UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos Naturales

Ingeniera Agroindustrial
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
ANÁLISIS MICROBIOLOGICO DEL AIRE, SIEMBRAS Y AISLAMIENTOS

Camila Silva1 Cód.: 117003939. Correo: maria.silva.rueda@unillanos.edu.co, Gabriela Castro Salgado 2 Cód.: 117004010 Correo:
gabriela.castro.salgado@unillanos.edu.co, Laura Aponte Sarmiento 3 Cód.: 117003804. Correo: laura.aponte.sarmiento@unillanos.edu.co
Resumen: El objetivo de esta
práctica fue determinar las
bacterias del aire en el
laboratorio de microbiología
para establecer la posibilidad
de riesgo por la presencia de
microorganismos, ya que el
aire actúa como fuente de
contaminación. Además,
para la siembra y factores ambientales como
aislamiento se emplea la
siembra por agotamiento con
el fin de obtener colonias
aisladas en Agar nutritivo.
Palabras Clave:
microorganismos,
contaminación,
aislamiento, colonias.
INTRODUCCION
La determinación de los
microorganismos en el aire
interior se vuelve importante
cuando se analiza la
incidencia en la salud de las
personas que ocupan las
edificaciones, ya que el aire
es un medio de dispersión de
muchos microorganismos
patógenos, entre ellos las
bacterias (1).
El interés en la calidad del
aire de los laboratorios
radica principalmente en los
laboratorios de diagnóstico
de microbiología clínica y
ambiental. Por el carácter
del laboratorio de
microbiología clínica, en
estos espacios se originan
riesgos de diverso tipo,
especialmente biológicos,
que pueden producir
problemas en la salud de los
trabajadores y de los
usuarios. En estudios
realizados en laboratorios
ambientales, se encuentran
estudios como el realizado
por Herrera et al (2) en
cuatro laboratorios de
instituciones públicas en la
ciudad de Guatemala y
Barcenas. En esta
investigación se aislaron 40
géneros de bacterias, de los
cuales Staphylococcus y
Bacillus fueron los
predominantes.
Esencialmente, el tipo de
microorganismos
encontrados en el aire,
tienen relación con el tipo de
muestras que se trabajan, y
adicionalmente con las
bacterias que llegan con el
viento a las edificaciones y
pueden permanecer en ellas
por largos periodos de
tiempo influenciadas por
hora, temperatura, humedad,
polvo y viento. Así mismo, la
presencia de las bacterias
depende de los propios
ocupantes, los materiales
inadecuados y el trabajo que
se realiza en el interior (2).
Las bacterias Gram positivas
predominan en los ambientes
internos sobre las bacterias
Gram negativas, debido a
que son más resistentes y
que sobreviven por más
tiempo (3) aunque algunas
investigaciones han
reportado mayor
predominancia de bacterias
Gram negativas.
Siembra por
agotamiento: Este método
está basado en arrastrar,
mediante un asa de siembra,
un número cada vez más
pequeño de individuos. Es
un método rápido y simple
de agotamiento progresivo y
continúo del inóculo sobre
un medio sólido contenido
en una placa de Petri, como
se demuestra en la
Ilustración 1. El objetivo es
obtener, a partir de un
elevado número de bacterias,
un número reducido de ellas
distribuidas individualmente
sobre la superficie de la
placa. Al incubar la placa, y
dejar crecer las bacterias
distribuidas sobre ella, cada
una de las bacterias
originará una colonia. (4)
Tras 24 horas de incubación
se puede observar las
colonias formadas por los
distintos tipos de
microorganismos del cultivo
con sus diferentes
características, se observa
una mayor densidad de
crecimiento al principio del
agotamiento sin poder
diferenciar colonias, sin
embargo, al final de éste las
colonias están mejor aisladas
y se aprecian las diferencias Se selecciona el lugar para tomar
entre ellas como son el
tamaño, color y forma. (4)
Se coloca cada una de las cajas so
plana
Se retira la tapa de la caja para expo
15min
Se pone nuevamente la tapa y se rot
de los integrantes
Se lleva a incubar a 35℃ durante
nutriente
Ilustración 1. Siembra La caja de PDA se incuba a temp
por agotamiento. durante 3 días
I.MATERIALES Y Se cuenta las colonias de c
METODOS
Metodología para
aislamiento y siembra:
Se esterilizó el Asa (rojo vivo) con
Tabla1. Materiales análisis
del aire
Materiales para análisis microbiológico del aire
 1 caja de agar nutriente Se enfría sobre el med
 1 caja de agar PDA
 Incubadora 35℃
Se toma el inoculo (rep
Tabla2. Materiales siembra
y aislamiento
Materiales para siembra y aislamiento
 Cepa Se siembra según la té
 Caja Petri
 Mechero
Se repite procedimiento hasta red
 Asa
bacterias
Metodología para análisis
microbiológico del aire:
Se incuba la placa para dejar cre
distribuidas sobre ella y obtener la
II. RESULTADOS Y
DISCUSION
En la práctica de laboratorio
se realizaron varias siembras
con el fin de identificar los
microorganismos presentes
en la zona y en la caja de
Petri empleada para el
análisis de siembra y
aislamiento.

