existen varios métodos para determinar la concentración de proteínas de una muestra, tales como la
determinación de la absorbancia a 280 nm, o mediante la formación de derivados coloreados de las
proteínas, base de los métodos de BIURET o de LOWRY. En estos casos se forma un complejo
coloreado de cobre con el enlace peptídico; en el método de Lowry, además del complejo anterior
también se forma un derivado de las tirosinas que contribuye a la absorbancia total.
El método de Bradford se basa en el empleo de emplea un colorante hidrofóbico cuyas

disoluciones acuosas en presencia de ácido fosfórico tienen un color pardo y que, al
encontrarse en el entorno hidrofóbico del interior de una proteína, origina un color azul intenso
que se puede medir fácilmente. Este método depende, pues de la interacción relativamente
inespecífica entre un colorante hidrofóbico y las proteínas, por lo que es relativamente
sensible a la presencia de contaminantes tales como restos de detergente y líquidos
orgánicos como el metanol.
La determinación de proteínas por el método de Bradford consiste en la cuantificación de la

unión de un colorante, el Azul de Coomassie G-250, a la proteína, comparando esta unión
con la de diferentes cantidades de una proteína estándar (Albúmina de Suero Bovino
(BSA)). La cuantificación se hace midiendo la absorbancia en un espectrofotómetro, a 595
nm, y graficando la absorbancia vs la concentración de proteínas, obteniendo una curva de
calibración de la proteína estándar. Con esta curva de calibración, se puede interpolar la
concentración de proteínas en una muestra al medir su absorbancia a 595 nm.
23
BIOQUÍMICA 201103
1- Reactivo de Bradford
Azul de coomasie G-250 5 mg
Etanol 2.5 ml
Ácido fosfórico 5 ml
Agua Hasta 50 ml
Mezclar en el orden indicado, disolver con agitación y a continuación filtrar
2-Patrón de albúmina. Disolver 10 mg de albúmina bovina en 10 ml de agua destilada, con lo

que tenemos una disolución madre con una concentración de 1 mg/ml.
1-Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta 60 µg; de tal
manera que el volumen final en cada tubo sea de 300 µl.
Mezclar para ello el volumen adecuado de la disolución madre de albúmina bovina de un 1

mg/ml y el correspondiente volumen necesario de agua, de acuerdo con la siguiente tabla.
METODO
1-Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta 60 µg; de tal
manera que el volumen final en cada tubo sea de 300 µl. Mezclar para ello el volumen
adecuado de la disolución madre de albúmina bovina de un 1 mg/ml y el correspondiente
volumen necesario de agua, de acuerdo con la siguiente tabla.
Tabla 15 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta.

µg (prot) 0 10 20 30 40 50 60
µl (alb) 0 10 20 30 40 50 60
µl (agua) 300 290 280 270 260 250 240
µl total 300 300 300 300 300 300 300
2-Preparación de tres diluciones de la muestra problema:
Hacer una dilución 1:20 de la leche comercial; a continuación realizar las diferentes diluciones
de acuerdo con la siguiente tabla.
Tabla 16 Preparar la curva patrón de albúmina bovina en un rango desde 0 hasta
Leche diluida A B C
V. leche (µl) 20 25 30
V. agua (µl) 280 275 270
V. total 300 300 300
Finalmente añadir 3 ml del reactivo de Bradford a todos los tubos; tanto a las diluciones que
contienen la albúmina como a las que contienen la leche diluida. Agitar los tubos y a
continuación proceder a la lectura de la absorbancia a 595 nm en el colorimetro.
24
BIOQUÍMICA 201103
RESULTADOS
1- Elaboración de la recta patrón. Para ello representar en el papel milimetrado adjunto la

absorbancia de cada uno de los tubos que contenían albúmina bovina frente a la cantidad de
proteínas correspondiente. Si se dispone de una calculadora con capacidad para hacer rectas
de regresión, compruebe el coeficiente de correlación de la recta obtenida. En cualquier caso
determine la pendiente de la recta.
2- Para las tres diluciones del problema, interpolar la absorbancia obtenidas sobre la recta
representada para saber la cantidad de proteínas presentes en cada una de ellas.
Alternativamente, haga el cálculo mediante la pendiente de la recta.
3- Teniendo en cuenta los volúmenes de muestra usados en cada caso y teniendo en cuenta
la dilución realizada, calcúlese la concentración de proteínas en la muestra analizada. Dar el
resultado en gramos de proteínapor 100 ml de leche.
7.5 PREGUNTAS:
¿Cuáles son los principales métodos colorimétricos usados en la determinación de proteínas?

