DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Katheryn Padilla, Luisa Charry, María Espinel

miespinel@ucundinamarca.edu.co, lfcharry@ucundinamarca.edu.co

INTRODUCCION
Los carbohidratos son alimentos cuya OBJETIVOS
constitución química está formada por
Analizar las propiedades características
una molécula de carbono, hidrógeno y
de los carbohidratos, derivados de su
oxígeno. Su función es contribuir en el
estructura, realizando algunas
almacenamiento y la obtención de
reacciones generales de identificaron.
energía, sobre todo al cerebro y al
sistema nervioso. Gracias a una enzima Identificar mediantes reacciones las
llamada amilasa, la molécula del características presentadas en los
carbohidrato (también llamado hidrato de resultados de las pruebas aplicadas así
carbono) se descompone, lo que permite como el comportamiento químico de los
que el cuerpo la utilice como carbohidratos.
combustible. (Zamora 2019).
Reconocer y analizar las reacciones que
Los carbohidratos son compuestos que se llevan a cada una de las pruebas.
contienen cantidades grandes de grupos
hidroxilo. Los carbohidratos más simples METODOLOGIA
contienen una molécula de aldehído (a
estos se los llama polihidroxialdehidos) o
una cetona (polihidroxicetonas). López
(2017)
Todos los carbohidratos pueden
clasificarse como monosacáridos,
oligosacáridos o polisacáridos. Un
oligosacárido está hecho por 2 a 10
unidades de monosacáridos unidas por
uniones glucosúricas. Los polisacáridos
son mucho más grandes y contienen
cientos de unidades de unidades de
monosacáridos. La presencia de los
grupos hidroxilo permite a los
carbohidratos interactuar con el medio
acuoso y participar en la formación de
uniones de hidrogeno, tanto dentro de
sus cadenas como entre cadenas de
polisacáridos. Derivados de
carbohidratos pueden tener compuestos
nitrogenados, fosfatos, y de azufre. Los
carbohidratos pueden combinarse con
los lípidos para formar glucolípidos o con
las proteínas para formar glucoproteínas.
(Carbohidratos 2016)
RESULTADOS

# DE 1 2 3 4 5 6 7 8
MUESTRA
Molish - - + - - - + -
Benedict + + - + - - -
Fehling + + - - - + - -
Barfoed - - + - - - - -
Seliwanof - + + - - + + -
Bial - + + - - - - -
Lugol - - + - - - - -
Nombre Leche miel Rem Jugo de lactosa fructos sacaros papa
de la o Naranja a a
muestra lacha
problema

ANALISIS DE RESULTADOS

Prueba de Molish. figura 1. reacción de molish con galactosa.

En la disolución de la leche y el jugo de
naranja no apareció el precipitado violeta
por lo que se deduce que la muestra es
negativa.
La sacarosa presentó en interface la
formación de un anillo de color rojo
violeta después de un tiempo. Lo que
nos indica que corresponde a un
carbohidrato (disacárido).
Para la fructosa, se tiene un color azul
clarito inicialmente, al realizar el baño
caliente, su tono permaneció.
Prueba de Benedict.
La leche y la remolacha presenta
evidencia de precipitado color rojo ladrillo
con la reacción de oxidación de Benedict,
por lo que se confirma que es un azúcar
reductor.
La reacción de la prueba de Benedict en
el jugo de naranja no presento ningún
cambio de color por lo que se deduce
que es un azúcar no reductor.

