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Guia de Biologia 2016-1 PDF
Guia de Biologia 2016-1 PDF
FACULTAD DE CIENCIAS
MANUAL DE PRACTICAS
L A B O R A T O R I O DE
BIOLOGÍA
CH 061
21 marzo
1 Presentación del CURSO (Teoría y Práctica)
29, 31 marzo
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
Para logra tales fines, se propone esta guía que, como material de apoyo didáctico, reforzara el
proceso constante de enseñanza aprendizaje, requiriendo la participación y guía del profesor.
INSTRUCCIONES GENERALES.
1. Busca conceptos, antecedentes previos a la realización de las prácticas.
2. Construye la hipótesis de trabajo, antes de solicitar su material.
3. Lee cuidadosamente los experimentos antes de ejecutarlos.
4. Recurre a tus libros de texto y/o consulta para aclarar dudas después de realizadas las
practicas, o consulta al profesor responsable.
5. Al efectuar cada uno de los pasos del desarrollo experimental, observa minuciosamente
y anota los cambios ocurridos.
6. Al concluir el desarrollo experimental, resuelve el cuestionario para su futura revisión.
7. Elabora tus conclusiones.
Las medidas oportunas y la compresión de las prácticas a seguir, hará del laboratorio un
lugar seguro como cualquier ambiente de clases.
Para ello deberán tenerse en cuenta, en forma general las siguientes precauciones:
1. Observa donde dejas el material caliente, cerciorándote que este frio antes de tomarlo
con la mano.
2. Cuando calientes un tubo de ensayo, no lo apuntes hacia ti o hacia tus compañeros,
pude proyectarse su contenido.
3. Si cae sobre ti o en tu ropa un material corrosivo, lávate inmediatamente con
abundante agua, e infórmalo al profesor del curso.
4. Nunca pruebes una sustancia.
5. Al detectar el olor de un líquido, no coloques la cara sobre la boca del recipiente, con
tu mano abanica hacia ti el aroma.
6. Antes de usar un reactivo lee dos veces la etiqueta de su contenido.
7. Los tubos de ensayo no pueden calentar ser por el fondo sino por las paredes, para
evitar su expulsión del contenido.
8. No arrojes cuerpos sólidos en los lavaderos, no viertas directamente los ácidos.
9. Rotula tu material de trabajo, así te será fácil identificarlos.
10. Cuando trabajes con el mechero mantén tu cabello recogido.
11. Nunca emplear papel para encender el mechero.
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
I. Resumen (1 p)
¿Qué teorías lo sustentan? En relación al desarrollo de los experimentos.
V. Conclusiones (2 p)
¿Qué significan los resultados?
Las conclusiones están relacionadas con los objetivos.
Es el análisis del cumplimiento de cada uno de los objetivos de la práctica
Libro:
Autor(es). Año. Libro. Editorial, Edición. Páginas
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
GUIA DE LABORATORIO Nº 1
RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
INTRODUCCIÓN
Se ha dicho que es suficiente reconocer cerca de 30 moléculas para tener un conocimiento que
permita trabajar con la bioquímica de las células. Dos de esas moléculas son los azúcares
glucosa y ribosa; otra, un lípido; otras veinte, los aminoácidos biológicamente importantes; y
cinco las bases nitrogenadas, moléculas que contienen nitrógeno y son constituyentes claves
de los nucleótidos.
En esencia, la química de los organismos vivos es la química de los compuestos que contienen
carbono, es decir, los compuestos orgánicos.
El carbono es singularmente adecuado para este papel central, por el hecho de que es el
átomo más liviano capaz de formar múltiples enlaces covalentes. A raíz de esta capacidad, el
carbono puede combinarse con otros átomos de carbono y con átomos distintos para formar
una gran variedad de cadenas fuertes y estables y de compuestos con forma de anillo. Las
moléculas orgánicas derivan sus configuraciones tridimensionales primordialmente de sus
esqueletos de carbono. Sin embargo, muchas de sus propiedades específicas dependen de
grupos funcionales. Una característica general de todos los compuestos orgánicos es que
liberan energía cuando se oxidan. Entre los tipos principales de moléculas orgánicas
importantes en los sistemas vivos están los carbohidratos, los lípidos, las proteínas y los
nucleótidos.
