MÉTODOS

Y TÉCNICAS
EXPERIMENTALES ASOCIADAS
AL ESTUDIO DE LA
TRADUCCIÓN
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
 WESTERN BLOT / INMUNOBLOT

Pasos Generales
Técnica empleada en
Separación por
Biología Celular y Biología tamaño
1
Molecular para identificar
proteínas específicas de Transferencia a un
una mezcla compleja de 2
soporte sólido
proteínas extraída de
células. Marcar la proteína
blanco, usando los
Hace uso de Anticuerpos anticuerpos primarios y 3
Policlonales o secundarios adecuados
Monoclonales. para visualizarla
 WESTERN BLOT / INMUNOBLOT

Electroforesis Transferencia a una

Poliacrilamida Membrana

•  Membrana PVDF (polyvinyl

difluoride).
•  Nitrocelulosa.
•  Nylon.
WESTERN BLOT / INMUNOBLOT
WESTERN BLOT / INMUNOBLOT
 ELISA
(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)

Se debe tener un antígeno

inmovilizado en una
superficie sólida y luego
acomplejarlo con un
anticuerpo que está unido
a una enzima. La detección
Es una técnica basada en se lleva a cabo poniendo el
placas diseñada para la sustrato para la enzima
detección y cuantificación conjugada
de sustancias como
péptidos, proteínas,
anticuerpos y hormonas.
También se le llama
Inmunoensayo Enzimático
(EIA).
 ELISA
(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)

Existen varios formatos de trabajo para la

técnica de ELISA.
 ELISA
(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)
 PROTEÓMICA

La proteómica es el
estudio y Analizar las propiedades de las
caracterización de todo proteínas (niveles de expresión,
el conjunto de modificaciones post-
proteínas expresadas transcripcionales, interacciones,
de un genoma etc.) expresadas en una célula,
(proteoma). con el fin de obtener una visión
global e integrada de la
expresión, localización e
interacción de las proteínas.
 PROTEÓMICA

Estudios a nivel molecular

à  Genoma: Conjunto de todos los genes.
Qué podría pasar

à  Transcriptoma: Conjunto de mRNA.

Qué podría estar pasando

Proteoma: Conjunto de proteínas.

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Qué esta pasando
PROTEÓMICA
PROTEÓMICA
MICROARREGLOS DE PROTEÍNA
Gene Knockout
MICROARREGLOS DE PROTEÍNA
Gracias!