Con la miel, se obtuvo una tonalidad café
oscura.
Para la reacción con la papa, se aplico
temperatura con ayuda del baño caliente,
provocando así una separación de dos
fases, en el fondo tenía un color café
claro y la superior de color naranja.
En la remolacha salió positiva la prueba
de molish ya que apareció en su parte
superior un anillo de rojo y violeta; la
remolacha contiene un gran porcentaje
de carbohidratos, gracias a que esta raíz
guarda grandes cantidades de almidón y
esta prueba permite detectar la presencia
de hidratos de carbono.
Para la fructosa, dio amarillo quemado
inicialmente, al calentar no cambio su
tonalidad.
Con la miel, dio café en su tono inicial,
después de calentar, su coloración
cambio a un anaranjado.
Para la reacción con la papa, se aplico
temperatura con ayuda del baño caliente,
dando al final una tonalidad azul oscuro.
La sacarosa no presenta evidencia de
precipitado por lo que se confirma, que
no es un azúcar no reductor.
figura 2. reacción con galactosa.
Prueba de Seliwanoff.
La disolución con la leche obtuvo un
precipitado de color blanco al colocarlo
en el baño de agua caliente, no nos dio
un color rojo en la reacción lo cual nos
indica que la leche no es una cetosa, por
lo cual se difiere que es una aldosa.
La remolacha en la prueba de seliwanoff
dio positiva debido que dio un color rojo
al poner en el baño de agua caliente, lo
cual indica que es una cetosa.
Para la reacción con la papa, se aplico
temperatura con ayuda del baño caliente,
no ocurrió ningún cambio, su coloración
se mantuvo en café claro.
Con la miel, inicialmente dio un color
naranja claro, luego del baño caliente
cambio su tonalidad naranja oscuro.
Para la fructosa, inicialmente dio color
azul clarito, al pasarla por el baño
caliente dio un tono de naranja fuerte.
En la sacarosa no es cetosa, pero está
formada por una aldosa y una cetosa
razón por la cual el resultado también es
positivo, Adquiriendo un precipitado de
color rojo.
La reacción con el jugo de naranja no
presento ningún cambio de color, por lo
que se dedujo que la solución no es una
cetosa porque no arrojo los resultados
esperados.
figura 3. reacción con fructosa.
Prueba de Fehling.
En la disolución de la leche nos arroja un
Precipitado de color rojo (Azúcar
reductor) que nos indica una coloración
rojo ladrillo a diferente nivel de coloración
ya que esto se debe a la concentración
de azúcar en cada solución,
estableciendo que se produjo la
reducción y que la prueba fue positivo.
Al someter la solución de la remolacha a
la reacción de Fehling, nos proporciona
un resultado negativo. No presentó un
precipitado rojo ladrillo característico de
un azúcar reductor.
Con la miel, se formaron dos fases, la
superior de tono amarillo verdoso, y la
inferior de tono naranja, luego del baño
caliente, su tonalidad final fue de naranja
oscuro.
Para la fructosa, su tono inicial fue azul
oscuro, luego de someterla al baño
caliente, cambio su tonalidad a un rojo.
Al realizar la prueba con el jugo de
naranja en el baño de agua calienteal
cabo de unos minutos la sustancia se
tornó de color naranja, la prueba no dio
el resultado esperado siendo una prueba
negativo.
Para la reacción con la papa, se aplico
temperatura con ayuda del baño caliente,
dando finalmente un tono azul
aguamarina.
La sacarosa es un azúcar no reductor,
debido a que no se formó un precipitado
de color rojo ladrillo, por lo cual la prueba
es negativa.
figura 4. reacción con glucosa
 En la prueba con la leche nos arroja un
resultado negativo por lo cual no hay
Prueba de Barfoed.
presencia del furfural producido en medio
La muestra de leche no cambia su color ácido por las pentosas.
inicial después de 10 minutos al
La reacción con la solución de la
calentarlo en el baño de agua caliente,
remolacha nos suelta un resultado
por lo que sepuede inferir que es un
positivo ya que se dio la aparición de
disacárido.
color azul-verdoso al hacer la prueba.
La sacarosa no nos dio el precipitado
La reacción con la sacarosa nos arroja
rojo ladrillo, en un tiempo muy
un resultado negativo ya que no se
prolongado mayor a 5 minutos,
realizó la aparición de precipitado.
generando una prueba negativa.
Para la fructosa, su tono inicial es
En la sustancia de la remolacha la
traslucido, al calentar no ocurrió ningún
prueba nos dio positiva ya que se dio un
cambio en su color original.
precipitado de color rojo ladrillo debido a
que es un monosacárido. Con la miel, se obtuvo un color inicial
café, luego de calentar, dio un naranja
Para la reacción de la papa no se aplico
claro.
temperatura, dando una coloración azul y
en el fondo presentó un tono azul Para la reacción con la papa, se aplico
verdoso. temperatura con ayuda del baño caliente,
formando así dos fases, la del fondo de
Con la miel, con el reactivo inicialmente
tono amarillo pálido y la superior de Tono
era verde oscuro, luego de calentar a
beige.
baño caliente dio una tonalidad verde
con un precipitado blanco. Al someter el jugo de naranja con el
reactivo de bial se obtuvo un color café al
Para la fructosa, su tono inicial fue de
cabo de unos minutos en el agua
verde oscuro, luego de calentarla,
caliente, diferente a los resultados
cambio su color a café.
esperados se causó un resultado falso
El jugo de naranja al hacer la reacción por el exceso de calor.
con el reactivo nos arrojó un color azul
claro que al finalizar con el baño de agua
caliente se tornó en un azul turquesa,
dando como resultado negativo.

figura 6. reacción de Bial.

figura 5. reacción con fructosa Prueba con Lugol.

