UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR

FACULTAD DE INGENIERIA Y ARQUITECTURA

ESCUELA DE INGENIERÍA QUIMICA Y DE ALIMENTOS
MICROBIOLOGÍA GENERAL
INTERCICLO 2018

LABORATORIO Nº1
DISTRIBUCIÒN DE LOS MICROORGANISMOS EN LA NATURALEZA Y
COLORACIÒN SIMPLE

LIC. ANA ISABEL PEREIRA DE RUIZ.

INSTRUCTORA:
MÒNICA CASTRO
INTEGRANTES:
ML15006 MARTINEZ LARA , JOSÈ MIGUEL.
GH12005 GRAJEDA HERNÀNDEZ ,CARLOS ENRIQUE.
VA15002 VÀSQUEZ AGUILAR, AURORA BEATRIZ.

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 10 Y 17 DE JULIO.

CIUDAD UNIVERSITARIA, 24 de julio del 2018.
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TABLA DE CONTENIDO
ÍNDICE DE FIGURAS..............................................................................................................................iii
ÍNDICE DE TABLAS................................................................................................................................iii
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................................... 4
OBJETIVOS ........................................................................................................................................... 5
MARCO TEORICO ................................................................................................................................. 6
OBSERVACIONES.................................................................................................................................. 9
CUESTIONARIO .................................................................................................................................. 16
BIBLIOGRAFIA .................................................................................................................................... 18
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ÍNDICE DE FIGURAS

FIGURA 1.1 bacterias en el suelo: ...……………………………………………………………6

FIGURA 1.2: Staphulococcos aureus…………………………………….………………………7
FIGURA 2.1: Resultados siembra ……………………………………………………………..….9
FIGURA 2.2: vista posterior muestra piscina …………………….…….............…..10
FIGURA 2.3: vista superior muestra piscina …………………………..………………10
FIGURA 2.4: vista posterior muestra aire…………………….……...…………………..11
FIGURA 2.5: vista superior muestra aire…………………………….…..………………11
FIGURA 2.6: vista posterior muestra piel…………………………………….……...…..11
FIGURA 2.7: vista superior muestra piel…………………………….…..………………11
FIGURA 2.8: vista posterior muestra vegetal…………………….………………..…..12
FIGURA 2.9: vista superior muestra vegetal…………………………..………………12
FIGURA 2.10: vista posterior muestra de tierra…………………….…………...…..13
FIGURA 2.11: vista superior muestra de tierra………………….…..………………13
FIGURA 2.12: Colonia seleccionada 1...….…………………………………………………13
FIGURA 2.13: Colonia seleccionada 2.……..……………………….…….……..……...…13
FIGURA 2.14: Colonia seleccionada 1 microscopio ..………..……………….…14
FIGURA 2.15: hifas.……………..………………………………….……..…….………………14

ÍNDICE DE TABLAS

TABLA 2.1: Identificación de hongos y levaduras………………………………………………..12

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INTRODUCCIÓN

Se pueden encontrar microorganismos en todos los elementos físicos de la naturaleza, desde las
partes más profundas del océano hasta los limites de la troposfera. En cada ambiente encontramos
diferentes tipos de microorganismos que se han desarrollado gracias a las diferentes condiciones
físicas y químicas propias de su hábitat.

La diversidad microbiana en cada medio depende de diferentes factores como la disponibilidad y

concentración de nutrientes, la temperatura, el pH, las zonas aeróbicas y anaeróbicas, y la mezcla
de oxidantes y reductores en el ambiente.

Todos los ecosistemas dependen de los microorganismos, muchos contribuyen significativamente

en su regulación y funcionamiento, unos actúan como saprófitos descomponiendo la materia, otros
como autótrofos fijando gases atmosféricos, también podemos encontrarlos en simbiosis con otro
ser vivo y, por último, otros pueden comportarse como parásitos.

