Compartimentalizaci�n celular

La envoltura nuclear permite al n�cleo controlar su contenido y separarlo del resto

del citoplasma cuando sea necesario. Esto es importante para controlar procesos en
cualquiera de los lados de la membrana nuclear. En algunos casos, cuando se precisa
restringir un proceso citoplasm�tico, un participante clave se retira al n�cleo,
donde interact�a con factores de transcripci�n para reprimir la producci�n de
ciertas enzimas de la ruta. Este mecanismo regulador tiene lugar en el caso de la
gluc�lisis, una ruta celular en la que se utiliza la glucosa para producir energ�a.
La hexoquinasa es la enzima responsable del primer paso de la gluc�lisis,
produciendo glucosa-6-fosfato a partir de la glucosa. A altas concentraciones de
fructosa-6-fosfato, una mol�cula que se forma posteriormente a partir de la
glucosa-6-fosfato, una prote�na reguladora retira la hexoquinasa al n�cleo,45?
donde forma un complejo con otras prote�nas nucleares que reprime la transcripci�n
de los genes implicados en la glucolisis.46?

Para controlar qu� genes se deben transcribir, la c�lula impide el acceso f�sico de
algunos factores de transcripci�n responsables de regular la expresi�n g�nica hasta
que son activados por otras rutas de se�alizaci�n. Esto impide que se den incluso
peque�os niveles de expresi�n g�nica inadecuada. Por ejemplo, en el caso de los
genes controlados por NF-?B, que est�n implicados en la mayor parte de las
respuestas inflamatorias, la transcripci�n se induce en respuesta a una cascada de
se�alizaci�n celular como la que se inicia con la mol�cula se�alizadora TNF-a
uni�ndose a un receptor de la membrana celular, lo que produce el reclutamiento de
prote�nas se�alizadoras y finalmente la activaci�n del factor de transcripci�n NF-?
B. Una se�al de localizaci�n nuclear que posee la prote�na NF-?B le permite ser
transportada a trav�s del poro nuclear al n�cleo, donde estimula la transcripci�n
de los genes diana.8?

La compartimentalizaci�n permite a la c�lula impedir la traducci�n de ARNm no

ayustado.47? El ARNm contiene intrones que se deben retirar antes de ser traducidos
para producir prote�nas funcionales. El ayuste se efect�a en el interior del n�cleo
antes de que el ARNm pueda acceder a los ribosomas para su traducci�n. Sin el
n�cleo los ribosomas traducir�an ARNm reci�n transcrito y sin procesar, lo que
producir�a prote�nas mal plegadas y deformadas.

Expresi�n g�nica
Art�culo principal: Expresi�n g�nica

Micrograf�a de una transcripci�n gen�tica en curso de �cido ribonucleico ribosomal

que ilustra el crecimiento de los transcritos primarios. "Beginn" indica el extremo
3' del ADN, donde comienza la s�ntesis de nuevo ARN. "Ende" indica el extremo 5',
donde los transcritos primarios est�n pr�cticamente completos.
La expresi�n g�nica implica en primer lugar la transcripci�n, en la que el ADN se
utiliza como molde para producir ARN. En el caso de los genes que codifican
prote�nas, el ARN generado por este proceso es el ARN mensajero (ARNm), que
posteriormente precisa ser traducido por los ribosomas para formar una prote�na.
Puesto que los ribosomas se localizan fuera del n�cleo, el ARNm sintetizado debe
ser exportado.48?

Puesto que el n�cleo es el lugar donde se da la transcripci�n, est� dotado de un

conjunto de prote�nas que, o bien est�n implicadas directamente en este proceso, o
en su regulaci�n. Entre �stas encontramos las helicasas, que desenrollan la
mol�cula de ADN de doble cadena para facilitar el acceso de la maquinaria de
s�ntesis, la ARN polimerasa, que sintetiza el ARN a partir del molde de ADN, la
topoisomerasa, que var�a la cantidad de superenrollamiento del ADN, as� como una
amplia variedad de factores de transcripci�n que regulan la expresi�n g�nica.49?

