Enzimas III:

inhibición
y
regulación
Dra. Claudia Perla
Ciclo I/2019
1
2
Valor del mes: La libertad
Capacidad de
la conciencia
para pensar y
obrar según
la propia
voluntad de la
persona.
 Objetivo
Explicar el efecto de las dos grandes clase
de inhibidores sobre la velocidad de las
reacciones enzimáticas, la regulación
enzimática y la importancia de las enzimas
en clínica en forma oral o escrita según clase
bibliografía, laboratorio y discusión de grupo

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 CONTENIDO
1. Definir inhibidores y clasificarlos
a) Inhibidores irreversibles, reversibles
b) Reversibles Competitivos y no competitivos
3. Definir regulación enzimática y clasificar a las enzimas reguladoras
4. Definir enzimas reguladoras
5. Explicar el mecanismo de acción de las enzimas alostéricas y de las
enzimas moduladas covalentemente
6. Describir la activación de zimógenos
7. Definir Isoenzimas y explicar su origen
8. Evaluar a través de algunos ejemplos la importancia de las enzimas
en el diagnóstico clínico.

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Factores que modifican la
velocidad de las reacciones
Enzimáticas

[Cofactores]
[sustrato]
[Enzima]
Inhibidores
Cambios en el
pH y T° 6
1) Efecto del pH y de la temperatura

7
Efecto
2) Efectode
delala[Enzima]
[Enzima]

8
Efecto de la [sustrato]
Efecto de la [Sustrato]
(Michaelis-Menten)

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 Concepto de Km
Km (Constante de Michaelis) = cantidad de sustrato requerido
para que una enzima alcance la MITAD de su velocidad
máxima ( ½ Vmax).
La Km indica la
Vmax afinidad de una
VELOCIDAD DE REACCIÓN

enzima por su
½
sustrato:
Vmax - a mayor Km menor
afinidad;
-a menor Km mayor
Km [SUSTRATO] es la afinidad
10
 4. Efectodedela[Cofactores]
4. Efecto [cofactor]
SATURACIÓN

[COFACTOR]

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 Inhibidores Enzimáticos

Disminuyen la Pueden ser No confundir

ACTIVIDAD de Reversibles e con agente
las Enzimas Irreversibles desnaturalizador

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 Reversibles: Se unen Competitivos
débilmente a la enzima,
por lo que el complejo
De acuerdo a enzima-inhibidor se No
la fuerza con disocia rápidamente Competitivos
que se unen a
las enzimas,
los inhibidores Irreversibles: Se unen
se clasifican fuertemente a la
así enzima, a menudo
mediante enlace
covalente; su
disociación es muy
lenta 13
 Inhibición Reversible: Competitiva
 En la inhibición competitiva, la enzima puede unirse al sustrato
(formando el complejo ES) o al inhibidor (EI) pero no a ambos.
 Usualmente se unen reversiblemente a la enzima, y son
desplazados si se adiciona suficiente cantidad de sustrato.

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 Inhibidor Compite
con un S
Competitivo por unirse al
sitio activo
de la E

Se
parece
mucho al
S
Incrementa la
Km, no
afecta la
Vmáx
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Inhibidores Competitivos

16
Inhibición Reversible: COMPETITIVA
(Michaelis-Menten)
VELOCIDAD DE REACCIÓN

Normal Con Inhibidor COMPETITIVO

La Km incrementa,
pero la Vmax se
mantiene

Km1 [SUSTRATO]
Km2
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 Uso de los
Inhibidores
Competitivos en la
medicina

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 Inhibidor
Reversible: El Inhibidor
se une a la E
No por un sitio
diferente al
Competitivo sitio activo

No afecta la
Km,
Disminuye la
Vmáx
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 Análisis cinético
Análisis cinético deinhibición
de la la Inhibición
no
competitiva
Reversible No competitiva
La Km se mantiene,
VELOCIDAD DE REACCIÓN

Normal pero la Vmax

Con Inhibidor NO-COMPETITIVO disminuye

Km1 = Km2 [SUSTRATO]