OBJETIVOS
MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo, mechero, placas petri, vasos de precipitado, gradillas, pipetas graduadas,
propipetas, pinzas de madera, pisceta, almidón.
Reactivo de Fehling, solución de azucares, solución de almidón, acetona, cloroformo, sulfato de
cobre, hidróxido de sodio
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
Los monosacáridos (figura 1) y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, que
deben al grupo carbonilo que tienen en su molécula. Este carácter reductor puede ponerse de
manifiesto por medio de una reacción redox, llevada a cabo entre ellos y el sulfato de cobre (II).
Tras la reacción con el glúcido reductor se forma óxido de cobre (I) de color rojo. De este modo
el cambio de color indica que se ha producido la reacción y que el glúcido presente es reductor.
Reacción de Fehling:
Es una reacción cualitativa que sirve para determinar la presencia de un azúcar reductor que
no sea sacarosa (carece de carbono anomérico y no es azúcar reductor).
El reactivo de Fehling presenta sulfato de cobre, carbonato de sodio, citrato de sodio, y agua.
En la reacción para determinar a los azucares reductores los agentes estabilizantes de la
reacción son el carbonato y citrato, el sulfato de cobre es el reactante específicamente el Cu
que va a reaccionar con los grupos químicos de aldehídos y cetonas. Que en reacciones de
oxido reducción el Cu se convierte en CuO dando un color rojo ladrillo que precipitará
posteriormente, como lo expresa la siguiente reacción (figura 2):
PROCEDIMIENTO
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
TUBO DE ENSAYO
COMPONENTES
1 2 3 4
1.Solución de glucosa 1% 1 ml
2.Solución de lactosa 1% 1ml
3.Solución de fructuosa 1% 1 ml
4.Solución de sacarosa 1% 1 ml
Reactivo de Fehling A 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
mezclar
Reactivo de Fehling B 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
mezclar
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
Figura N° 3. Sacarosa
PROCEDIMIENTO
- Mezclar por inversión el reactivo con cada uno de sus componentes, ver la tabla 3.
- Someter a la acción del calor hasta ebullición
Muestra
COMPONENTES
sacarosa
Solución de sacarosa 0.5% 2 ml
Ácido clorhídrico HCl 1M 1 ml
Calentar por baño maría 1´ ó 5’
Enfriar
Hidróxido de sodio NaOH 1M 1 ml
Reactivo de Fehling A 1 ml
Reactivo de Fehling B 1 ml
baño maría
Calor por ebullición
1 minuto
- La reacción será positiva si en la muestra se forma un precipitado color rojo ladrillo
(CH2O), será negativa, si la hidrólisis no se ha realizado correctamente, apareciendo
una coloración verde en el tubo de ensayo.
PROCEDIMIENTO
TUBO DE ENSAYO
COMPONENTES
1 2 3
Solución de almidón 2% 1 ml
Papa rallada 1 gr
Albúmina 1 ml
Reactivo de Lugol 3 gotas 3 gotas 3 gotas
- Mezclar por inversión y anotar los resultados, será positivo si se torna azul, violáceo.
- Calentar suavemente, sin que llegue a hervir, hasta que pierda el color.
- Enfriar el tubo de ensayo en agua fría, observar como a los 2-3 minutos reaparece el
color azul. //… ANOTAR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
Las proteínas son macromoléculas formadas por la unión de muchos aminoácidos (figura 6) por
enlace peptídico (estructura primaria). Además pueden darse uniones por enlaces débiles de
distinta naturaleza que hacen que la proteína adquiera una conformación tridimensional
característica (estructura terciaria) ver la figura 7. Las variaciones de pH, temperatura o
concentración salina pueden destruir esos enlaces débiles de manera que la proteína pierde
su conformación y se dice que se desnaturaliza.
Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones
coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas
superiores a 70°C o al ser tratadas con soluciones salinas, acidas, alcoholes, etc.