¿Cuál es la reacción de un alfa-aminoácido y ninhidrina?
¿Cuál es la reacción con el reactivo de Biuret?
¿Qué proteínas dan positivas con la prueba de Hopkins-cole?
¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo? 2. ¿Cuál de los tres agentes

utilizados tiene mayor poder de desnaturalización? 3. ¿Cómo podríamos saber que una
sustancia desconocida es una proteína? 4. ¿Qué coloración da la reacción del Biuret? 5.
¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret? 6. Si se realiza la reacción del
Biuret sobre un aminoácido como la Glicina ¿es positiva o negativa? ¿Por qué?
25
BIOQUÍMICA 201103
8 Práctica 4: IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS
Referente teórico.
Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre la

superficie terrestre, representando aproximadamente el 75 % de la materia orgánica existente.
En ocasiones, se denominan también carbohidratos, azúcares, sacáridos o glúcidos. Todos
son términos que hacen referencia a su sabor dulce, o a que poseen la composición
Cn(H2O)n. Estas moléculas usualmente contienen carbono, hidrógeno y oxígeno en una
proporción de 1:2:1. Los carbohidratos se clasifican como monosacáridos, disacáridos o
polisacáridos, dependiendo del tamaño y la complejidad de la molécula. Los monosacáridos
se componen de una sola molécula de azúcar. Cuando dos monosacáridos se unen se
produce un disacárido, y cuando dos o más se unen se produce un polisacárido.
En los animales los carbohidratos son esenciales desde el punto de vista energético, ya que
muchos órganos y células del cuerpo humano, como el cerebro y los glóbulos rojos, obtienen
su energía principalmente de la glucosa. Pero sus funciones no se restringen a ser
únicamente fuente de energía, sino que también pueden desarrollar funciones estructurales,
de reconocimiento celular y adhesión. Estructuralmente, un hidrato de carbono típico es una
cadena hidrocarbonada con varios grupos alcohol y un carbono más oxidado, en forma de
grupo carbonilo. Este grupo oxidado puede situarse en el extremo de la cadena (aldehído), o
adyacente, en posición 2 (cetonas)
Ilustración 1 Clasificación de carbohidratos.
26
BIOQUÍMICA 201103
Todos los monosacáridos y los disacáridos con enlace mono-carbonilo, cuando se encuentran
en solución a pH alcalino, tienen la capacidad de reducir otros compuestos. Esta capacidad
reside en las características del grupo carbonilo (C anomérico en formas cicladas) libre. Esta
propiedad, y por tanto, la presencia de un azúcar reductor, se ponen de manifiesto mediante
las reacciones de:
Tabla 17 Diferentes ensayos para reconocimiento en carbohidratos.

Ensayo Descripción del ensayo
Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos en el que los
polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta
monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los
cuales reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta.
Fehling -Fehling A: CuSO4 disuelto en H2O
-Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disueltos en agua
(Detecta la presencia de azúcares reductores) Los azúcares reductores, en medio

alcalino, son capaces de reducir el ión Cu2+ de color azul a Cu+ de color rojo. Para ello
el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo carboxilo. En medio fuertemente básico,
como es en este caso el NaOH, el ión Cu2+ formaría Cu (OH)2 insoluble, por eso se
añade tartrato sódico potásico en el Fehling B (el reactivo de Fehling consta de dos
componentes: Fehling A y Fehling B) que actúa como estabilizador al formar un
complejo con el Cu2+.
NaOH +Calor
+R
CuSO2  Cu(OH)2 (azul)  Cu2O (rojo ladrillo)
Reacción
Benedict (Detecta la presencia de azúcares reductores) Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+
en medio básico débil. Aunque es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil
y el estabilizante (citrato sódico) utilizados hacen que este test sea más sensible y
estable.
-Sulfato cúprico.
-Citrato de sodio.
-Carbonato anhidro de sodio
Barfoed Ácido acético

