RADIOINMUNOENSAYO (RIA)

Fundamento:
 Se mezcla una cantidad constante de antígeno marcado radioactivamente y una cantidad
constante de un anticuerpo para ese antígeno
 Se produce la reacción entre antígeno (Ag) y anticuerpo (Ac)
 se separa la fracción de antígeno que se ha unido de la que permanece libre (hay varias
formas de hacerlo. En la figura inferior se utiliza un 2º anticuerpo dirigido contra el primero)
 se determina la radioactividad
 Si la muestra contiene además antígeno frío (no marcado), éste competirá con el marcado para
unirse al anticuerpo, y se observará un descenso en la medida de la radioactividad
 Este descenso es proporcional a la concentración de antígeno frío en la muestra

La radiactividad
en el
precipitado es la
medida.

La adición de
saber la cantidad de Se agrega una
antígeno marcado anticuerpos
cantidad fija de antiinmuglobulina
radiactivamente
anticuerpo precipita el complejo
específico. de antígeno marcado
con anticuerpo

La diferencia
entre las
radiactividades
en el control y
la muestra
desconocida es
proporcional a
la cantidad de
antígeno no
marcado en la
El antígeno no la adición de anti- muestra
conocer la cantidad marcado compite inmunoglobulina desconocida.
de antígeno
con el antígeno precipita el
marcado
radiactivamente marcado para el complejo de
mezclado con una anticuerpo antígeno marcado
cantidad con anticuerpo que
desconocida de contiene antígeno
antígeno no marcado y no
marcado marcado
Así es como Funciona:

Equilibrio Antigeno Anticuerpo

El Antígeno Marcado compite con el Antígeno Frio por su Unión al Anticuerpo Limitado

Ausencia de Antígeno da la Unión Máxima

Unión no específica del trazador al medio de reacción