Procesamiento del pre-ARNm

Las mol�culas de ARNm reci�n sintetizadas se conocen como transcritos primarios o
pre-ARNm. Posteriormente se deben someter a modificaci�n post-transcripcional en el
n�cleo antes de ser exportados al citoplasma. El ARNm que aparece en el n�cleo sin
estas modificaciones acaba degradado en lugar de utilizarse para la traducci�n en
los ribosomas. Las tres modificaciones principales son: La del extremo 5' (5'
caping), la poliadenilaci�n del extremo 3' y el ayuste de ARN. Mientras permanece
en el n�cleo, el pre-ARNm se asocia con varias prote�nas en complejos conocidos
como ribonucleoprote�nas heterog�neas nucleares o hnRNPs. La adici�n de las
modificaciones del extremo 5' tiene lugar en el momento de la transcripci�n y es el
primer paso en las modificaciones postranscripcionales. La cola de poliadenina 3'
solo se a�ade una vez que la transcripci�n est� completa.

El ayuste (splicing o corte y empalme) de ARN, llevado a cabo por un complejo

denominado espliceosoma es el proceso por el que los intrones se retiran del pre-
ARNm, permaneciendo �nicamente los exones conectados para formar una sola mol�cula
continua. Este proceso normalmente finaliza tras los dos anteriores, pero puede
comenzar antes de que la s�ntesis est� completa en transcritos con muchos exones.7?
Muchos pre-ARNm's, incluyendo los que codifican anticuerpos, se pueden cortar y
empalmar de m�ltiples formas para producir diferentes ARNm maduros, que por ello
codifican diferentes secuencias de prote�nas. Este proceso se conoce como ayuste
alternativo, y permite la producci�n de una gran variedad de prote�nas a partir de
una cantidad limitada de ADN.

Din�mica y regulaci�n
Transporte nuclear

Las macromoleculas, como el ARN y las prote�nas son transportadas activamente a

trav�s de la membrana nuclear en un proceso conocido como "ciclo de transporte
nuclear Ran-GTP.
El transporte de mol�culas hacia el exterior e interior del n�cleo, puede llevarse
a cabo gracias a que en todas las c�lulas eucariotas la envoltura nuclear est�
perforada por poros nucleares, constituidos por grandes complejos multiproteicos.
La entrada y salida de grandes mol�culas del n�cleo est� estrictamente controlada
por los complejos de poros nucleares. Aunque las peque�as mol�culas pueden entrar
en el n�cleo sin regulaci�n,50? las macromol�culas como el ARN y las prote�nas
requieren asociarse a carioferinas llamadas importinas para entrar en el n�cleo, y
exportinas para salir. Las prote�nas cargadas que deben ser translocadas desde el
citoplasma al n�cleo contienen cortas secuencias de amino�cidos conocidas como
se�ales de localizaci�n nuclear que est�n unidas a las importinas, mientras que las
transportadas desde el n�cleo al citoplasma poseen se�ales de exportaci�n nuclear
unidas a las exportinas. La capacidad de las importinas y las exportinas para
transportar su carga est� regulada por GTPasas, enzimas que hidrolizan GTP
liberando energ�a. La GTPasa clave en el transporte nuclear es Ran, que puede unir
o bien GTP o bien GDP (guanosina difosfato), dependiendo de si est� localizada en
el n�cleo o en el citoplasma. Mientras que las importinas dependen de Ran-GTP para
disociarse de su carga, las exportinas necesitan Ran-GTP para unirse a su carga.14?

Se�ales de localizaci�n necesarias para el transporte

Las se�ales de localizaci�n nuclear hacen que el flujo de prote�nas del citosol al
n�cleo sea selectivo. Estas se�ales �nicamente est�n presentes en las prote�nas
nucleares, consisten en una secuencia corta que va entre 4 y 8 amino�cidos. Esta
se�al, cuando hay importaci�n nuclear se denomina se�al de localizaci�n nuclear
(NLS) y cuando hay exportaci�n nuclear se denomina se�al de exportaci�n nuclear
(NES).

