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Fundamento Almacenamiento
La infusión de músculo de corazón y la peptona, otorgan al medio Medio de cultivo listo para usar en frascos a 10-35 ºC.
un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una gran va- Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
riedad de microorganismos, aún de aquellos nutricionalmente exi-
gentes. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar Procedimiento
es el agente solidificante. Siembra
El agregado de 5-10 % sangre ovina desfibrinada estéril (Britas- Por inoculación directa del material en estudio, estriar sobre la su-
heep) promueve el desarrollo de bacterias exigentes en sus reque- perficie del medio de cultivo.
rimientos nutricionales y la adecuada observación de las reacciones
de hemólisis. Incubación
El tiempo, temperatura y atmósfera de incubación, dependerán del
Contenido y composición microorganismo que se quiera recuperar.
Código B0414984: 6 frascos x 50 ml.
En general se recomienda:
FÓRMULA Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 ºC hasta 48
Infusión de músculo de corazón...................................................375.0 . horas.
Peptona................................................................................................................................10.0 g Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmós-
Cloruro de sodio..................................................................................................... 5.0 g fera con 5 % de CO2, a 35-37 ºC durante 24-48 horas.
Agar...........................................................................................................................................15.0 g.
Agua purificada..................................................................................................1000 ml. Interpretación de los resultados
pH final: 7.3 ± 0.2 Observar las características de las colonias.
Para el medio de cultivo conteniendo sangre, observar las reaccio-
Nota: la infusión de músculo de corazón es equivalente a 10 g de nes de hemólisis:
polvo. Hemólisis alfa: lisis parcial de los glóbulos rojos. Se observa un
halo de color verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido
Instrucciones a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina (compuesto
Colocar los frascos cerrados en baño maría y llevar a ebullición para de color verdoso) por el peróxido de hidrógeno generado por los
fundir el medio de cultivo sólido contenido en los mismos. microorganismos.
Una vez que se ha fundido el medio de cultivo, retirar cuidadosa- Hemólisis beta: lisis total de los glóbulos rojos. Se observa un halo
mente los frascos del baño maría y dejar enfriar. claro, brillante alrededor de la colonia en estudio.
Cuando alcanzan temperatura 45-50 ºC, abrirlos y distribuir aproxi- Hemólisis gamma: ausencia de lisis de los glóbulos rojos. El me-
madamente 15 ml en placas de Petri estériles. dio de cultivo no presenta modificaciones de color y aspecto alre-
Preparación de Agar Sangre: agregar 5-10 % de sangre ovina dedor de la colonia en estudio.
desfibrinada estéril (REF Britasheep) al medio esterilizado, fundi-
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Sangre Agar Base
SÍMBOLOS UTILIZADOS
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