Este reporte trata de la identificación de los diferentes microorganismos presentes en el suelo, el

aire, el agua de uso doméstico y aguas negras, así como también la microbiología en los vegetales y
en la superficie de la piel de los seres humanos. Con el propósito de poder identificar (género y
especie) los diferentes tipos de microorganismos presentes en la naturaleza se han implementado
técnicas que necesitan de procedimientos especiales practicados en el laboratorio para poder
observar las diferencias macro y microscópicas que presentan los microorganismos.

Los procedimientos empleados son métodos fundamentales en microbiología para la obtención de

colonias aisladas y para mantener estos cultivos puros y vivos. El uso del microscopio junto a la
coloración simple son herramientas y técnicas indispensables en esta ciencia que se han dejado de
manifiesto en este reporte para estudiar la microbiología en la naturaleza.
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OBJETIVOS

Objetivo general:

Observar la presencia y distribución de los organismos presentes en el aire, agua , tierra y en el

producto vegetal .

Objetivos específicos:

• Advertir la presencia de un mismo tipo de microorganismo en más de un medio estudiado

• Percibir las diferencias y características macro y microscópicas de los organismos
obtenidos luego del periodo de incubación.
• Reportar los resultados de la coloración simple.
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MARCO TEORICO
Todos los ecosistemas dependen de microorganismos muchos de ellos contribuyen
significativamente en los procesos naturales, numerosos microorganismos intervienen también en la
producción de alimentos y productos químicos y farmacéuticos.

MICROBIOLOGIA EN EL SUELO

Los suelos varían según sus propiedades físicas, químicas y biológicas. Está constituido por partículas
minerales, residuos orgánicos y sistemas biológicos. El suelo contiene una gran población de
microorganismos (bacterias, hongos y algas) cuyas actividades tienen una gran importancia en la
fertilidad del suelo.

Existen millones de bacterias en el suelo, el número y tipo de microorganismos presentes en el suelo

dependen de diversos factores ambientales (nutrientes, humedad, aireación, temperatura, pH, etc.).

Figura 1.1 bacterias que se encuentran en el suelo a la izquierda streptomyces y a la derecha

nocardia

Dentro de la biología, la microbiología del suelo comprende cuatro grupos de microflora; bacterias,
hongos, Actinomyceas y Algas y un grupo de microfauna protozoarios.

MICROBIOLOGIA DEL AIRE

La microbiología del aire comienza en el siglo XIX con Pasteur quien diseño métodos para estudia los
microorganismos en el aire y descubrir la causa de algunas enfermedades. Los microorganismos
dispersos en el aire tienen una gran importancia biológica y económica las enfermedades
transmitidas en el aire producidas por bacterias virus y hongos son respiratorias, sistemáticas y
alérgicas.

El aire contiene suspensión de diferentes microorganismos especialmente bacterias y hongos,

algunos microorganismos se encuentran en forma de células vegetativas, pero más frecuentes son
las formas esporuladas, ya que las esporas son metabólicamente mas activas y sobreviven mejor en
la atmosfera porque soportan la desecación.
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El numero de microorganismos de la atmosfera cambia según la altura. El aire es importante en

microbiología porque proporciona un mecanismo de transferencia para los microorganismos cuyo
alcance es mucho mas amplio que el del agua.

MICROBIOLOGIA DEL AGUA

El tipo de microorganismo encontrado en un ambiente acuático viene determinado por las

condiciones físicas y químicas que prevalecen en ese ambiente:

Luz: la mayor parte de formas de vida acuática dependen directa o indirectamente de los productos
metabólicos de los organismos fotosintéticos.

pH: los microorganismos acuáticos crecen mejor en un rango de 6.5-8.5. a si mismos la cantidad de
nutrientes presentes en un ambiente acuático influye significativamente en ele crecimiento
microbiano los nitratos y fosfatos son constituyentes inorgánicos que promueven el crecimiento de
organismos. Las aguas residuales domesticas e industriales llegan a los lagos y los arroyos y tanto su
degradación como los efectos sobre la vida microbiana constituyen un importante factor sobre la
vida microbiana

MICROBIOLOGIA DE LA PIEL

La piel esta expuesta a toda clase de microorganismos, pero también es la más resistente a este tipo
de bacterias porque poseen mecanismos de protección para limitar la colonización. Estas infecciones
de la piel generalmente se transmiten por contacto con personas infectadas. La piel tiene sus barreras
o defensas.

