19/09/2016

MICROORGANISMOS PRESENTES
EN EL AGUA
Habitan en:
Virus Aguas dulces

.
Bacterias
Aguas saladas
Parásitos Estuarios
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL Hongos Aguas termales
AGUA
Algas Agua destilada
Gabriela Terrazas Chávez de Soria

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO

DEL AGUA DEL AGUA
 El interés se centra en los microorganismos patógenos, que
son los diferentes tipos de bacterias, virus, protozoos y
otros organismos, que transmiten enfermedades.
Es el conjunto de operaciones ORIGEN BACTERIANO
encaminadas a determinar Enfermedad Agente
los microorganismos Fiebres tifoideas y Salmonella typhi,
paratifoideas Salmonella paratyphi
presentes en una muestra
Disentería Shigella
problema de AGUA. Cólera Vibrio cholerae
Gastroenteritis agudas y Escherichia coli (ETEC)
diarreas Campylobacter
Yersinia enterocolítica
Salmonella, Shigella
Cáncer gástrico Helicobacter pylori

La calidad del agua puede alterarse fácilmente ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO

por la contaminación con microorganismos DEL AGUA
patógenos que ocasionan enfermedades graves. ORIGEN VIRAL
Enfermedad Agente

Hepatitis A y E Virus de la Hepatitis A y B

Gastroenteritis agudas Rotavirus, Astrovirus,
y diarreas Enterovirus, Adenovirus,
Reovirus, Calicivirus

ORIGEN PARASITARIO

Disenteria amebiana Entamoeba histolytica

Giadia lambia
Criptosporidium

 En los países en vías de desarrollo las enfermedades producidas por estos

patógenos son uno de los motivos más importantes de muerte prematura,
sobre todo de niños.

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MICROORGANISMOS DEL AGUA PARA QUÉ SE HACEN LOS ANÁLISIS DE

AGUA:
La microbiota de las
aguas superficiales Evaluar la calidad de las aguas
llega al agua
periodicamente… Detectar la presencia de
Del aire
microorganismos en las aguas para
usos especiales como las utilizadas


 Del arrastre
superficial de
tierra
en la industria farmacéuticas
 De vertimientos Precisar la presencia de metabolitos
domésticos e
industriales microbianos

MICROORGANISMOS DEL AGUA FACTORES QUE INCIDEN EN LA FLORA

 Por ejemplo: los microbios llegan al agua en las heces
y otros restos orgánicos que producen las personas
infectadas.
BACTERIANA
 La acidez disminuye el contenido de microorganismos.
 La materia orgánica lo aumenta.
 Mucho oxígeno disuelto disminuye los microorganismos
anaerobios.
 Las sales, si son abundantes, producen que el agua sea casi
estéril.
 Si existe poca cantidad de sales se estimula el desarrollo
bacteriano.
 La filtración disminuye el número de microorganismos.
 La temperatura puede aumentar o disminuir el contenido
bacteriano.
 La turbidez hace que el contenido bacteriano pueda
aumentar, ya que los rayos U.V. no manifiestan su acción.
 Los protozoos fagocitan bacterias y así disminuyen el
número de estas.

REQUISITOS MICROBIOLÓGICOS

 El agua es apta bacteriológicamente

para consumo si se encuentra
exenta de microorganismos
patógenos de origen entérico y
parasitario intestinal.

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¿COMO PUEDE ASEGURARSE LA RELACIÓN ENTRE COLIFORMES TOTALES,

CALIDAD MICROBIOLOGICA DEL AGUA? FECALES Y E. COLI

Escherichia coli es un coliforme fecal que TERMOTOLERANTES (44ºC)
 No es práctico realizar control rutinario de la evidencia contaminación fecal
totalidad de los microorganismos hídricos, Coliformes fecales —aquellos de origen intestinal
potencialmente riesgosos para la salud, debido a:
 la gran variedad de bacterias patógenas cultivables:
se necesitaría mucho tiempo para detectarse. GENEROS FUENTE
 la complejidad de los ensayos de aislamientos Escherichia HECES (humanos y
animales)
 la presencia en baja concentración de varias especies
Klebsiella HECES, AMBIENTE
altamente agresivas: si están en número muy Enterobacter HECES, AMBIENTE
pequeño NO son detectadas por los ensayos de Citrobacter AMBIENTE
laboratorio Serratia AMBIENTE
 Algunas bacterias no sobreviven en el agua por
mucho tiempo o podrían tener acceso en forma
COLIFORMES TOTALES
esporádica.