Una de las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven para su
identificación, cabe resaltar la reacción de Biuret (figura 8). Esta reacción los producen los
péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ello se debe a la presencia del enlace
peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos
Se debe a los componentes que presenta: el hidróxido de sodio y sulfato de cobre (II); el cual el
agente denaturante de las proteínas es el hidróxido y el reactante es el sulfato de cobre. Las
proteínas después de ser denaturadas facilitan la interacción del Cu con los pares de
electrones sin compartir del grupo amino del péptido mediante enlaces de coordinación con la
formación de un complejo coloreado púrpura – violáceo, cuya intensidad depende de la
concentración de proteínas.
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PROCEDIMIENTO
TUBO DE ENSAYO
COMPONENTES
1 2 3
Albúmina (huevo) 1 ml
Caseína (lácteo) 1 ml
Sol. almidón 1 ml
- Observe la formación del color violeta en los tubos que presentan proteínas, siendo
Biuret (+), de no haber un cambio de color será Biuret (-).
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FUNDAMENTO
Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en
pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso que es transitoria, pues al
dejarlo en reposo desaparece por la reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por
su menor densidad se sitúa sobre el agua. Las grasas son solubles en disolventes orgánicos.
PROCEDIMIENTO
TUBO DE ENSAYO
COMPONENTES
1 2 3
Aceite 1 ml 1 ml 1 ml
Agregar por las paredes del tubo cada componente:
Agua destilada 2 ml
Acetona 2 ml
Cloroformo 2 ml
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RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
Prueba de
Nombre del alumno Informe Desempeño Nota
entrada
(Apellidos, Nombre) (15 p) (-) (20)
(5 p)
1 Resumen (1p)
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1.
2.
3.
4.
5.
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Reductor
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Muestra SI NO
Hidroliza
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
¿Almidones?
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
Proteínas
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
5. Conclusiones (2.5 p)
1.
2.
3.
4.
5.
6. Cuestionario y referencias (2 p)
a. ¿Qué azúcares son reductores?
b. En el experimento 2: reconocimiento del almidón, al trabajar con el lugol ¿Por qué se da
el cambio de coloración después de sometido al calor? Fundamente su respuesta.
c. ¿Cuáles son los factores que afectan la naturaleza de las proteínas?
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Cuestionario (2 p)
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ANEXO 1
PREPARACION DE REACTIVOS
LABORATORIO: RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
b. Solución de almidón al 2%
Se pesa 2 gramos de almidón y se disuelve en 100 ml de agua destilada caliente y en
agitación constante.
c. Hidróxido de sodio al 5%
Se pesa 5 gramos de NaOH y se disuelve en 100 ml de agua destilada.
d. Reactivo de Fehling
Solución A: solución al 3% de sulfato cúprico cristalizado
Pesar 30 g de sulfato cúprico Cu2SO4 y aforar en un litro con agua
destilada
Solución B: solución al 15% de sal de Rochelle (tartrato de sodio y potasio) en
solución acuosa al 5% de hidróxido de sodio NaOH.
Preparar un litro de hidróxido de sodio al 5% (50 grs en 1 L) y adicionarle
150 g de tartrato de sodio y potasio
f. Reactivo de Biuret
Solución A: 17.3 g de sulfato de cobre Cu2SO4 en 100 de agua destilada caliente
Solución B: 17.3 g de citrato sódico Na2CO3y 100 g de bicarbonato de sodio anhidro
NaHCO3 en 800 ml de agua destilada caliente.
Se mezclan ambas soluciones, se enrazan a un litro y se ponen en un matraz cubierto
para evitar la acción de la luz. El reactivo se guarda en un frasco color ámbar.
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Fecha
Recuerde que el PREINFORME debe de entregarlo de manera individual, el día de realización del laboratorio,
escrita a mano, se presenta en hojas A4 bond, Nota máxima de 4 puntos
Ejemplo:
A
Se indica el proceso (…Se adiciona… se separa)
2. Cuestionario:
- ¿Qué es código genético?
- ¿Cuántos genes tiene el hombre?
- Presente un diagrama de flujo de la extracción de ADN en una de las siguientes
muestras: en cabellos, sangre, tejido óseo,
- ¿Cómo se puede preservar el ADN después de haberlo extraído?