Existen dos tipos de NLS: las monopartitas y las bipartitas. Las NLS monopartitas
est�n formadas por un s�lo grupo de residuos b�sicos y las NLS bipartitas est�n
formadas por dos grupos de residuos de lisinas y argininas. Este tipo de se�ales
son reconocidas espec�ficamente por la Importina a y las prote�nas que las
contienen son transportadas al n�cleo por el heterod�mero Importina a/Importina �1.
Por otro lado, las NES son secuencias cortas de amino�cidos hidrof�bicos,
principalmente leucinas.

A estas se�ales de localizaci�n nuclear, que se localizan en los poros nucleares,

se unen una o m�s nucleoporinas, que son prote�nas citos�licas, que contienen la N-
acetilglucosamina, un az�car simple que ayuda a su identificaci�n mediante el uso
de lectinas y anticuerpos espec�ficos. Las nucleoporinas colaboran dirigiendo a la
prote�na nuclear hacia el centro del complejo de poro, donde se une a las fibrillas
que est�n extendidas hacia el citosol y que se proyectan a partir del anillo del
complejo. Estas fibrillas gu�an a las prote�nas nucleares hacia el centro del
complejo de poro, donde es transportada activamente hacia el interior nuclear
mediante un proceso que requiere la hidr�lisis de GTP.

Carioferinas
Son prote�nas mediadoras del transporte a trav�s del complejo del poro nuclear. Su
clasificaci�n depende de la direcci�n del transporte para el que fueron
inicialmente descritas, se les ha clasificado como importinas y exportinas.

Las importinas, en su mayor�a, pertenecen a la superfamilia de las importinas � y

se encargan de regular el transporte de la mayor parte de las prote�nas y de
diferentes especies de ARN, excepto ARNm.

Exportaci�n nuclear
Sucede en condiciones de alta concentraci�n de Ran-GTP, reconoce una prote�na que
contiene una NES (se�al de exportaci�n nuclear) junto a una mol�cula de Ran-GTP. El
complejo es entonces capaz de interaccionar con el complejo del poro nuclear y
atravesarlo hasta el citoplasma. Una vez all�, otras prote�nas Ran promueven la
actividad GTPasa de Ran, que hidroliza el GTP y pasa a convertirse en Ran-GDP. La
hidr�lisis produce un cambio conformacional en Ran, produci�ndose el desensamblaje
de la exportina-carga, quedando la carga libre en el citoplasma. Las mol�culas de
Ran-GDP y exportina se reciclan para un nuevo ciclo de transporte.

Las prote�nas especializadas de exportaci�n sirven para la traslocaci�n de ARNm

maduro y ARNt al citoplasma despu�s de que la modificaci�n postranscripcional se
completa. Este mecanismo de control de calidad es importante debido al papel
central de esas mol�culas en la traducci�n de prote�nas. La expresi�n inadecuada de
una prote�na debido a una escisi�n de exones incompleta o la incorporaci�n impropia
de amino�cidos podr�a tener consecuencias negativas para la c�lula. Por ello, el
ARN no modificado por completo que alcanza el citoplasma es degradado en lugar de
ser utilizado en la traducci�n.7?

Importaci�n nuclear
La importaci�n nuclear depende de que la importina se una a su carga en el
citoplasma y lo trasporte a trav�s del poro nuclear al n�cleo. Las importinas
interaccionan en el citoplasma, en condiciones de baja concentraci�n de RanGTP, con
la prote�na con una NLS (se�al de localizaci�n nuclear), y entra al interior del
n�cleo mediante asociaci�n con prote�nas del complejo del poro nuclear. Una vez en
el nucleoplasma, la presencia de altos niveles de RanGTP causa la destrucci�n del
complejo importina-carga, liber�ndose la carga en el interior del n�cleo. La
Importina a es transportada de nuevo al citoplasma mediante su interacci�n
reinici�ndose de nuevo el proceso.