MICROORGANISMOS INDICADORES
DE LA CALIDAD DEL AGUA
ESCHERICHIA COLI
La presencia en altas cantidades evidencian  Es una bacteria gram (-), mide de 1 um a 3 um, móvil, desarrolla
problemas de higiene y de contaminación del a un pH de 7,2 a 7,5 y temperatura de 30ºC a 37 ºC incluso a
agua
Se encuentran en el intestino del hombre y de los animales,
45ºC, aerobia y anaerobia facultativa, Ureasa negativa, indol
pero también en otros ambientes: agua, suelo, plantas, positiva, es decir, oxida el triptofano para formar indol.
cáscara de huevo, etc. Su origen es principalmente FECAL.
 Su presencia evidencia contaminación fecal en el agua ya que
Bacterias Indicadores de
este microorganismo es habitante normal del tracto digestivo de
aerobias
mesófilas contaminación fecal animales de sangre caliente y rara vez se encuentra en agua o
suelo que no haya sufrido algún tipo d contaminación fecal, por
Escherichia
coli
ello se considera como indicador universal.
Coliformes
Mohos y
totales y
levaduras
Indicadores de fecales su origen fecal
la Calidad es seguro
Sanitaria

Pseudomonas,
Staphylococcus Enterococos
y Salmonella

GRUPO COLIFORMES TOTALES

MÉTODO DE ANÁLISIS
 Este indicador apunta a la búsqueda de
microorganismos indicadores de contaminación fecal.
 Este grupo está integrado por enterobacterias:
Vaciado
en Placa

 Son bacilos gram (-), no esporulados, aerobios o

anaerobios facultativos,
 Fermentan la lactosa a 35 ºC, produciendo gas y
ácido láctico en 24 - 48 horas.
 Se desarrollan en presencia de sales biliares u Número
Métodos más
otros agentes tensoactivos. moleculares
.

Probable
 Son oxidasa negativa y no forman esporas (NMP)
 Algunos presentan actividad a la B-glucoronidasa
 Especies que conforman el grupo:
 Escherichia coli,
 Klebsiella pneumoniae,
 Enterobacter aerogenes, Filtración a
 Citrobacter, través de
membrana
 Proteus.

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MÉTODO DE ANÁLISIS: NÚMERO MÁS

PROBABLE (NMP)
MUESTRA

TERMOTOLERANTES (44ºC)

Caldo E. coli
Prueba confirmativa para Coliformes Fecales
+

Caldo Bilis Verde Brillante

Prueba confirmativa para Coliformes Totales

+
Caldo Lauril Sulfato PRUEBA PRESUNTIVA DE COLIFORMES TOTALES:
Prueba presuntiva para Coliformes Totales Siembra en 15 tubos c/u con 10 ml de Caldo Lauril Triptosa

PRUEBA DEL NÚMERO MAS PROBABLE (NMP)

IDENTIFICACION Y RECUENTO DE
BACTERIAS COLIFORMES TOTALES, MÉTODO DE ANÁLISIS: NÚMERO MÁS
COLIFORMES TERMORRESISTENTES Y E. COLI PROBABLE (NMP)
METODO DEL NUMERO MAS PROBABLE (NMP)
 La examinación de replicas de tubos y diluciones son
reportados como Numero Mas Probable de organismos
Prueba
presentes. Este número está determinado mediante
•Muestra +
Presuntiva de
ColiformesTotales
Caldo Lauril
Triptosa 24 – 48Hrs. 35 ºC
formulas de probabilidad en un estimado que significa
•Los tubos la densidad de COLIFORMES en la MUESTRA.
Prueba
24 – 48Hrs. 35 ºC
positivos +

 Los valores están definidos en la tabla de NMP

Confirmativa para Caldo Lactosa
Coliformes Totales Bilis Verde
brillate

realizadas mediante la distribución de Poisson.

Prueba
Confirmativa para •Los tubos
24 – 48Hrs. 44,5 ºC
positivos + Caldo
Coliformes
Escherichia coli
Fecales

Los tubos
Prueba positivos + 24 Hrs. 44,5 ºC
confirmativa para
E Coli Caldo EC +
MUG

MUG: 4-metilumbeliferil-B-Glucorónido

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METODO DE MEMBRANA FILTRANTE

PRUEBAS BIOQUIMICA PARA

IDENTIFICAR E. coli

Filtro de Nitrato de Celulosa de 0,45 um

PRUEBAS BIOQUIMICA PARA

IDENTIFICAR E. coli

Filtro de Nitrato de Celulosa de 0,45 um

Agar ENDO

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Colocar la tapa de la placa

de Petri, invertir la placa e
incubar en estufa a 37ºC
durante 24 horas

En este medio todos los coliformes crecen formando colonias de color

rojo oscuro con el característico brillo metálico de Escherichia coli de
color verde-azulado aunque en los géneros Citrobacter, Klebsiella y
Enterobacterno es tan intenso como en Escherichia y puede pasar
desapercibido.

Los resultados se expresan en UFC/100 mL.

METODO DE MEMBRANA FILTRANTE