20
Inhibidor competitivo y No
Competitivo

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 Resumen: Efecto cinético de inhibidor
competitivo y no competitivo

Tipo de Km Vmáx
inhibición
Competitivo Aumenta Igual
No Igual disminuye
competitivo

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 Regulación
Enzimática
Algunas razones por lo que la
regulación enzimática es
necesaria
1 .Mantenimiento de un estado
ordenado
2 .Conservación de energía
3 Respuesta a cambios
ambientales
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 Regulación
REGULACIÓN Enzimática
ENZIMÁTICA

CONTROL ACTIVACIÓN REGULACIÓN REGULACIÓN

GENÉTICO PROTEOLÍTICA COVALENTE ALOSTÉRICA

zimógenos fosforilación “Feedback”

POSITIVO NEGATIVO
(Activador) (Inhibidor)
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 Control genético ó síntesis de enzimas
- Regulación de la
velocidad de síntesis de las
enzimas (inducción o
represión)
- Enzimas que únicamente
se requieren en una
etapa del desarrollo o
bajo condiciones
fisiológicas selectas
- Lenta (horas o días)
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 2. Activación PROTEOLÍTICA
 ZIMÓGENOS: Proenzimas sintetizadas en estado INACTIVO.
Al sufrir una PÉRDIDA de uno o más péptidos, la enzima se
convierte en su forma activa

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 3. MODULACIÓN COVALENTE

La actividad de muchas E está

regulada por acción de otras
enzimas Ej:
La glucógeno fosforilasa hepática,
fosforilada es activa, (la fosforila
una proteína cinasa )
Desfosforilada es inactiva (la
desfosforila una fosfatasa)

ACTIVA= fosforilada
INACTIVA =Desfosforilada 27
 4. Regulación alostérica

 Existen enzimas cuya acción enzimática es

afectada por la interacción con un EFECTOR
ALOSTÉRICO.
 Efector Alostérico:
o Molécula que se une a la enzima en un sitio
alostérico
o Puede FAVORECER la reacción (efector positivo)
o Puede DESFAVORECER la reacción (efector
negativo)

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 E. Alostéricas

E. SIMPLE

E. Alostérica

Las enzimas simples cumplen la cinética de Michaelis –

Menten , las E alostéricas cumplen la cinética sigmoidal 29
 4. Regulación Alostérica cont.
Efectores homótropos: Cuando el propio sustrato actúa como
efector.
Efectores heterótropos: el efector es diferente del sustrato:
 INHIBICIÓN POR FEEDBACK (el último producto de una ruta
metabólica inhibe a alguna de las primeras enzimas de la
ruta para detener o reducir la vía metabólica)
 Usualmente, los inhibidores de la vía afectan a las enzimas
MARCAPASOS (Aquellas enzimas que determinan la
velocidad de toda la vía).

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 Características Enzimas alostéricas
1. Las Enzimas suelen contar con más de una cadena
polipeptídica
2. Contienen dos cadenas centros funcionales separados uno
de ellos regulador y otro catalítico
3. Pueden ser objeto de control positivo o negativo por uno o
mas factores
4. Poseen efectores que pueden ser coenzimas, S o
Productos
5.Sufren cambios de conformación o de la cooperatividad entre
los polipéptidos que las componen , al actuar sobre ellas los
efectores adecuados
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 ISOENZIMAS
 Son versiones distintas de una determinada enzima, las
cuales catalizan la misma reacción en diferentes tejidos.
 Se diferencia por la secuencia de AA entre ellas
 Ejemplos:
 -Lactato deshidrogenasa (5 isoenzimas)
 -Creatina cinasa (MM, MB, BB)
 -Fosfatasas: F. ácida y F. alcalina
 -Amilasa: salival (S) y pancreática (P)

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Importancia de las
Isoenzimas: Ayudan al
diagnóstico clínico de
algunas
enfermedades. Una
elevación de una
determina ISOENZIMA
en plasma puede dar
un indicativo del origen
de la patología.
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34