Acetato cúprico
(Detecta la presencia de monosacáridos) El reactivo de Barfoed es débilmente ácido y
es reducido solamente por monosacáridos, formándose como producto de reacción
óxido cuproso.
En medio ácido, tan sólo los monosacáridos son capaces de reducir el Cu2+ a Cu+. El
Cu+ así producido reduce al ácido fosfomolíbdico a un complejo de intenso color azul
oscuro.
Ioduro Los polisacáridos sin ramificar forman complejos característicos cuando reaccionan con
yodo. Los ramificados también lo hacen, pero los complejos formados tienen menos
intensidad de color.
Seliwanoff Este ensayo es específico para cetosas y se basa en la conversión de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su
posterior condensación con resorcinol formando así complejos coloreados.
Bial El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma complejos de coloración sólo con las
pentosas.
Lugol El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos,
particularmente el almidón por la formación de una coloración azul violeta intensa y el glicógeno y las
dextrinas por formación de coloración roja.
27
BIOQUÍMICA 201103
Rotación óptica
Es una propiedad importante que permite identificar los carbohidratos, y determinar el grado
de pureza de los mismos, particularmente monosacáridos, ocasionada por la presencia de
centros asimétricos o quirales en la estructura molecular, los cuales desvían el plano de luz
polarizada. Esta propiedad no es exclusiva de los carbohidratos pues la presentan todas
aquellas sustancias denominadas óptimamente activas, por tener en su estructura centros
quirales.
Para la medición de la rotación óptica los factores importantes a tener en cuenta son: La
longitud de onda de luz polarizada, la cantidad de material óptimamente activo, y la naturaleza
del solvente cuando se usa. Los cambios en la temperatura ocasionan solo pequeñas
variaciones en las medidas de la rotación.
Los datos de rotación óptica se representan como |α] = rotación específica o | M] = Rotación
molecular, donde:
|α| = α/LC
α: Rotación observada en grados angulares
L: Longitud en decímetros del paso de luz polarizada a través de la muestra
C: Concentración en gramos por mililitro.
M: Peso molecular
| M | = M x | α |/100 cuando el plano de luz polarizada se desvía en el sentido de las

manecillas del reloj se antepone un signo positivo al número de grados que fue rotado el plano
de luz.
El plano de luz polarizada hacia la derecha se llaman dextrógiros o dextro rotatorios, y esa
característica se indica anteponiendo el signo (+) al nombre del compuesto. Los compuestos
que desvían el plano de luz polarizada hacia la izquierda se llaman levógiros o levo rotatorios,
y esa característica se indica anteponiendo el signo (-) al nombre del compuesto.
O H O H Los prefijos D y L no tienen nada que ver con el carácter

C C dextro/levo rotatorio de la molécula, sino que indican la
H – C – OH HO – C – H posición del OH del penúltimo carbono en la representación
HO – C – H H – C – OH
de Fischer. Para indicar su poder rotatorio hay que utilizar
los signos (+) y (-). Da la casualidad de que el D-
H – C – OH HO – C – H
gliceraldehído es dextrógiro (D-(+)-gliceraldehído) y de que
H – C – OH HO – C – H
el L-gliceraldehído es levógiro (L-(-)-gliceraldehído), pero
CH2OH CH2OH
pueden existir compuestos que pertenecen a la serie D y
D-glucose L-glucose que son levógiros, como la D-(-)-fructosa.
28
BIOQUÍMICA 201103
Ilustración 2 Molécula de glucosa.
8.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.
Tabla 18 Materiales y reactivos.

Reactivo de Benedict Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
Reactivo Fehling A y reactivo Fehling B Gradilla 2
Lugol Pinza para tubos 2
Glucosa Pipetas Pauster con bulbo 4
sacarosa Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
almidón Estufa 1
Fructosa Cámara de flujo laminas 1
Reactivo Fehling A y B Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4
α-naftol Pera de goma para pipetas 4
Vidrios reloj grandes
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica
8.2 PRUEBA DE BENEDICT
Es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato sódico)

utilizados hacen que este test sea más sensible y estable.
Tabla 19 Prueba de Benedict (detecta la presencia de azúcares reductores)