Regulaci�n del transporte entre el n�cleo y el citosol

El transporte entre el citosol y el n�cleo puede regularse inactivando la se�al de
localizaci�n nuclear de las prote�nas nucleares por fosforilaci�n o cuando dichas
prote�nas se unan a prote�nas citos�licas inhibidoras que las retienen en el
citosol mediante interacciones con el citoesqueleto o con organelos espec�ficos, o
enmascaran sus se�ales de localizaci�n nuclear. Sin embargo, cuando la c�lula
recibe el est�mulo necesario, la prote�na nuclear es liberada y es transportada
hacia el n�cleo.

De una forma similar, puede estar controlada la exportaci�n de ARN desde el n�cleo.
Como en la importaci�n activa hacia el n�cleo, la exportaci�n requiere una se�al.
Es probable que las se�ales de exportaci�n nuclear se localicen en las subunidades
proteicas de dichos complejos, y que se activen despu�s de ensamblarse
correctamente con los componentes del ARN.

Por todo esto puede concluirse que el mecanismo de transporte de macromol�culas a

trav�s del poro nuclear, es muy distinto al mecanismo que ocurre a trav�s de las
membranas de otros organelos, pues el transporte nuclear no ocurre por un
transportador proteico que atraviesa una o m�s bicapas lip�dicas sino mediante un
poro con un canal acuoso regulado. Tambi�n, mientras que las prote�nas nucleares
son transportadas a trav�s de los poros manteniendo su conformaci�n completamente
plegada, en el transporte a otros organelos, las prote�nas tienen que desplegarse.
Por �ltimo, las se�ales de localizaci�n nuclear no se eliminan despu�s del
transporte hacia el n�cleo, pues las prote�nas nucleares han de ser importadas al
n�cleo varias veces, despu�s de cada divisi�n celular. Pero, cuando una prote�na ha
sido importada a cualquier otro organelo membranoso, el p�ptido se�al es a menudo
eliminado despu�s de la translocaci�n proteica.

Ensamblaje y desensamblaje

Imagen de un neumocito de trit�n te�ido con colorantes fluorescentes durante la

metafase. El huso mit�tico puede verse te�ido en verde claro, los cromosomas de
azul y la membrana celular de rojo. Todos los cromosomas excepto uno se encuentran
en la placa metaf�sica.
Durante su periodo de vida un n�cleo puede desensamblarse, o bien en el transcurso
de la divisi�n celular, o como consecuencia de la apoptosis, una forma regulada de
muerte celular. Durante estos acontecimientos, los componentes estructurales del
n�cleo �la envoltura y la l�mina� son sistem�ticamente degradados.

Durante el ciclo celular la c�lula se divide para formar dos c�lulas. Para que �ste
proceso sea posible, cada una de las nuevas c�lulas hija debe adquirir un juego
completo de genes, un proceso que requiere la replicaci�n de los cromosomas, as�
como la segregaci�n en juegos separados. Esto se produce cuando los cromosomas ya
replicados, las crom�tides hijas, se unen a los microt�bulos, los cuales a su vez
se unen a diferentes centrosomas. Las crom�tides hija pueden ser fraccionadas hacia
localizaciones separadas en la c�lula. No obstante, en muchas c�lulas el centrosoma
se localiza en el citoplasma, fuera del n�cleo, por lo que los microt�bulos ser�an
incapaces de unirse a las crom�tides en presencia de la envoltura nuclear.51? Por
tanto, en los estadios tempranos del ciclo celular, comenzando en profase y hasta
casi la prometafase, se desmantela la membrana nuclear.17? De forma similar,
durante el mismo periodo se desensambla la l�mina nuclear, un proceso que est�
regulado por la fosforilaci�n de las l�minas.52? Hacia el final del ciclo celular
se reforma la membrana nuclear, y en torno al mismo tiempo, la l�mina nuclear se
reensambla desfosforilando las prote�nas laminares.52?