La piel normal de los humanos está habitada generalmente por numerosos microorganismos. La flora
predominante incluye Staprhylococus epidermis, especies de micrococcus y diteroides. Otras
bacterias como Staphylococcus aureus, gammahemoliticos y levaduras colonizan transitoriamente la
piel.

Figura 1.2 staphylococcus aureus

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La cavidad oral está expuesta a un gran numero de bacterias que varían de unos individuos a otros.
Los estreptococos del grupo viridan representan el 30-60% de la flora, junto con anaerobios levaduras
y otros.

MICROBIOLOGIA DE LOS VEGETALES

Entre los factores que favorecen el ingreso de microorganismos en los vegetales podemos anotar a
los siguientes:

1.-Medio ambiente adecuado: Actúa sobre el vegetal predisponiéndolo a ser atacado o

susceptibilizándolo y volviendo más agresivo al microorganismo. Ejemplo: Exoascus deformans, se
manifiesta en primavera al brotar las plantas de durazno.

2. Temperatura: La temperatura del suelo y de la atmósfera que no son ideales a los vegetales,
resquebrajan y lesionan las raíces y otras zonas del vegetal.

3. Humedad: Los microorganismos necesitan de una apropiada concentración de humedad para

desarrollarse, y la encuentran en los vegetales después de las lluvias, nieblas, gotas de gutación o por
el excesivo vapor de aire.

4. Vientos: Dañan a los vegetales mecánicamente, es decir pueden tumbar a la planta, quebrar las
raíces, causando heridas, etc., por ingresan los microorganismos.

5. Hidratación. - La turgencia protege al vegetal, cuando disminuye ésta la menor hidratación

favorece la penetración de los microorganismos.

6. Luz: necesaria en los procesos vitales de los microorganismos. En horas de luz excesiva es posible
el ingreso de microorganismos en los vegetales.

los microorganismos asociados a plantas pueden ser agrupados de forma genérica en dos categorías:
bacterias epifitas o presentes en el exterior de la planta (rizosfera o filosfera) y endobacterias o
bacterias que están infectando el interior de los tejidos vegetales

La microbiota bacteriana sobre las hojas es predominantemente aerobia, y está compuesta por las
bacterias residentes, además de las bacterias que son transportadas por el aire y que se depositan
transitoriamente. Esta población transitoria de bacterias suele estar muy influenciada por las
bacterias procedentes de la cubierta vegetal de las plantas cultivadas y silvestres cercanas.

En cuanto al agua, los microorganismos epifitos foliares dependen de la lluvia, el rocío o las altas
relaciones hídricas debidas al aporte de agua de lluvia; bajo las condiciones climáticas habituales, el
agua solo está disponible en la hoja de manera intermitente y sin agua, las células bacterianas mueren
rápidamente.
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OBSERVACIONES
Para la obtención de los microorganismos presentes en la muestra de tierra blanca ,aire del
interior de laboratorio cerca del autoclave , agua de piscina , de la muestra orgánica(en este
caso de la flor del paraíso) y de la piel humana se emplearon cajas Petri que ya contenían en
su interior el PDA para su cultivo.

Se dejaron incubando las placas en posición invertida durante 8 días a temperatura

ambiente obteniéndose los siguientes resultados:

Figura 2.1 :Resultados de la siembra de las muestras de agua, piel, suelo aire y material orgánico.

Los resultados generales dieron positivo en lo que respecta al crecimiento de

microorganismos en los medios estudiados ( tal es el caso de microrganismos como los
hongos , levaduras, mohos u otros ).Lográndose observar macroscópicamente sus diversas
formas y así poder distinguir entre un mismo tipo de microorganismo en dos o más medios
distintos entre (ejemplo tierra y la piel).