- ¿Cuál es la diferencia de extraer ADN animal, vegetal y bacteriano? (señalarlas)
- Elabore el diagrama de flujo del procedimiento de la extracción de ADN vegetal
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Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2016-I
GUIA DE LABORATORIO Nº 2
En las plantas, los animales y los hongos, el ADN se encuentra mayormente en el núcleo de las
células. Para extraer el ADN de las células vegetales hay que romper la fuerte pared celular
exterior, emulsionar los lípidos de la membrana plasmática y la envoltura nuclear.
La extracción del ADN celular es una etapa clave en muchos procedimientos de biología
molecular y aplicaciones de ingeniería genética. El método varía dependiendo de la célula o
tejido desde donde se necesita extraer el DNA, sin embargo, cualquier protocolo tiene las
siguientes etapas básicas:
Primero las células deben ser homogenizadas, lisadas (rotas) para liberar el núcleo (si está
presente). El núcleo también debe ser roto para liberar el DNA. En este punto el DNA debe ser
protegido de enzimas que podrían degradarlo (nucleasas). Una vez que el DNA es liberado.
Debe ser precipitado con alcohol (etanol) para purificarlo y concentrarlo. Dependiendo de las
aplicaciones posteriores, puede ser necesario someter el DNA a etapas de purificación
adicionales. Usualmente el DNA extraído se analiza mediante electroforesis en geles de
agarosa y/o espectrometría UV.
OBJETIVOS
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MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo, agua mineral, palillo, vasos desechables, pipeta de 10 ml, bagueta,
propipeta, gradilla de madera, tubos eppendorf, NaCl 6%, alcohol de 96° muy frio, alcohol de
70, detergente/shampu, una probeta.
Por persona: vasos desechables, cucharitas de plástico, agua mineral, alcohol de 96°,
alcohol de 70°, (100ml), muestra biológica: epitelio bucal
Por grupo: alcohol de 96°, alcohol de 70°, (100ml)
FUNDAMENTO
El ADN se encuentra en el interior del núcleo celular, disperso y replegado, unido a proteínas
para formar la cromatina. Para extraerlo es necesario homogenizar el tejido y romper las
células para separar el núcleo, al lograrlo se libera el ADN, se debe separar de las proteínas y
precipitarlo para extraerlo de la solución. Se visualizara como un agregado de fibras
blanquecinas que se podrán adherir a una varilla de vidrio.
PROCEDIMIENTO
Preparar un tubo de ensayo con alcohol etílico de 96° por cada alumno y poner a enfriar lo
máximo que sea posible (p.e. en baño de agua con hielo, mientras se realizan los pasos
siguientes.
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Pre
Nombre del alumno Test Reporte Desempeño Nota
informe
(Apellidos, Nombre) (4p) (12 p) (-) (20)
(4 p)
1. Resumen (1p)
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5. Conclusiones (2 p)
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6. Cuestionario y referencias (2 p)
a. Explique, cómo se puede determinar la concentración del ADN.
b. ¿Cuál es la importancia de estudiar el ADN en muestras arqueológicas?
Y en la actualidad?
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Fecha
Recuerde que el PREINFORME debe de entregarlo de manera individual, el día de realización del laboratorio,
escrita a mano, se presenta en hojas A4 bond, Nota máxima de 4 puntos
Ejemplo:
A
Se indica el proceso (…Se adiciona… se separa)
2 Cuestionario:
a. ¿Qué es un grupo sanguíneo?
b. ¿Qué es el factor Rh? ¿De dónde proviene?
c. ¿Cómo se da reacción para identificar un grupo sanguíneo?
d. ¿Cuál es la importancia del grupo sanguíneo en el trasplante de órganos?
e. ¿Que es coagulación? Que es aglutinación?
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GUIA DE LABORATORIO Nº 3
INTRODUCCIÓN
Los glóbulos rojos o hematíes son células sanguíneas, por lo tanto todos los tenemos. Sin
embargo, en la membrana de los glóbulos rojos pueden existir unas proteínas especiales: son
las glucoproteínas A y B. Así, un glóbulo rojo puede tener proteína A, proteína B, tener ambas
o no tener ninguna. De manera que un individuo tendrá grupo sanguíneo A si sus glóbulos
rojos tienen la glucoproteína A en su membrana, siguiendo el mismo criterio para el resto de los
grupos (si no existe proteína, entonces será de grupo sanguíneo O). Estas proteínas
corresponderían a lo que denominan antígenos.
