FUNDAMENTOS

El proceso cromatográfico implica la distribución diferencial de un soluto o sustancia

absorbible entre dos fase, una de las cuales está inmóvil o estacionaria y la móvil. En la
cromatografía en papel para la separación de los aminoácidos, los
solventes utilizados son mezclas de agua, alcoholes y ácidos o bases por ejemplo, lisina, valina,
agua. El papel filtro utilizados sirve de soporte al componente más polar del solvente
agua formando así la fase estacionaria. Los componentes menos polares del solvente alcohol
y ácido acético constituyen la
fase móvil que arrastra diferencialmente las moléculas disueltas en la fase estacionaria. Durante el
proceso cromatográfico los aminoácidos son separados de acuerdo a su afinidad con la fase
estacionaria o la fase móvil. Para permitir la visualización de los aminoácidos separados se hace
uso de un (revelador) como es la ninhidrina al 0,1%, la que reacciona con los alfa-aminoácidos
libres o combinados, formando un compuesto de color azul. También en el valor Rf que es la
relación entre la distancia recorrido por un aminoácidos y la distancia que viaja el frente del
solvente, medidas ambas desde el punto de aplicación de la muestra, es de utilidad para la
identificación de los aminoácidos.

FACTORDE RETARDO ESPERIMENTAL

1: MEZCLA DE AMINOACIDOS

2: LISINA 0,1M

3: VALINA 0,1M

4: TREONINA 0,1M

Rf=DISTANCIA DEL SOLVENTE/DISTANCIA DE LA MUESTRA

Rf1=3,5cm/4,3cm= 0,81

Rf2=1,2cm/4cm= 0,3

Rf3=3,3cm/3,8cm=0,86

Rf4=2cm/4cm= 0,5
RESULTADOS Y ANALISIS

Realizamos la práctica a ciegas, es decir, con los patrones, sus concentraciones y el factor de
retardo de cada una de las muestras, pero sin saber cuál era cada uno de los que aplicábamos en
la mezcla de aminoácidos, así que nuestro objetivo real era realizar la cromatografía de manera
correcta y averiguar, mediante los factores de retardo obtenidos, que sustancia correspondía con
la mezcla de aminoácidos.

Durante la realización de la técnica, los puntos de aplicación donde pusimos las muestras fueron
aproximadamente de 1cm del borde, y fuimos adicionando poco a poco el solvente o el eluyente,
de este modo se impidió que la muestra y los patrones estuviesen en contacto directo con el
eluyente.
A lo largo de la cromatografía logramos la identificación de distintos aminoácidos tales como:
lisina, valina, treonina. A demás se identificaron a través del factor de retardo de cada uno.

Rf de la mezcla de aminoácidos fue de 0,81

Rf de la lisina fue de 0,3

Rf de la valina fue de 0,86

Rf de la treonina fue de 0,5

La mezcla de aminoácidos con la que trabajamos, contiene valina y troninna ya que estas dos
muestras fueron las únicas que eluyeron sobre el papel cromatografico.