La descripción de los resultados individuales se da a continuación:

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Para la muestra de agua de piscina :

Descripción:
Las colonias que proliferaron en la muestra, a simple vista , resaltan dos: una de un color negro
con un tipo de espirales marcadas en su superficie así como una pequeña altura sobre la misma ,
la cual ayuda a que se le pueda clasificar en función de su elevación como una : colonia elevada y
por su tipo de forma : entera, la segunda es de un color blancuzo con centro marrón en su parte
inferior, esta colonia poseía una forma dentada y por su elevación se puede catalogar como
elevada. Ambas se observaban que tenían una consistencia esponjosa.

Figura 2.2 :Vista de la parte posterior de la caja Petri Figura 2.3 : Vista de la parte superior de la caja
para la muestra de agua de piscina. Petri para la muestra de agua de piscina.

Para la muestra de aire (tomado del laboratorio cerca del autoclave):

Descripción:
Dentro del contenedor de la muestra de aire se logran observar tres colonias a simple viste, dos
de ellas pequeñas en comparación a la extensión de la colonia marrón.
Una de las colonias pequeñas se encuentra entre el límite de la colonia marrón y la colonia
blanca , es de un color verde oscuro , presenta una elevación con respecto a su superficie sin
embargo es una elevación pulvinada y su forma es granular y es de una apariencia esponjosa.
La segunda colonia pequeña es de un color blanco puro y se extiende en el límite de la colonia
mayor , no presenta elevación por lo cual se clasifica como una colonia plana pero posee una
apariencia rizoide sobre la superficie del medio.
La colonia mayor es de un color marrón como se mencionó anteriormente sin embargo hay
zonas donde existe un degradado en su color en forma de líneas semicirculares, es una colonia
plana debido a la ausencia de elevación y es de forma granular con una apariencia esponjosa.
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Figura 2.4 :Vista de la parte posterior de la caja Figura 2.5 : Vista de la parte superior de la caja Petri
Petri para la muestra de aire. para la muestra de aire.

Para la muestra de piel :

Descripción:
Se pudieron visualizar tres colonias de tamaños distintos en la muestra. Uno muy pequeño como
para lograr una descripción más detalla a parte de su color (marrón oscuro), sin elevación
(colonia plana) y su forma (circular) .
Las otras dos colonias presentan un color y forma distinta. La colonia oscura (negra con
degradados en algunas zonas en su superficie de apariencia circular ) presentaban una pequeña
elevación por lo que se clasifica como una colonia elevada y por su forma como una entera
además poseía una apariencia esponjosa siendo esta colonia similar a la descrita en la muestra
de agua de la piscina. La otra colonia era de un color blanco con un centro marrón oscuro , era
una colonia elevada forma filamentosa.

Figura 2.6 :Vista de la parte posterior de la caja Figura 2.7 : Vista de la parte superior de la caja Petri
Petri para la muestra de piel. para la muestra de piel.
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Para la muestra de vegetal :

Descripción:
Se formaron cinco colonias, cuatro de ellas eran colonias enteras mientras que la última era una
colonia granular.
Dos colonias compartían la forma circular siendo su centro negro que se degradaba a verde en
su superficie mientras que en su elevación estaban recubiertas por esporas blancas , su
diferencia radicaba en el color que presentaba alrededor de su centro siendo dos variaciones
distintas del marrón .
Las otras dos colonias enteras eran muy pequeñas pero de manera semejante a las otras dos
mencionadas estaban recubiertas por esporas blancas sin un centro de otro color aparente.
La última colonia presentaba una elevación , una forma granular y esporas en una mayor
cantidad que las otras cuatro colonias antes mencionadas.

Figura 2.8 :Vista de la parte posterior de la caja Petri Figura 2.9 : Vista de la parte superior de la caja Petri
para la muestra vegetal. para la muestra vegetal.