Así,
- Los individuos A tendrán anticuerpos anti-B
- Los individuos B tendrán anticuerpos anti-A
- Los individuos AB no tendrán anticuerpos de este tipo
- Los individuos O tienen los dos tipos de anticuerpos.
Grupo sanguíneo A B AB O
Glóbulos rojos
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OBJETIVOS
Determinar el grupo sanguíneo.
Presenciar la técnica, observar la aglutinación de los hematíes e interpretar dicha
técnica.
MATERIALES Y REACTIVOS
Portaobjetos, lanceta (material punzocortante estéril), alcohol 96°C, algodón, agua oxigenada,
palillos mezcladores.
PROCEDIMIENTO
1. Divide el portaobjetos en tres secciones con el rotulador de vidrio. Marca en una casilla
la letra A, en otra la letra B y en la última D.
Hazlo con letra pequeña en cada esquina de cada sección.
2. Deposita una gota de suero anti-A en la casilla con la letra A; (Intenta poner éstas gotas
en la parte superior de cada casilla) otra gota del suero anti-B en la casilla B; Por
último, en la casilla D colocar una gota del suero Anti-D
3. Con ayuda del agua oxigenada y el algodón desinfecta la yema del dedo que vayas a
hincar. Coge el material punzante previamente desinfectado e hinca el dedo. Aprieta la
yema del dedo hasta que haya una gota de tamaño similar a la que has echado antes
de anti-suero.
4. Sitúa una gota de sangre en cada sección del porta, justo debajo de la gota de
antisuero (sino tiene sitio colóquela a un lado, pero de forma que no se junten las dos
gotas)
Con un palillo mezclar las dos gotas de cada sección utilizando un palillo distinto cada
vez y formando un círculo de 2 a 2,5 cm de diámetro. Es muy importante utilizar un
palillo distinto cada vez, ya que si no, nos dará falsos resultados.
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Pre
Nombre del alumno Test Reporte Desempeño Nota
informe
(Apellidos, Nombre) (4p) (12 p) (-) (20)
(4 p)
1. Resumen (1p)
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2. Objetivos específicos (2 p)
AGLUTINACIÓN
A B D
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
*Indicar: reacción positiva +: hay aglutinación
reacción negativa -: no hay aglutinación
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5. Conclusiones (2 p)
6. Cuestionario (2 p)
a. ¿Qué es un antígeno?
b. ¿Qué es un anticuerpo?
c. ¿En qué consiste una reacción antígeno-anticuerpo?
d. ¿Cúal es el grupo donante universal? ¿Por qué?
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TEMA PENDIENTE
Fecha
GUIA DE LABORATORIO Nº 4
TEMA PENDIENTE
TEMA PENDIENTE
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La presentación del análisis del artículo: en un folder entregarán la versión impresa del
artículo y su respectivo análisis (este último con las páginas numeradas, márgenes
preestablecidos). Tendrá los siguientes ítems:
1. TITULO
2. Justificación del artículo:
¿Por qué realizaron esa investigación?, ¿Cuál es el propósito de la investigación? ¿que
buscaban?
3. Objetivos: “que se plantean en el artículo, es la importancia y relevancia de la
investigación”
4. Metodología en diagramas de flujo*:
Realizar el proceso secuencial de la metodología.
* Para el caso de las especialidades de Ciencias de la Computación y Matemática es
posible que este sistema no sea apropiado, así que se deja a su criterio interpretación.
* Para un mejor entendimiento, de ser el caso deberá explicar términos, análisis y
procesos mencionados en el articulo
5. Análisis e interpretación de los resultados del artículo:
¿Cuáles fueron los resultados del artículo?
¿Cumplieron los objetivos establecidos al inicio de la investigación?
El análisis debe expresarse a través de un lenguaje claro
6. Conclusión del articulo
7. APRECIACION PERSONAL: Indicar
¿Por qué selecciono ese artículo?
¿Cuál es el aporte a la Biología?
¿Existe estudios iguales, cercanos o similares en nuestro país?
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