La apoptosis es un proceso controlado en el que los componentes estructurales de la

c�lula son destruidos, lo que produce la muerte de la c�lula. Los cambios asociados
con la ap�ptosis afectan directamente al n�cleo y a sus contenidos, por ejemplo en
la condensaci�n de la cromatina y la desintegraci�n de la envoltura nuclear y la
l�mina. La destrucci�n de las redes de l�mina est� controlada por proteasas
apopt�ticas especializadas denominadas caspasas, que desintegran la l�mina nuclear
y de ese modo degradan la integridad estructural del n�cleo. La desintegraci�n de
la l�mina nuclear se utiliza en ocasiones en los laboratorios como indicador de la
actividad de la caspasa en ensayos de actividad apopt�tica temprana.17? Las c�lulas
que expresan l�minas resistentes a las caspasas son deficientes en los cambios
nucleares relacionados con la apoptosis, lo que sugiere que las l�minas desempe�an
un papel importante en el inicio de los eventos que conducen a la degradaci�n
apopt�tica del n�cleo.17? La inhibici�n del propio ensamblaje de la l�mina nuclear
es por s� misma un inductor de la apoptosis.53?

La envoltura nuclear act�a como una barrera que evita que virus de ADN o ARN
penetren en el n�cleo. Algunos virus precisan acceder a prote�nas dentro del n�cleo
para replicarse o ensamblarse. Los virus de ADN, como el herpesvirus se replican y
ensamblan en el n�cleo celular, y salen brotando a trav�s de la membrana nuclear
interna. Este proceso se acompa�a del desensamblaje de la l�mina nuclear en la cara
nuclear de la membrana interna.17?

C�lulas anucleadas y polinucleadas

Los eritrocitos humanos, al igual que los de otros mam�feros, carecen de n�cleo.
Esto tiene lugar como una parte normal del desarrollo de este tipo de c�lula.
Aunque la mayor parte de las c�lulas tienen un �nico n�cleo, algunos tipos
celulares carecen de �l, en tanto que otros poseen m�ltiples n�cleos. Esto puede
ser un proceso normal, como es en el caso de la maduraci�n de los eritrocitos, o
bien el resultado de una divisi�n celular defectuosa.

Las c�lulas anucleadas carecen de n�cleo, y por lo mismo son incapaces de dividirse
para producir c�lulas hijas. El caso mejor conocido de c�lula anucleada es el
eritrocito de mam�fero, que tambi�n carece de otros org�nulos como mitocondrias, y
sirven en principio como veh�culos de transporte de ox�geno desde los pulmones a
los tejidos. Los eritrocitos maduran gracias a la eritropoyesis en la m�dula �sea,
donde pierden su n�cleo, org�nulos y ribosomas. El n�cleo es expulsado durante el
proceso de diferenciaci�n de eritroblasto a reticulocito, el cual es el precursor
inmediato del eritrocito maduro.54? mut�genos puede inducir la liberaci�n de
algunos eritrocitos inmaduros "micronucleados" al torrente sangu�neo.55?56? Tambi�n
pueden aparecer c�lulas anucleadas a partir de una divisi�n celular defectuosa en
la que una c�lula hija carece de n�cleo, mientras que la otra posee dos.

Las c�lulas polinucleadas contienen m�ltiples n�cleos. La mayor parte de los

protozoos de la clase Acantharea,57? y algunos hongos que forman micorrizas,58?
tienen c�lulas polinucleadas de forma natural. Otros ejemplos ser�an los par�sitos
intestinales del g�nero Giardia, que posee dos n�cleos en cada c�lula.59? En los
seres humanos, el m�sculo esquel�tico posee c�lulas, llamadas miocitos, que se
convierten en polinucleadas durante su desarrollo. La disposici�n resultante de los
n�cleos en la regi�n perif�rica de la c�lula permite un espacio intracelular m�ximo
para las miofibrillas.7? Las c�lulas multinucleadas tambi�n pueden ser anormales en
humanos. Por ejemplo, las que surgen de la fusi�n de monocitos y macr�fagos,
conocidas como c�lulas multinucleadas gigantes, pueden ser observadas en ocasiones
acompa�ando a la inflamaci�n,60? y tambi�n est�n implicadas en la formaci�n de
tumores.61