Uso de Microorganismos como

Fuente de Nuevos Medicamentos

 Biotecnología
 Se puede definir como el uso de
organismos y enzimas para la
producción de materiales útiles al
hombre. Ejm: vino, queso, antibióticos.

 En 1973 se descubrió la técnica del ADN

recombinante (Stanley Cohen). Ejm:
producción de Insulina humana a partir
de Escherichia coli.
 En biotecnología se pueden usar:

- enzimas aisladas
- microorganismos
- cultivo celular
- animales, Ejm: vacas que producen
ciertas proteínas (foreign proteins) en
su leche
 Farmacobiotecnología
 Biotecnología usada para la obtención
de nuevos fármacos.
 Unos 2500 años atrás la gente usaba
pan enmohecido para el tratamiento de
heridas infectadas.
 A comienzos del Siglo XX se usaba
Piocinasa: una mezcla de metabolitos
extraídos de Pseudomonas aeruginosa.
 Piocinasa se considera el "primer
antibiótico comercial".
 No dio buenos resultados porque la
mezcla no estaba estandarizada, los
resultados no eran reproducibles o
causaban toxicidad.
 Luego en 1940 se descubre la penicilina
y empieza el boom de la investigación en
microorganismos: primero para la
obtención de antibióticos y luego para
otras actividades biológicas.
 Se investiga mucho los microorganismos
del suelo.
 Los países que más investigan son
Japón y USA.
 Entre los años 1953-1970 se obtuvieron
drogas a partir de los siguientes
microorganismos:
- 85% de las drogas fueron producidas
por bacterias Micromonospora y
Streptomyces.
- 11% producidas por hongos:
Penicillium, Cephalosporium,
Aspergillus.
- 4% producidas por otras bacterias:
Bacillus, etc.
 Se investigó mucho a los organismos
del suelo, pero poco a poco, la
diversidad molecular iba disminuyendo
(se aislaban las mismas moléculas).

 Actualmente se buscan otras fuentes.

Ejm: microorganismos marinos.
 Procedimiento general para el
aislamiento de Microorganismos

 Muestra de suelo:

Tomar unos 5 g de muestra, en forma

estéril, agregar unos 100 ml de agua
estéril. Mezclar por 20 minutos y tomar
diluciones de la suspensión y plaquear
en diferentes placas Petri conteniendo
diferentes medios de cultivo. Incubar.
 Muestra de plantas:

Cortar la parte de la planta con tijeras estériles,

tomar 2 g y agregarle agua estéril. Tomar una
dilución y plaquear.

Alternativa: Tomar un algodón o hisopo estéril

y pasarlo sobre las hojas. Luego plaquear el
hisopo.

También se puede cortar las hojas en forma

estéril y ponerlas directamente sobre el
medio de cultivo.
 Muestra de Agua:

Filtrar/esterilizar la muestra de agua. Usar

un filtro de 0.45 mm.

Queda un sedimento. Agregar un poco de

agua estéril y pasar a otro recipiente.
Hacer las diluciones respectivas y
plaquear.
Para los 3 casos:

Se incuba y se hacen crecer los

microorganismos.

Hay que variar parámetros físicos y

químicos del medio o agregar agentes
químicos (o antibióticos) para promover
el crecimiento de uno o algunos
microorganismos sobre los otros.
 Métodos Físicos:

Ejm:

- Cambios de Temperatura:
bacterias termófilas (> 55 oC)
bacterias no termófilas (0 – 5 oC)

- Cambios de pH:
bacterias acidófilas (pH < 5)
 Métodos Químicos:

Ejm: variación del contenido del medio

- Nitrógeno inorgánico: hace crecer

bacterias fijadoras de nitrógeno.
- Azufre inorgánico : hace crecer bacterias
fijadoras de azufre.
- Talio: favorece el crecimiento de
Mycoplasma
 Selenio: favorece el crecimiento de
Salmonella.
 Trifenilmetano: Favorece el crecimiento
de bacterias gram positivas.
 Feniletilalcohol: Favorece el crecimiento
de bacterias gram negativas.
 Nistatina, ciclohexamida: inhiben el
crecimiento de hongos.
 Antibióticos específicos para el
crecimiento de bacterias.
Existen cientos de recetas de medios de
cultivo. Muchos se venden listos.

Tratar de que el medio sea muy parecido a

las condiciones de donde se tomó la
muestra.

Cuando se tiene crecimiento de varios

microorganismos, se puede hacer
separación por métodos mecánicos.
 Se cree que hasta el momento se han
aislado sólo una décima parte de los
micoorganismos existentes.

 Menos del 1 % se han identificado o

caracterizado.

 Según Hawksworth (1991), se han

identificado 70000 especies de hongos,
de las 1.5 x 106 especies que existen.
 Biotransformaciones usando
Microorganismos
 Cuando la estructura de un compuesto (o
droga) se modifica por la intervención de un
microorganismo (reacción enzimática).

 La metodología es relativamente simple:

- Cultivo del microorganismo en un medio
de cultivo determinado.
- Cultivo del microorganismo en presencia
del compuesto a biotransformar.
- Se hacen las cromatografías respectivas
para observar si hubo o no biotransformación.
 Las biotransformaciones que realizan los
microorganismos son muy parecidas a las del
metabolismo humano, sobretodo cuando se
trata de hongos, ya que estos poseen enzimas
muy parecidas a las humanas.

 Uno de los usos de la biotransfomación es

precisamente el estudio de metabolismo de
drogas.

 Otro de los usos es en la síntesis química.

 Metabolismo humano del Diazepam

H3C H
O O
N N

N Cl N
Cl

Diazepam Nordiazepam

H3C H
O O
N N
OH OH
Cl N N
Cl

Oxazepam
Temazepam

Aspergillus terreus y Beauveria bassiana también producen los mismos derivados

por biotransformación.