No se obtuvieron resultados
de la práctica de análisis
microbiológico del aire dado
que surgió un inconveniente
en el laboratorio y la caja de
Petri se cayó y aspirado impacta con un
posteriormente se dañó. Se
estima que la cantidad de
microorganismos en el aire
era incontable, dado que en
el medio ambiente circulan
esporas, bacterias, virus y
hongos y por consiguiente la
caja de Petri dañada contenía
todos esos microorganismos.
Se pretende realizar
nuevamente el laboratorio de
análisis microbiológico del
aire, para tener con certeza
un resultado apropiado para
su discusión.
El resultado obtenido de la
siembra por agotamiento fue
el siguiente:
Ilustración 2.
Resultado 1 de siembra
por agotamiento.
Ilustración 3.
Resultado 2 de siembra
por agotamiento.
Hábitat y medio de en aspirar el aire a través de
transmisión de una tapa perforada. Un
microorganismos. Obs. ventilador radial, controlado
Medioambient. 2002; 5:375- por un sensor de flujo, regula
402 Consultado el 22 de con precisión el flujo de aire
junio del 2019 en tiempo real. El aire
2. Herrera K, Cóbar O, De medio de crecimiento en una
León J, Rodas A, Boburg S, placa de contacto
Quan J et al. Impacto de la El sistema aspira un caudal
calidad microbiológica del constante de 100 litros por
aire externo en el ambiente minuto, regulando
Ilustración 4.
interno de cuatro automáticamente el caudal
Resultado 3 de siembra
por agotamiento. laboratorios de instituciones de acuerdo a la presión y
públicas en la ciudad de temperatura ambiental.
Como se puede observar en las Guatemala y Bárcenas, Villa Si la corriente de aire fuese
ilustraciones 2,3 y 4 los Nueva. Revista Científica. irregular a causa de factores
resultados fueron regulares, las 2012; 22(1):30-38 externos, o bien fuera
primeras dos ilustraciones
Consultado el 22 de junio del interrumpida o limitada por
muestran una leve
contaminación del cultivo. Estos 2019 capsulas de Petri
resultados se explican debido a sobrecargadas, la cantidad de
errores en el procedimiento, que 3. Konya T, Scott J. Recent aire será automáticamente
tiene su fundamento en la advanced in the reajustada
inexperiencia al realizar estos microbiology of the built
procedimientos. environment. Curr ¿En la industria
Sustainable Renewable farmacéutica como es la
La contaminación del cultivo Energy Rep. 2014; 1(2):35- clasificación de las zonas
puede deberse a la exposición 42. Disponible en: según el aire?
de la superficie del medio de http://link.springer.com/artic La calidad del aire en las
crecimiento al aire, que
le/10.1007/s40518-014- áreas de producción en la
representa un riesgo de
contaminación por 0007-4. Consultado el 23 de industria farmacéutica es un
microorganismos transportados junio del 2019 tema de vital importancia
por el mismo, también puede que requiere de los más altos
deberse a una esterilización 4. Duran F. Siembra, controles de calidad. Aunque
deficiente del asa, así como una aislamiento e identificación existen Normas que se deben
contaminación por hablar cerca de microorganismos cumplir, la mayoría de las
del medio de cultivo y/o utilizar Microbiología general 2019. empresas sobrepasa los
guantes sucios. Disponible en: estándares de calidad
https://www.fbioyf.unr.edu.ar establecidos debido a la
III. CONCLUSIONES /evirtual/pluginfile.pdf. importancia que estos
Consultado el 23 de junio del requieren. Actualmente el
 La técnica de 2019 marco regulatorio que nos
agotamiento es la rige en México, es la Norma
ideal si se quiere V. ANEXOS Oficial Mexicana NOM-059-
obtener colonias SSA1-2013 Que establece
aisladas que los requisitos mínimos y
¿En qué consisten los
permitan el estudio especificaciones tales como
métodos activos para
de las mismas. temperatura, humedad y la
determinar la calidad
calidad de aire entre otros,
 Para obtener buenos microbiológica del aire?
que se deben cumplir para la
resultados en las .Impactación directa en
fabricación de medicamentos
prácticas de medios de cultivo
en nuestro país. Uno de los
laboratorio, es Las partículas suspendidas
factores más importantes que
necesario y por en el aire tienden a
debemos de considerar al
consecuente precipitarse sobre las
momento de realizar el
obligatorio, superficies. Este método
diseño y la clasificación de
esterilizar cada consiste en dejar expuesta
las áreas en la industria
implemento una caja de Petri con el
farmacéutica es
utilizado para medio de cultivo sólido
indudablemente conocer el
siembra de seleccionado en las
tipo de medicamento que se
microorganismos. diferentes áreas, con el fin de
desea fabricar. Estos
captar estas partículas.
productos dividen
IV. REFERENCIAS .Succión
Básicamente en dos grupos,
Este procedimiento se basa
1. De la Rosa M del C, en el sistema de Impactación
Mosso MA, Ullán C. El aire: de Andersen, el cual consiste
Los estériles tales como los
medicamentos inyectables
Y los no estériles, que son
entre otros, las tabletas,
cápsulas, cremas,
suspensiones, jarabes, etc.