Extracción y reconocimiento de ADN y ARN en el laboratorio

Resumen
En la práctica se realizó una identificación de ADN animal, en este caso se utilizó
sangre de ser humano hembra, y vegetal, donde se utilizó hojas de Geranio y pedazos de
Apio. Se tuvo que realizar diferentes fases en cada una de las extracciones para poder llegar a
observar el ADN de cada una de las muestras.

Summary
In practice, an identification of animal DNA was made, in this case blood was used
from a human being, and vegetable, where Geraneo leaves and pieces of Celery were used.
Different phases had to be carried out in each of the extractions in order to be able to observe
the DNA of each of the samples.
Palabras clave: Extracción, ADN, vegetal, animal, glóbulos.
Keywords: Extraction, DNA, plant, animal, globules.

Introducción dicho ADN se conforma por elementos

Hoy, como muchos saben la historia del
ADN abarca años desde que se descubrió
el ácido desoxirribonucleico, se consideró
uno de los avances científicos más grandes
de la historia del siglo XX, y no es de
menos ya que este avanza nos mostró que
en cada ser vivo esta, y por consiguiente es
la base esencial para la vida. Desde que
James Watson Francis Crick propusieron el
modelo de doble hélice de ADN para
representar su forma tridimensional
ocurrieron muchos fenómenos que
anteriormente no se podían explicar, se
comenzó hacer nuevos hallazgos en la
ingeniería química, esto supuso una de las
mayores revoluciones de la historia de la
humanidad. El clímax para este gran
descubrimiento llego cuando se logró la
decodificación del genoma humano,
gracias a esto se han hallado nuevas
ventanas de como funciona los genes que
los humanos tienen.
Actualmente los avances científicos acerca
del ADN han llegado a nivele fascinantes
en la historia, hoy en día sabemos que
como bases nitrogenadas como lo es la
guanina, citosina, timina y adenina y que
son la base fundamental de dicho ADN.
Otra de sus avances significativos ha sido
la descendencia genética, hoy en día es
fácil saber cuál es nuestra árbol genético,
¿Quién es nuestra descendencia?, ¿Quiénes
fueron mis ancestros?, ¿Quiénes son mis
padres?, etc…, ahora hay respuesta para
todo esto, gracias a esta pequeña secuencia
en forma de escalera de caracol, que
muchos creen que este es el octavo día de
la creación del hombre, llamado acido
desoxirribonucleico o abreviando ADN.
Materiales y métodos
En la clase de laboratorio de biología, se
utilizaron diversos material tanto solidos
(instrumentos) como líquidos (sustancias),
se utilizaron como base central, muestras
de sangre humana que estaban en tubos de
anticoagulante, luego de esto se empleó
una micropipeta unida a una punta azul
para extraer la sangre, solo se debe extraer
300 microlitros en un tubo de centrifuga,
cuando se termine de depositar la muestra

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se le agrega 900 microlitros de lisis 1, se
agita 5 veses y con ayuda de las manos se
comienza a calentar durante 7 minutos,
luego se lleva a la centrifuga durante 15
minutos a 1200 rpm. Cuando termine el
proceso se comienza a quita lo que más
pueda las impurezas para dejar el pellet
que esta precipitado en el tubo, para esto se
utiliza la micropipeta, luego se pone a dar
vortex por 10 minutos. Luego de haber
culminado se le agrega lisis 2 y se pone en
la centrifuga, al final queda un precipitado
en forma de algodón, es el ADN.

El siguiente experimento para conocer el

ADN vegetal. Primero se elige un tipo de
hoja de cualquier planta, se aconseja hoja
corazonada, se corta en pedazos más
pequeños y se llevan a un mortero con
pistilo para machacarlas y sacar la
sustancia que contiene, para facilítalo se
agrega agua destilada. Después de haber
sacado la mayor parte del sustractor se le
agrega nitrógeno líquido a menos 80
grados centígrados, se machaca y se deja
reposar. Al culminar con esta parte se
utiliza la micropipeta y se extrae 300
microlitros del jugo de la planta, se
deposita en un tubo de centrifugado, al
depositar se le agrega 900 microlitros de
proteína K. luego se pone en una maquina
a baño seco durante dos tiempos; el
primero es de 10 minutos a una
temperatura de 37 grados, la segunda es de
10 minutos a una temperatura de 56 grados
centígrados. Al terminar se lleva a la
centrifuga por 5 minutos y al final se
observa unas motitas parecidas a un
algodón, es el ADN.

