IDENTIFICACION DE MICORRIZAS EN EL LABORATORIO

INTRODUCCION
Las micorrizas son asociaciones entre la mayoría de las plantas existentes y los
hongos benéficos, que incrementan el volumen de la raíz y, por tanto, permiten
una mayor exploración de la rizosfera. Son considerados los componentes más
activos de los órganos de absorción de los nutrientes de la planta, la que a su vez
provee al hongo simbionte de nutrientes orgánicos y de un nicho protector
La mayoría de las plantas terrestres establecen en sus raíces al menos uno de los
tres tipos de asociaciones micorrízicas; de ellas, la del tipo arbuscular es la
simbiosis más extendida sobre el Planeta, no solo por el número de plantas
hospederas que son capaces de colonizar, sino también por su amplia distribución
geográfica. Su nombre está asociado con estructuras especializadas denominadas
arbúsculos, que se forman en las células corticales de la raíz como resultado de la
interacción planta-hongo. Estas estructuras constituyen el punto de intercambio de
metabolitos entre los dos participantes de la simbiosis (Noda, 2009).
 IDENTIFICACION DE MICRORRIZAS EN EL LABORATORIO
Metodología

Raices
se deben recolectar las raices y
los pelos absorbentes de las
plantas a estudiar,
seleccionandolas al azar. Concervar las muetras por
Muestreo separado en bolsas concierre
hermetico y rotuladas. para su
Suelos transpote al laboratorio
Tomar muestras del suelo
rizoferico influenciado por las
raices, aporximadamente 100 g

Procesamiento
RAÍCES
Luego para el procesamiento en el laboratorio las raíces se lavan con suficiente
agua, y posteriormente se almacenan a una temperatura de 4°C para su
conservación.
Tinción de las raíces
1. Sumergir en KOH al 10% y calentar a 90°C por 1 hora.
2. Si las raíces a procesar contienen muchos taninos, es necesario realizar un
paso adicional de clareo agregándolas en una solución de KOH 10% mas
H2O2 10% v/v hasta que se aclaren.
3. Lavar con agua.
4. Acidificar con HCl 1% por 15 minutos
5. Teñir con azul de tripano al 0.05% a 90°C por 10 minutos.
6. Retirar el colorante lavando con agua, luego, dejar reposar toda la noche en
lactoglicerol puro.
7. Listas para montar al microscopio en laminas.
Figura 1. Proceso de tinción de raíces (León, 2006)
https://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis296.pdf

SUELOS
Para realizar el aislamiento de las esporas del suelo muestreado, se hace por la
técnica de tamizado húmedo y decantado.
Aislamiento de esporas
1. Pesar 10g del suelo rizosferico recolectado y dejar en remojo durante 30
minutos.
2. Agitar fuertemente, hasta homogenizar completamente, luego verter sobre
los tamices del mayor al menor tamaño de poros.55
3. Recolectar la fracción mas fina en tubos de centrifugas y adicionar sacarosa
al 50%
4. Centrifugar a 3000 revoluciones durante 10 minutos
5. Verter el sobrenadante sobre el tamiz más fino, y lavar con abundante agua
para retirar la glucosa.
6. Lo recolectado en el tamiz adicionarlo en una caja de petri para su posterior
observación y conteo.
Figura 2. Aislamiento de esporas (León, 2006).
https://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis296.pdf
BIBLIOGRAFIA
1. Noda, Y. (2009). Las Micorrizas: Una alternativa de fertilización ecológica
en los pastos. Pastos y Forrajes, 32(2), 1-1.

2. León Velandia, D. (2006). Evaluación y caracterización de micorrizas

arbusculares asociadas a yuca (manihot esculenta sp) en dos regíones de
la Amazonía colombiana (Bachelor's thesis, Facultad de Ciencias).

3. Giménez Bru, S. (2018). Diverse arbuscular mycorrhizal fungal species

colonize roots of important agricultural crops (Pequin pepper, soybean and
orange) in the northeast Mexico as revealed by Illumina Mi-Seq sequencing.