Las bacterias son los organismos mas abundantes en la naturaleza y habitan en
todo tipo de ambientes, incluido en nuestro propio cuerpo y materiales que usamos cotidianamente. Los microorganismos son aquellos seres vivos más diminutos que únicamente pueden ser apreciados a través de un microscopio. En este extenso grupo podemos incluir a los virus, las bacterias, levaduras y mohos que proliferan por el planeta tierra. Los microorganismos son los seres más primitivos y numerosos que existen en la Tierra, colonizan todo ambiente: suelo, agua y aire, participan de forma vital en todos los ecosistemas y están en interacción continua con las plantas, los animales y el hombre. Los microorganismos son clave para el funcionamiento de los sistemas biológicos y como se menciono anteriormente al proliferar hay un mantenimiento de la vida sobre el planeta, ya que participan en procesos metabólicos, ecológicos y biotecnológicos de los cuales dependemos para sobrevivir y enfrentar los retos del futuro. En microbiología se usan métodos o técnicas llamadas tinción de gram, las cuales hace mas de un siglo que han ayudado a resolver problemas como a resolver problemas de etiología microbiana. La tinción es un proceso por el cual las moléculas de un colorante se absorben a una superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico. Dado que las bacterias son casi incoloras, no presentan contraste con el medio en el cual se encuentran suspendidas y no pueden observarse claramente sin algún colorante previo. En esta practica los colorantes empleado fueron el cristal violeta, Yodo-Lugol, y Safranina. De acuerdo a la reacción que ocurre se tiene diferente tipos de tinción. Simple: el colorante utilizado sirve solo para denotar la morfología celular. Diferencial: el colorante utilizado pone de manifiesto diferencias entre células bacterianas o entre partes de una misma célula, estas técnicas utilizan más de un colorante o bien ciertos reactivos complementarios para la tinción. En Microbiología todas las tinciones se realizan a partir de colorantes de microorganismos extendidas en un portaobjetos (frotis), secadas y fijadas. La fijación, el cual es un procedimiento que permite preservar estructuras celulares, se puede llevar a cabo con como la fijación por calor que asi es como lo realizamos en esta practica. La fijación por calor es la más utilizada para la observación de bacterias. Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Para este frotis ya mencionado lo que se hace es sobre un portaobjetos de vidrio, esterilizado y seco, se coloca una gota de agua, se usa una asa bacteriológica la cual se pasa por la flama del mechero hasta que se encuentre en un color rojo vivo. Se toma un poco de la muestra colonial y y se extiende. Una vez que el asa ha tocado la superficie del portaobjetos, ya que no está estéril, ya no puede ser empleado para inocular los medios de cultivo. Una vez realizado el frotis y fijadas las bacterias, las preparaciones pueden ser observadas al microoscopio. El microscopio empleado para poder observar estas bacterias fue el microscopio compuesto. Las partes de un microscopio se pueden clasificar entre las que pertenecen a su sistema mecánico y las que pertenecen a su sistema óptico. Este microscopio se empleo para que nos permitiera y examinar cosas que no se distinguen a simple vista, como lo fueron los cultivos que observamos.
Analisis de resultados
Tabla 1. Clasificacion y descripción de las observaciones en una tinción simple.
Microorganismo Cristal Violeta Safranina Escheril coli Color violeta, Todas las 24 hrs la mayoría bacterias muy esta agrupado agrupadas, en grandes color rosado. números y en forma de cocos. Escherichia coli Color violeta, Se muestra en 1 semana se puede grupos de observar una bacterias sin cantidad embargo mayor a algunas mas diferencia de dispersas de la muestra de estos grupos 24 hrs. Unas muy juntas y otras mas separadas. Bacillus subtilis Se puede Forma de 24 hrs notar bacilos mas claramente la oscuras, en su forma del mayoría están bacilo de la agrupadas. bacteria. Bacillus subtilis Se observa Muy disperso 1 semana una red de en forma de bacilos, algo bacilos. dispersos en forma de bacilos color violeta.
En la tabla anterior se describe características de los resultados que se observaron
al teñir las bacterias de estos microorganismos mencionados en la tabla 1.
Tabla 2. Resultado de observaciones con Tincion de Gram.
Microorganismos Coloración/Forma Gram + o Gram - Escherichia coli Color rosa Gram - 24 hrs (Safranina) Miles de estreptococos que se pueden notar. Hay parte donde no se notan bacterias y otras donde se ve muchas. Escherichia coli Color rosa. Gram - 1 semana En forma de bacilos separados entre si, se puede notar su membrana. Bacillus subtilis Microorganismos Gram - 24 hrs alargados, se puede observar diferentes tonalidades de rosa Bacillus subtilis Gram- 1 semana
Conclusion Caldera Nallely
Uno de los instrumentos que han contribuido al avance de estudios microobiologicos es el microoscopio, pues como lo vimos en la practica, nos permitio observar color y forma de los frotis de los microorganismos. Para esto se tuvo que hacer un proceso tincion observar preparaciones en microoscopio