En la reacción de la leche y el jugo de
naranja no arroja cambios en su
Prueba con Bial. coloración, por lo que se adopta la
posibilidad de que hay un margen de
error en la prueba ya que la leche y el
jugo de naranja contienen almidón y el
Lugol detecta la presencia del mismo.
En la reacción de la remolacha la prueba
dio positivo debido al cambio de
coloración a un rojo.
Para la fructosa, se obtiene inicialmente
una coloración roja, al calentar la
muestra, su tono cambio a naranja.
Con la miel, se obtiene una coloración
café y al realizar el baño caliente no
cambia su tonalidad inicial.
Para la reacción de la papa, no se aplico
calor, su cambio de tonalidad se dio
naturalmente a marrón con un color
negro al fondo del tubo de ensayo.
En la reacción de la sacarosa la
disolución después de varios minutos al
fuego no cambia de coloración,
obteniendo una prueba negativa.
figura 7. reacción de almidón
DISCUSION
En la prueba de Molish arrojan
resultados positivos y negativos ya que
Según (Ruiz 2016) Los disacáridos son
azucares formados por la unión de dos
monosacáridos mediante el enlace
glucosúrico. Si este enlace se efectúa
entre dos carbonos anoméricos, el
disacárido no tendrá el potencial
aldehído o cetona libre, por lo tanto, no
dan positivas aquellas pruebas que
involucren la participación de estos
grupos, recibiendo el nombre de azúcar
no reductor.
Para Harris (2004) la reacción que se dio
al formar el anillo morado se basa en la
reacción hidrolizante y deshidratante del
ácido sulfúrico sobre los hidratos de
carbono; en dicha reacción el ácido
sulfúrico cataliza la hidrolisis de los
enlaces glusidicos de las muestras y la
deshidratación a furfural (en las
pentosas) o hidroximetilfurfural (en las
hexosas).
La Prueba de Benedict da en algunas
reacciones positivo porque Según
(Escribd 2016) El fundamento de esta
reacción radica en que, en un medio
alcalino, el ion cúprico (otorgado por el
sulfato cúprico) es capaz de reducirse
por efecto del grupo aldehído del azúcar
(CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion
se observa como un precipitado rojo
ladrillo correspondiente al óxido cuproso
(Cu2O). El medio alcalino facilita que el
azúcar esté de forma lineal, puesto que
el azúcar en solución forma un anillo de
piranósico o furanósico. Una vez que el
azúcar está lineal, su grupo aldehído
puede reaccionar con el ion cúprico en
solución. Al arrojar un resultado negativo
se debe a que es un disacárido formado
por glucosa y fructosa, que se une por
medio de sus carbonos anoméricos, es
decir nos poseen sus carbonos
anoméricos libres.
En la prueba de Seliwanoff las
sustancias arrojaron un resultado positivo
porque son cetosas y la sacarosa al ser
un compuesto formado por la glucosa y
la fructosa también da positivo. La cetosa
deshidratada reacciona con el resorcinol
para generar un color rojizo medio
anaranjado. Según (Ipiales 2017) Si el
azúcar contiene un grupo cetona, es una
cetosa, y si contienen un grupo aldehído,
es una aldosa. Esta prueba está basada
en el hecho de que, al calentar las
cetosas son deshidratadas más rápido
que las aldosas.
Esta prueba es específica para identificar
la presencia de cetosas. Las cetosas se
deshidratan más rápidamente que las
aldosas, dando furfurales (aldehído
aromático con estructura en anillo). Estos
se condensan con el resorcinol
produciendo un complejo coloreado. Si el
tiempo de calentamiento es demasiado
esta reacción pude dar un resultado
positivo para cualquier azúcar, ya que
debido al excesivo calor las aldosas
terminan deshidratándose (Macarulla y
Goñi, 2002).
En la prueba de Fehling según (Aguilar
2016) dan positivo porque Reacciona
principalmente con los aldehídos debido
a que tienen un grupo carbonilo más
expuesto, que le da el carácter reductor,
y existe la presencia del precipitado rojo
ladrillo (óxido cuproso) y da negativo
porque es un azúcar constituido por una
molécula de glucosa y de fructosa, tiene
un enlace entre el primer carbono de la
glucosa y el segundo carbono de la
fructosa, y no queda grupos reductores
disponibles. por lo que se intuye, no
posee el grupo carbonilo apto y libre,