Para la muestra de tierra (blanca) :

Descripción:
Al menos cinco tipos de colonias visibles de forma irregulares de aspectos variados (no se logran
apreciar de forma clara), las colonias presentaban centros oscuros , blancos y marrones , algunas de
las superficies de las colonias poseían un color verde musgo y se puede afirmar que algunas eran
colonias elevadas y otras planas , proliferación de esporas tan altas que tocaban la superficie interna
de la tapa .Hay señal de humedad dentro del medio.
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Figura 2.10 :Vista de la parte posterior de la caja Petri Figura 2.11 : Vista de la parte superior de la caja
para la muestra de tierra. Petri para la muestra de tierra.

Una vez caracterizadas las distintas colonias formadas (características macroscópicas

solamente ) se procedió a separar aquellos contenedores libres de mohos y levaduras para
la realización del proceso de coloración simple.

Los recipientes que cumplían los requerimientos de seguridad (libre de mohos y levaduras)
para su manejo solo eran aquellos que contenían las muestras de piel , la muestra
orgánica(flor del paraíso) y la muestra de agua de piscina.

Por conveniencia se seleccionó una colonia diferente de cada contenedor que efectuarían
el papel de muestras a tratar con la coloración simple para su posterior observación en el
microscopio.

Muestra de piel Muestra de agua

Figura 2.12 : Colonia seleccionada (denominada Figura 2.13 : Colonia seleccionada (denominada
muestra 1) . muestra 2)
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Para la coloración simple se prepararon ambos frotis dejándolos secar para luego fijarlos con
calor para colorearlos con los colorantes de cristal violeta y safranina

Seguidamente luego del proceso de tinción se hizo uso del microscopio para observar su
estructura microscópica obteniendo los siguientes resultados:

Figura 2.14 Muestra 1 vista desde diferentes objetivos del microscopio

Descripción:

En la muestra 1 estudiada se puede observar una hifa aparentemente una hifa septada
(forma de tabique) , las hifas son una estructura fundamental en el reino fungi (reino de los
hongos) por lo que la muestra que se obtuvo era de alguna clase de hongo.

Figura 2.15 Hifas delgadas y septadas

Por razones del tiempo solamente se logró obtener un resultado de las dos muestras
preparadas.
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CONCLUSIONES
• En todos los materiales, superficies, seres vivos y elementos de la naturaleza que se
muestrearon y analizaron hay presencia de microorganismos.
• Los cultivos de microorganismos en cajas de Petry son uno de los sistemas más
importantes para la identificación y observación de las diferencias macroscópicas de
cada tipo.
• El microscopio óptico es una instrumento que ayuda a la observación microscópica de
los microorganismos para poder diferenciarlo y de esta forma caracterizarlo.
• La coloración simple con Safranina aumenta el contraste entre las células y el medio
que la rodea para que resulte más fácil su observación en el microscopio.
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CUESTIONARIO
1.- Nombre los diferentes ambientes y cuáles son las características de cada uno.

AMBIENTE CARACTERISTICAS
SUELO El suelo que se extrajo es tierra blanca extraída de un jardín, esta se inoculó
completamente seca y a la temperatura se asume del ambiente del
laboratorio, esta tiene una textura arenosa y se desconoce su pH
AGUA El agua utilizada fue agua de piscina la cual se extrajo del polideportivo de
la universidad ese mismo día, esta se conservó a temperatura ambiente y
se guardó en un recipiente plástico, no, se realizaron mediciones de pH
PIEL Las zonas en las cuales se realizado el hisopado fueron en los brazos, cuello,
piernas mejillas y lugares cerca de las fosas nasales.
VEGETAL Como muestra se utilizo una flor extraída de zonas aledañas a la facultad de
economía, esta estaba un poco húmeda, no se conoce su pH y se asume
que esta a una temperatura ambiente dado que esta expuesta al ambiente
recibe mucha aireación
AIRE Las condiciones a las cuales se inoculo el frasco Petri respecto a
temperatura se considera que fue la temperatura ambiente del laboratorio,
la muestra se colocó sobre la autoclave del laboratorio de microbiología

2.- Explique porque se utiliza agua estéril para lavar los vegetales

Debido a que se requiere estudiar los microorganismos que se encuentran en los vegetales es
necesario homogeneizar la carga microbiana lavando los vegetales con agua estéril y dado que se
requieren únicamente los microorganismos presentes en ellas, si utilizáramos agua común se
corre el riesgo de añadir microorganismos a la muestra que se desea estudiar. Una vez que se ha
lavado la muestra es necesario.