con 3 ml de reactivo de
1
Glucosa al 1% Benedict Preparar los tubos de ensayo. Agregue a cada tubo de
con 3 mL de reactivo de  ensayo 2
2
sacarosa al 1% Benedict Agregue a cada tubo de ensayo ml de reactivo de Benedict
con 3 mL de reactivo de 2 +
3 Baño de agua hirviente por
almidón al 1% Benedict ml de reactivo de Benedict.
con 3 mL de  10 minutos.
reactivo de
4 jugo de cebolla Tubos de ensayo en un baño de
Benedict
al 1% agua hirviente por unos 10
con 3 mL de reactivo de minutos.
5
Fructosa al 1% Benedict 
Agite cada tubo de ensayo

con 3 mL de reactivo de Observar y tomar apuntes de los
6 cambios. Positiva aparece un
agua Benedict
precipitado rojizo, verde o
amarillo.
3 ml de solución respectiva
29
BIOQUÍMICA 201103
8.3 REACCIÓN DE FEHLING
Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión Cu 2+ de color azul a
Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo carboxilo.
Tabla 20 Reacción de Fehling (detecta la presencia de azúcares reductores)

con 3 mL de
Reactivo Fehling A
1 Glucosa al Preparar los tubos de ensayo. Añadir reactivo Fehling A y
Reactivo Fehling B
1%  reactivo Fehling B
con 3 Ml de Añadir 1 ml del reactivo +
Reactivo Fehling A
2 sacarosa al Fehling A y 1 ml del Baño de agua hirviente por
Reactivo Fehling B
1%  10 minutos.
con 3 mL de Tubos de ensayo en un baño
Reactivo Fehling A
3 almidón al de agua hirviente por unos 10
Reactivo Fehling B
1% minutos.
con 3 mL de 
Reactivo Fehling A
4 jugo de Baño de agua hirviente por
Reactivo Fehling B
cebolla al 1% 10 minutos.
con 3 mL de 
Reactivo Fehling A
5 Fructosa al Observar y tomar apuntes de
Reactivo Fehling B
1% los cambios.
con 3 mL de Reactivo Fehling A
6
Lactosa al 1% Reactivo Fehling B 3 ml de solución respectiva
Reactivo Fehling A: disolver 7 g CuSO4 · 5 H2O en 100 ml de agua destilada.

Reactivo Fehling B: 35 g de tartrato de sodio y potasio + 12 g NaOH en 100 ml de agua destilada
8.4 REACCIÓN DE MOLISCH

La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reacción de
Molisch, que a cierto punto es la reacción universal para cualquier carbohidrato. Se basa en la
acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono. En dicha
reacción el ácido sulfúrico cataliza la hidrólisis de los enlaces glucosídicos de la muestra y la
deshidratación a furfural (en las pentosas) o hidroximetilfurfural (en las hexosas). Estos
furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de Molisch (reacción de Molisch) dando
un producto coloreado.
Tabla 21 Reacción de Molisch.

con 3 mLde de reactivo de
1
Glucosa al 1% Molisch Preparar los tubos de ensayo. reactivo de Molisch
30
BIOQUÍMICA 201103
+  +
H2SO4 Agregue dos gotas de reactivo de Incline el tubo y deposite 1
reactivo de Molisch mL de H2SO4
2
con 3 mL de Molisch 
Sacarosa al 1% + Mezcle bien No mezcle
H2SO4 
reactivo de Incline el tubo y deposite 1 mL de
con 3 mL de Molisch H2SO4 concentrado deslizándolo
3
Galactosa al 1% + lentamente por la pared del tubo.
H2SO4 
reactivo de No mezcle. Sólo coloque el tubo
con 3 mL de Molisch en posición vertical y observe la
4
Ribosa 1% + formación del anillo rojo violeta
H2SO4 que aparece en la zona de
reactivo de contacto de los dos líquido
con 3 mL de Molisch
5 3 ml de solución respectiva
Fructosa al 1% +
H2SO4 +
reactivo de coloque el tubo en
con 3 mL de Molisch posición vertical y observe
6 la formación del anillo rojo
maltosa al 1% +
H2SO4 violeta
8.5 PRUEBA DE TOLLENS

Esta prueba es análoga a la de Selivanoff, pero para el reconocimiento de galactosa y sus
derivados. La galactosa, algunas pentosas y el ácido glucurónico dan un color rojo con el HCl
y floroglucina. La glucosa da también un color rojo con la floroglucina, pero muy opaco, en
contraste con el color rojo transparente de la galactosa
Tabla 22 Prueba De Tollens.

