UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZAN

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

Bioquímica Agroindustrial
Docentes: Ing. Juan Villanueva Tiburcio; Ing. Cesar Cueto Rosales

PRÁCTICA N° 2
INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS POR ATRAPAMIENTO

INTRODUCCIÓN
La inmovilización de enzimas es un proceso en el que se confina o localiza a la enzima
en una región definida del espacio, para dar lugar a formas insolubles que retienen su
actividad catalítica y que pueden ser reutilizadas repetidamente (Arroyo, 1998). Por su
parte Fajardo-Ochoa et al. (2011), mencionan que el termino inmovilización de células
y enzimas se refiere a células y enzimas físicamente confinadas o localizadas en una
cierta región definida en el espacio reteniendo sus propiedades y actividades catalíticas.
Algunos métodos de inmovilización lo menciona.
Los métodos de inmovilización se pueden clasificar en Retención física y Unión
química.
En la Retención física, tenemos al Atrapamiento, Inclusión en membranas
(Microencapsulación, Reactores de membrana). En la retención química tenemos unión
a soportes que pueden ser a) inorgánicos naturales (arcilla, bentonita, piedra pómez) o
inorgánicos manufacturados (óxido de metales, vidrios de tamaño de poro controlado,
cerámicas) y b) orgánicos naturales (polisacáridos o proteínas fibrosas) o sintéticos
(poliolefinas, polímeros acrílicos, poliamidas). La Unión iónica: se utilizan
intercambiador es orgánicos de iones e inorgánicos (sílice). Quelación o unión metálica:
utiliza metales de transición, normalmente titanio, como una forma de activar la
superficie del soporte. Unión covalente: es el método de inmovilización más utilizado
en la industria.

MATERIALES -Eliminar el aceite y lavar los pellets

- Cultivo puro de levaduras varias veces con agua destilada.
- Agar Agar en suspensión al 2.5 % -Retirar en recipientes apropiados los
licuado a 45°C pellets de células inmovilizadas para la
- Aceite refrigerado operación de actividad
- Hipodérmicas descartables de 10 mL
- Buffer fosfato 0.1M pH 6.8
- Agua destilada

PROCEDIMIENTO
-Preparar una suspensión de levaduras
sobresaturada.
-Agregar 5 mL de la suspensión a 25
mL de agar agar mantenido licuado a 45
°C. -Mantener suspensión de agar-
levadura en baño de agua a 45 °C .
-Cargar la suspensión de agar-levadura
en una jeringa hipodérmica de 10 mL y
en forma lenta y uniforme gotear en un
recipiente de diámetro mediano
conteniendo aceite refrigerado a 10 °C.
-Observar la formación de pellets en el
fondo del recipiente con aceite.