necesario como para reaccionar con el
reactivo Fehling.
En la remolacha no presentó un
precipitado rojo ladrillo característico de
un azúcar reductor, debido a que es un
disacárido formado por glucosa y
fructosa, que se une por medio de
carbonos anoméricos, es decir no
poseen carbonos anoméricos libres. Se
comprueba de una forma práctica que la
sacarosa, es un disacárido que en
reacciones de oxidación como la de
Fehling, no presenta evidencia de un
precipitado de color rojo y no es un
azúcar reductor por las razones ya
explicadas (Macarulla y Goñi, 2002).
En la prueba de Barfoed Según (Murray
2007) La lactosa contiene dos
monosacáridos diferentes. Dglucosa y
Dgalactosa unidos por un enlace βD.
Glicosidico entre el C1 de la galactosa y
el C4 de la glucosa. La lactosa es un
azúcar reductor que posee el hidroxilo
hemiacetilico por lo que permite la
reacción.
La reacción en la remolacha se procede
siempre y cuando se adicione calor
proveniente del baño maría en este caso
se forma el gluconato de cobre o
gluconato cúprico que es una
salorgánica, depositándose en el fondo
del recipiente el óxido cuproso de color
rojizo y la solución sobrante es el
agua.Esta prueba plantea la reacción de
identificación de monosacáridos, debido
a que el reactivo de Barfoed es
débilmente ácido y solo puede ser
reducido por monosacáridos(Macarulla y
Goñi, 2002).
La prueba de bial arroja positivo ya que
El reactivo de Bial contiene orcinol
disuelto en HCl concentrado. El ácido
provoca la formación del furfural y el
orcinol se condensa con este último para
producir cromógenos de color verde-azul.
(Pavía 1976)
En la prueba con Lugol, Cuando la
reacción da negativason monosacáridos
o Disacáridos no reductores. Según
(Fernández 2015) el lugolidentifica
polisacáridos como los almidones,
glucógeno y ciertas dextrinas, formando
un complejo de inclusión termolábil que
se caracteriza por formar un color azul
oscuro a negro.El glucógeno forma una
coloración parda rojiza, debido a que es
parcialmente hidrolizada.
CONCLUSIONES
La reacción de Molish es un método
cualitativo la cual se utiliza para
poderobservar la presencia de
carbohidratos en una muestra
desconocida y a su vez poder determinar
si en la muestra se forma de manera
inmediata el precipitado con el óxido
cúprico (Cu2O) tendríamos un
monosacárido y si se tarda un tiempo
más prolongado en formar el precipitado
se trataría de un disacárido.
Mediante la reacción de Benedict
podemos identificar azúcares reductores
y comprobar que la reducción que se
lleva a cabo es por el efecto del grupo
aldehído del azúcar (CHO) en forma de
Cu+ y el nuevo ion se observa a modo de
precipitado de color rojo anaranjado o
amarillo ladrillo que corresponde al óxido
cuproso (Cu2O)
Se analizó e identificó las características
de la reacción de Seliwanoff, ya que esta
reacción sólo reconoce cetosas y se
produce una coloración dependiendo de
la cantidad de concentración del azúcar.
Las muestras de glucosa, fructosa,
maltosa y galactosa son azúcares
reductores, ya que se formó un
precipitado de color rojo ladrillo (óxido
cuproso) en la muestra de Fehling.
BIBLIOGRAFIA.
Harrys (2004). Metabolismo glusidico
I. Principales rutas metabolics y su
control. En devlin TM. Bioquímica 4
edición. Editorial reverte (Barcelona,
España)
Macarulla, J; y Goñi, F; (2002).
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bioquímica estructural”. Barcelona:
Reverté S.A.
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Recuperado de:
https://es.slideshare.net/mobile/Leidy
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Pavía (1976) reacción de bennedict
escuela de bioquímica.recuperado
de:
https://sites.google.com/site/laboratori
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Fernández (2015) reactivo de fehling
Universidad CEU. Recuperado de:
https://www.google.com/amp/s/blog.uchc
eu.es/eponimos-cientificos/reactivo-de-
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Ipiales (2017) prueba de barfoed,
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alcantar . Recuperado de: a bioquimica-
identificacion-de-azucares PDF