con 3 mL de α-naftol
1 solución Glucosa + Preparar los tubos de ensayo. dos gotas de solución de
al 1% H2SO4  α-naftol
con 3 mL de α-naftol Agregue dos gotas de solución de +
2 solución de + α-naftol 1 mL de H2SO4
Sacarosa al 1% H2SO4 
con 3 mL de α-naftol Mezcle bien
3 solución de + 
Galactosa al 1% H2SO4 Incline el tubo y deposite 1 mL de
con 3 mL de α-naftol H2SO4 concentrado deslizándolo
4 solución de + lentamente por la pared del tubo.
Lactosa 1% H2SO4 
con 3 mL de α-naftol No mezcle. Sólo coloque el tubo
5 solución de + en posición vertical y observe la
Fructosa al 1% H2SO4 formación del anillo rojo violeta
con 3 mL de α-naftol que aparece en la zona de
contacto de los dos líquido 3 ml de solución
6 solución de + respectiva
maltosa al 1% H2SO4
31
BIOQUÍMICA 201103
8.6 REACCIÓN DE LUGOL (YODO)

La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de poliyoduro a
partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo de lugol.
La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la amilosa es de estructura

lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices en donde se juntan las moléculas de yodo
formando un color azul oscuro; mientras que la amilopectina es de estructura ramificada, con
enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más cortas y las moléculas de yodo son
incapaces de juntarse presentando un color intermedio entre anaranjado o amarillo.
Tabla 23 Reacción de almidones con lugol (yoduro potásico).

con 3 ml de solución
1 lugol
Glucosa al 1% Preparar los tubos de Agregar 5 gotas de lugol
con 3 mL de ensayo.
2 solución sacarosa al lugol 
1% Agregar 5 gotas de lugol
con 3 mL de 
3 solución almidón al lugol Observar y tomar
1% apuntes de los cambios.
con 3 mL de solución
4 jugo de cebolla al lugol
1%
con 3 mL de
5 solución de almidón lugol
de papa al 1% 3 ml de solución respectiva
6 con 3 mL de agua lugol Observar y tomar apuntes de

los cambios.
32
BIOQUÍMICA 201103
8.7 PREGUNTAS
Explique por qué el monosacárido gliceraldehido da negativa la prueba Molish.
¿Cuáles son las aplicaciones prácticas de las pruebas estudiadas?
Defina los siguientes términos: carbono anomérico, centro quiral, levorrotatorio.
Dibuje los monosacáridos glucosa, galactosa, ribosa y fructosa, clasifíquelos según el número
de átomos de carbono y la función principal
Efectué un enlace hemiacetálico y uno hemicetálico, escriba las diferencias entre ambos
enlaces.
Escriba las funciones: aldehídica, cetónica, alcohólica, ácida, colóquelas en orden de

reactividad y explique el porqué de ese orden.
Explique en qué consiste la hidrólisis ácida de disacáridos.
Defina los siguientes términos: azúcar reductor y azúcar no reductor, cite ejemplos.
Efectué un enlace glucosídico.
33
BIOQUÍMICA 201103
9 Practica 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS
Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por
C, H y O, aunque este último elemento se encuentra en proporciones mucho más bajas que los
dos primeros. Además, pueden contener P, N y S. Constituyen un grupo de sustancias muy
heterogéneas con características químicas diversas, pero con algunas propiedades físicas
comunes, que podrían resumirse en estas dos:
_ Son mayoritariamente insolubles en agua.
_ Son solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo, alcanos (ej: hexano),
benceno, acetona y alcoholes.
De acuerdo a la estructura química los lípidos se clasifican en dos grupos, de acuerdo al

contenido en su composición ácidos grasos (Lípidos saponificables) o no lo posean
(Lípidos insaponificables).
La saponificación consiste en una hidrólisis alcalina de la preparación lipídica (con KOH o

NaOH). Los lípidos derivados de ácidos grasos (ácidos monocarboxílicos de cadena larga)
dan lugar a sales alcalinas (jabones) y alcohol, que son fácilmente extraíbles en medio
acuoso.
Tabla 24 Clasificación de lípidos.

Lípidos saponificables Simples Acilglicéridos
Céridos
Complejos Fosfolípidos
Glucolípidos
Lípidos insaponificables Terpenos
Esteroides
Prostaglandinas
9.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.