3.-¿De qué tipo de microorganismos principalmente están formado la población microbiana

del medio ambiente?

De hongos, levaduras , mohos , virus , bacterias, parásitos.

4.- ¿Cuál es la razón de que predomine ese tipo de organismos?

Debido a su tamaño que les permite ser trasladados de un lugar a otro con suma facilidad
por el viento, agua u otros organismos .Por su capacidad de mutar y adaptarse a otros
ecosistemas , por su gran velocidad de reproducción así como el intercambio de genes con
otros microorganismos ❨transferencia horizontal de genes ❩ y su increíble resistencia
ante el estrés , debido a que son capaces de vivir inactivos durante prolongados
periodos de tiempo en un estado latente o en forma de esporas.

5.- ¿Cómo interpreta usted, la variedad de colonias obtenidas?

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Que los resultados obtenidos están acorde con la realidad que se intentaba retratar. En el
medio ambiente existe una gran cantidad de microorganismos que pueden y no pueden ser
de la misma familia por lo que la diversidad ❨especialmente como se pudo notar en la
muestra de suelo blanco❩ es una constante segura .Mientras que las muestras de piel
y de agua de piscina no mostraban una diversidad tan grande, es compresible
debido a que son ambientes difíciles de vivir y no todas las bacterias pueden
desarrollarse caso contrario la muestra orgánica que mostraba signos de diversidad.

6.¿De qué procede cada colonia formada?

Cada colonia se forma a partir de la reproducción de una Unidad Formadora de Colonia. Estas
UFC puede ser un solo microorganismo o bien un grupo de microorganismos de una misma
especie.

7.¿Por qué utilizó hisopos estériles para tomar sus muestras?

Se han utilizado hisopos estériles debido a que es un método muy efectivo y práctico para
colectar las muestras sin ser contaminadas y hacer el extendido de los microorganismos en
el PDA de forma inmediata.

8.¿Por qué las placas de Petri se incuban con la tapa hacia abajo?

Para evitar la evaporación y que el agua de condensación caiga sobre el medio. Si la placa de
Petri no es invertida los microorganismos no podrán colonizar el agar apropiadamente, lo
que evitara que crezcan y formen colonias adecuadamente, o estimulara el crecimiento de
otros microorganismos.

9.¿Cuál es la razón de hacer preparaciones para observar al microscopio de las diferentes

colonias? Para observar la morfología de los hongos y distintas colonias presentes dado que también
podemos encontrar otros microorganismos como levaduras otra razón por la cual se hace comparar
lo que se observa a nivel macro y ver si realmente las predicciones realizadas a través de la
observación sin microscopio resultan congruentes una vez que se esta analizando.

10.De las diferentes colonias observadas cuales puede identificar el tipo de organismos sin
necesidad de hacer la preparación microscópica.

Los organismos identificados a simple vista son los hongos; estos crecen en formas de
filamentos, es decir poseen un micelio vegetativo aéreo el cual facilita su identificación.
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BIBLIOGRAFIA
Blasco Lamenca, B. (1970). MICROBIOLOGIA DE SUERLOS cursos. turrialba, Costa Rica : instituto
interamericano de ciencias agricolas.

J.Glunn, H. y. (1999). INGENIERIA AMBIENTAL (Segunda ed.). Mexico D.F, Mexico : Pearson
Education.

P. Garcia, m., & barrio, M. F. (1997). MICROBIOLOGIA APLICADA (tercera ed.). Madrid, España:
Díaz deSantos S.A.

Tortora, Funke, & Case. (2007). Introducción a la microbiología (Novena ed.). Bogotá, Colombia:
panamericana.
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