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 Resultados Imagen

Se toma 300 micro Litros de sangre con la micro

pipeta, poniendo la muestra en los tubos de
espendor, posteriormente se le agrega lisis.
El lisis romperá la membrana celular, ya que
posee componentes como el EDTA (que lo hace
detergente) y el THS (Elimina las proteínas y
lípidos). Figura 1
Se calienta la muestra con la mano 10 min. Aquí
se observa la separación del plasma sanguíneo de
los glóbulos rojos

Figura 2

Se pone a centrifugar a 1200 revoluciones x min.

Aquí podremos observar el Pelet (Glóbulos
blancos) y una solución acuosa que después sera
ADN

removida para dejar el pelet solo

Figura 3

Lo que quedo del Pelet se pone en el Vortex.

Después de esto observamos el desprendimiento
del Pelet.
Posteriormente agregando lisis 2, donde se
precipita la proteína y se limpia la célula de
proteína.

Figura 4
Después se le agrega isopropanol lo que ocasiona
la precipitación del ADN.
Después de centrifugar, se ve la presencia de
motas en el ADN

figura 5

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 Se macera apio en el mortero, se le agrega agua
destilada y nitrógeno líquido, que cristalizara la
pared celular

Figura 6
Se toma 300 micro Litros y se le agrega protina k,
que este caso rompería la pared celular.
Se pone 10min a centrifugar.
Muestra Vegetal

Podemos observar que se precipita la clorofila y

queda en la parte de abajo. En este caso las
muestras vegetales no tienen Pelet en las células.

Figura 8

Análisis de resultados Vortex para que el Pelet se desprenda.

Para la extracción de ADN animal
se inició con centrifugación durante 15
minutos, en este procedimiento se rompe el
plasma sanguíneo de los glóbulos rojos y
los restos celulares son eliminados por la
centrifugación, la lisis (Detergente) es
utilizada para romper la membrana celular.
Por otro lado el T&S (sales) + HCl (ácido
clorhídrico) es utilizado para eliminar
proteínas, lípidos y carbohidratos.
(Labome , 2018)
Se evidencia el Pelet (unión visible
de glóbulos blancos formando una esfera)
y solución acuosa, se da lugar a remover la
solución acuosa para dejar solo el Pelet, se
introduce lo que queda de muestra al
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Además, se le agrega Lisis II para la
precipitación y limpieza de proteínas. Por
último se mezcla el Pelet con la solución y
se evidencia una muestra pequeña de ADN
como si fuera algodón.
Por otro lado, pata la extracción de
ADN vegetal, se utilizó hojas de Geraneo y
trozos de apio con agua destilada para
luego ser macerados, se agregó nitrógeno
líquido el cual cumple la función de
cristalizar la pared celular. Luego se utilizó
proteinasa K, se pone la muestra a 37
grados centígrados, luego, se aumenta a 57
grados centígrados para acelerar la
reacción en el baño seco. (Rojas, 2018).
 Siguiendo con el procedimiento, se
introduce la muestra vegetal a centrifugar
con el fin de separarla, ocurrió que la
clorofila se precipito y queda debajo de la
muestra, cabe resaltar que en la muestra
vegetal no se evidencia Pelet, pero se
observan pequeñas partículas de ADN de
color blanco.

Conclusiones

 Se observó que tanto la sangre

humana como el líquido de las
hojas de jaraneo, quedaban al final
solidos pequeños de color blanco lo
que nos da a entender que el ADN
no varía de lo físico sino de lo
químico.
 En la realización de los
experimento, para extraer el ADN
de las plantas se necesitaba utilizar
más variedad de sustancias para
poder romper la pared celular y
extraer el ADN, a diferencia de la
sangre.
 El pellet que queda precipitado en
el tubo de centrifugado son
glóbulos blancos, ya que estos
poseen núcleo, a diferencia de los
glóbulos rojos que son a nucleados
y no sirven para la extracción de
ADN.
Bibliografía

Labome . (24 de mayo de 2018). Recuperado

el 11 de mayo de 2019, de the world
of laboratories

Rojas, A. (22 de febrero de 2018). Conogasi .

Recuperado el 12 de mayo de 2019,
de Extraccion de ADN

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