Tabla 25 Materiales y Materiales y reactivos.
Aceite de girasol Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15
Agua destilada Gradilla 2
Hexano Pinza para tubos 2
Acetato de etilo Pipetas Pauster con bulbo 4
Etanol Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5
NaOH Estufa 1
KOH Cámara de flujo laminas 1
Reactivo Sudán III Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 ml. 4
Pera de goma para pipetas 4
Vidrios reloj grandes
Probeta 100 ml
Balón aforado de 25 ml
Agitador de vidrio
Balanza analítica
34
BIOQUÍMICA 201103
9.2 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS

Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en
pequeñísimas gotitas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, puede
sepárese en reposo, por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por su menor
densidad se sitúa sobre la de agua. Por el contrario, las grasas con solubles en los llamados
disolventes orgánicos como el éter, benceno, xilol, cloroformo, etc.
Tabla 26 Determinación de solubilidad en lípidos.

con 3 ml de 4 mL de agua Preparar los tubos de ensayo. 4 mL de hexano
1
Aceite vegetal destilada 
con 3 ml de 4 mL de hexano
2 4 mL de hexano
Aceite vegetal 
Agite los tubos.

deje reposar unos minutos

cambios. 3 ml de Aceite vegetal
+
Agite los tubos
+
Dejar en reposo.
+
Observar y tomar apuntes de
los cambios.
SAPONIFICACIÓN
Muchos lípidos, como por ejemplo: los ácidos grasos, reaccionan con bases fuertes, NaOH o
KOH, dando sales sódicas o potásicas que reciben el nombre de jabones. Esta reacción se
denomina de saponificación. Son saponificables los ácidos grasos o los lípidos que poseen
ácidos grasos en su estructura.
Tabla 27 Ensayo de Saponificación.

3 mL de Agregar manteca en un tubo
3 mL de NaOH
1 aceite Preparar los tubos de ensayo. de ensayo.
(1 N)
vegetal 
Agregar 3 mL solución de NaOH
3 mL de (1 N).
2 aceite 3 mL de KOH 
vegetal Agitar.

Baño de agua hirviente por
10 minutos.

Dejar enfriar. 3 ml de la solución de NaOH
 (1 N).
Observar y tomar apuntes de los +
cambios. Baño de agua hirviente por
10 minutos.
35
BIOQUÍMICA 201103
Si posible repetir el mismo procedimiento Observar y tomar apuntes de

con KOH los cambios.
9.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas, porque es
insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se
disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.
Tabla 28 Tinción: Reacción con el Sudán III.

con 3 ml de 3 ml de Aceite vegetal
1 Aceite Sudan III Preparar los tubos de ensayo.
vegetal 
con 3 mL de Agregar 3mL de aceite vegetal.
2 Aceite Tinta roja 
vegetal Agregar 8 gotas de Sudan III


cambios.
8 gotas de Sudan III
Observar y tomar apuntes de

los cambios.
9.4 PREGUNTAS:
¿Qué son los jabones? ¿Cómo se pueden obtener los jabones?

¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?
¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?
Indica lo que ocurre con las mezcla aceite – sudan III y aceite-tinta y explica a qué se debe la
diferencia entre ambos resultados.
¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo? ¿Y
con la de los otros compuestos empleados? ¿A qué se deben las diferencias observadas
entre ambas emulsiones?
¿Qué ocurre con la emulsión cuando se le añade detergente?
36
BIOQUÍMICA 201103
10 BIBLIOGRAFÍA
Bejarano, L. D. C., & de Química, P.GUÍA DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA.
González, M. P. (2003). Prácticas de laboratorio y de aula Narcea Ediciones.
HERNÁNDEZ-BERMÚDEZ, C.GLORIA GUTIÉRREZ-VENEGAS.

