TECNICA DE LABORATORIO METODOS DE DIAGNOSTICO MICROSCOPICO, DE LA AMEBIASIS Por Victor M. Avuto Rostes Departamento de Bacteriologia © Inmunologia Instituto Nacional de Higiene y Salud Piblica. Los diagnésticos de laboratorio sobre Ja infeccién amebiana en nues- tro pais no son del todo satisfactorios debido, principalmente, a la falta de personal entrenado cuidadosamente en esta clase de trabajo. Siesta falta de personal entrenado se hace ostensible en paises co- mo Estados Unidos, segiin Jo ponen de manifiesto Wilfred H. Kellog y Elizabeth A, Scott, en su articulo titulade: “The laboratcry diagnosis of amebiasis” y como lo expresa también Dobell, se hace mucho mas osten- sible entre nosotros, ya que, se ve con gran frecuencia hacer diagnésti- cos de Entamoeba histolytica frente a una deposicion muco-sanguinolen- ta pioveniente de un sindrome disenteriforme, en el que, en realidad el agente causal no es la Entamoeba histolytica, sino un bacilo disentérico © una salmonella, Ahora bien, jlos cttadzos de disenteria producidos por Ja Entamoeba histelytica son frecuentes entre nosotxos? La pregunta que nos formulamos, hace tres afios ha servido de pau- ta a este trabajo, que tiene como tinica finalidad, la de poder dar a quie- nes se interesen, ciertcs datos que creémos son de gran utilidad para le- gar a un diagndstico seguro. Muchas veces en una muestra de heces se encuentran parasitos que por una wotra razén, no es posible identificar en fresco; en estos casos, mas vale no emitir concepto que aventusarse a darle un nombre al azar. Si una muestia de heces es dudosa, debe practicarse un nuevo exa- men sobre una segunda, y si es posible sobre una tercera muestra, para ratificar o rectificar el resultado del primer examen El hecho de que una muestra sea negativa, no nos autoriza para ase- gurar que el sujeto no es portador de parasitos, ya que muchos de éstos aparecen en las heces en ciclos irregulares, en consecuencia, una mues-178 REVISTA DE MEDICINA EXPERIMENTAL, tra negativa en un primer examen, puede ser positiva en el segunde o ter cero, por lo cual, es recomendable cuando se sospecha la existencia de parasitos intestinales en un sujeto, practicar exdmenes periddices. El examen en fresco debe ser completado con el examen por colo- racién, por cuanta éste nos permitira Hegar a la identificacién de varios protozons intestinales, por el reconocimiento de sus diferentes estructu- ras citolégicas. Si en el examen en fresco hubo una duda sobre si se trata de tal o cual parasito, el examen por coloracién nos permitira, es~ tablecer el diagnéstico seguro del parasito en cuestién. Al lado del examen en fresco y por coloracién, el cultive presta gran ayuda en la identificacion de ciertos parasitos, porque como pueden ser estos muy escasos, al no ser vistos en el examen en fresco, lo mismo que en el examen por coloracion, encontrandose en condiciones déptimas * en el medio de cultivo, desarrollan y permiten su identificacton. EXAMEN DIRECTO A. COLECCION DE MUESTRAS Y OPORTUNIDAD DE EXAMEN Se ha dicho y discutido mucho sobre la vitalidad de la Entamoeba histolytica, considerandosela tan fragil, que algunos autores recomiendan practicar el examen de heces, si es posible “a la cabecera del lecho del paciente”. En realidad, los estudios realizados por diverscs investigadores y por nosotros, sobre la viabilidad de ja Entamoeba histolytica y de la Enta- moeba coli, nos permiten afirmar que es innecesario realizar el examen de la muestra de heces en estas condiciones, ya que. se puede llegar al diagnéstico de estos protozocs, algunas horas después de emitidas las materias fecales. . De acuerdo con lo expuesto anteriormente, recomendamos practicar el examen de la muestra de heces dentro de las cinco primeras horas que han seguido a su emisién, lo que no descarta de ningtin modo, la posibi- lidad de realizar este examen en un Japso de tiempo mas corto. Si insistimos en el hecho de que tal examen pueda Hevarse a cabo eatisfactoriamente algunas horas después, es porque en nuestro medio se ha arraigado el criterio de la poca vitalidad en el exterior de la Entamoe- ba histolytica, prejuicio que nos parece necesario desterrar, para evitar ya sea Ja penosa tarea del laboratorista, de tener que transportar su ma- terial de cbservacién a casa del paciente, o la no menos desagradable del paciente de trasladarse al laboratorio para que en él pueda practicarse el examen.METODOS DE DIAGN OSTICO MICROSCOPICO DE LA AMEBIASIS 179 Recomendamos que la muestra recién emitida sea colocada en una caja de cartén parafinade que reune de un lado, la ventaja de su facil transporte, y de otro, la de su impermeabilidad. A falta de ella, la mues- tra puede ser remitida al laboratorio en cualquier vasija © recipiente apro- piado. By ©. MATERIAL NECESARIO PARA BL EXAMEN DE HECES Y METODO A SEGUIR El material con que debe contar el laboratcrista se reduce a) Laminas pertaobjetos; b) Laminillas cubreebjetos, las que deben ser come condicién indispensable, transparentes y limpias: ¢) Suero fisiol6é- gico al 8.5 p. 1000; d) Solucion de lugol: ¢) Mondadientes con un extre- mo aplanado. Frente a una muestra de heces por examinar, se procede de la si guiente manera: 1°, Sobre una lamina portacbjetos, se coloca una gota de suero fisiolégico y otra de lugol; 2°, Con un palito mondadientes se toma una pequefia porcién de la muestra y se hace una emulsién, prime- ro en la gota de suero fisiolégico y después en la de lugol. Es necesa- rio que las emulsiones sean lo sulicientemente delgadas, como para per- mitir un buen examen, porgue de lo contrario se tropieza con graves difi- cultades, Hechas las emulsiones. se coloca encima de cada una. una laminilla cubre-objetos y se procede a examinar: primero, la preparacién en suero fisiolégico, y después la preparacién en lugol. La preparacion con suero fisiologico debe ser examinada minucio- samente, pot lo menos unos 10 minutos y ella nos permitira percatarnos de la existencia o ausencia de formas vegetativas o quisticas de los dife- rentes tipos de amebas, de la presencia de leucocitos, macréfagos, blas- tocystis, todos los cuales tienen importancia en el diagnéstico. (1) Practicado el examen en la preparacién con suero fisiolégico, se pro- cede al examen de la preparacién en Iugol, examen que, como el ante- rice, debe ser realizado con suma prolijidad, desde que éste nos permiti rA apreciar ciertas estructuras, sobre todo en lo que se refiere al nicleo y que son de la mayor importancia en el diagnéstico. (1) En el presente trabajo solo nos Himitamos a las ampbas, dejando de lado ios Ragelados y otra clase de parasitos intestinales.