Quiñones, Z. (2004). “Identificación de carbohidratos y proteínas” . Retrieved from http://lls.ulat.ac.pa/archivos/vrodrig_8-352-
694/Archivos_de_Cursos/Materia_-_EFI002-Biologia_I_Grupo_-_1_Anio_-_2011-1/BQMA-SIB2.PDF
Rivera, E. I. V. (2005). Prácticas de bioquímica descriptiva USON.
TORRES, G. (2013). 6. DESCRIPCIÓN DE PRÁCTICAS PRÁCTICA no. 1: METODOS CUALITATIVOS PARA LA

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http://www.academia.edu/6410068/BIOQUIMICA_INF_4
Universidad Complutense de Madrid. (Marzo de 2007). UCM- Manual de Gestión de Residuos Peligroso. Recuperado el 15
de Enero de 2012, de http://www.ucm.es/info/ucmp/cont/descargas/documento28113.pdf
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http://xml.cie.unam.mx/xml/dir/seguridad/Lineamientos_para_el_Desechos.pdf
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http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/practicasgenerales.htm
http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINICA_10817.pdf
http://veterinaria.uaemex.mx/_docs/603_958_MP%20Bioqu%C3%ADmica.pdf
37

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GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

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7.3 REACCIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS ......................................................... 22

Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos. ............................................................................... 13

Tabla 22 Prueba De Tollens. ................................................................................................... 31

La guía de prácticas de laboratorio introduce al estudiante en los procedimientos

Los objetivos de las prácticas del curso de bioquímica son:

2. Que el estudiante adquiera una preparación en Bioquímica que le permita comprender la

La bioquímica es una rama de la ciencia encargada de descifrar los mecanismos esenciales

3 PRE INFORME DE LABORATORIO

En la redacción de los preinformes se deben conjugar los verbos en tiempo presente

La estructura de los preinformes es la siguiente:

La discusión contendrá un análisis crítico de los resultados obtenidos de la actividad práctica y

5 Practica 1. SEGURIDAD Y NORMAS DE LABORATORIO

Referente teórico seguridad y normas de laboratorio

En el laboratorio se realiza, para el caso del curso de bioquímica, prácticas experimentales: en

5.1 NORMAS PERSONALES

Asistir puntualmente en la fecha y hora programada, igualmente al entrar a las instalaciones

5.2 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE PRODUCTOS QUÍMICOS

No usar recipientes alimenticios para contener productos químicos e igualmente cualquier

Si cuenta con sistemas de extracción y renovación mecánica de aire activados, manténgalos

5.3 NORMAS PARA LA UTILIZACIÓN DE INSTRUMENTACIÓN

Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza se utilizará un recipiente

5.4 NORMAS DE EMERGENCIA

5.5 MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS.

Identifique la señalización que encuentra en el laboratorio, fotografié o dibuje los pictogramas

6 Practica 2: PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.

Referente teórico de aminoácidos

Tabla 1 Clasificación de los aminoácidos.

Grupos R Propiedades de los aminoácidos

Incluye este grupo la serina, treonina, cisteína, asparagina y glutamina.

Con una carga neta negativa a pH 7.0 son: aspartamo y el glutamato.

La cadena R es de estructura variable y es la responsable de las características particulares de los AA y de su

Tabla 3 Pruebas bioquímicas para identificar aminoácidos.

6.1 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

6.2 REACCIÓN CON LA NINHIDRINA

Tabla 5 Procedimiento a realizar para la reacción de ninhidrina.

6.3 REACCIÓN DE BIURET

Tabla 6 Procedimiento a realizar para la reacción de Reacción de Biuret.

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo

6.4 REACCION XANTOPROTEICA.

Tabla 7 Procedimiento a realizar para la reacción Xantoprotéica.

Amoniaco (NH4OH) concentrado en +

6.5 REACCION DE MILLON

El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio a pH

Tabla 8 Procedimiento a realizar para la reacción de millón.

6.6 REACCION DE SAKAGUCHI

El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina reacciona con soluciones de

Tabla 9 Procedimiento a realizar para la reacción de Sakaguchi.

solución de Sodio (NaOH Preparar los tubos de ensayo. minutos.

Tabla 10 Resumen de las reacciones de aminoácidos en las diferentes técnicas.

Escriba la reacción para cada una de las pruebas realizadas.

7 Practica 3. BIOQUÍMICAS DE LAS PROTEÍNAS

Referente teórico de proteínas y aminoácidos.

Tabla 11 Descripción de reactivos y métodos.

El Cu+ y los grupos R de la tirosina, triptofano y cisteína

La reacción entre el colorante y la proteína es muy

7.1 PROCEDIMIENTO Y MATERIALES

Tabla 12 Materiales y Materiales y reactivos.

1 caja con puntas de 200 μL (amarillas) para micropipeta

1 caja con puntas de 1000 μL (azules) para micropipeta.