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Informe N 12
Informe N 12
MARCOS
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
E. A. P. GENÉTICA Y BIOTECNOLOGÍA
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MÉTODO
En la práctica actual se desea evaluar el efecto de dos fitohormonas (ABA y AG3) sobre
la germinación de semillas de Lens culinaris y el efecto de su interacción, para
comprobar si el AG3 puede revertir el efecto del ABA.
Selección de semillas y desinfección
Cada grupo escogió las semillas de lentejas a usar de un solo grupo de semillas para
evitar mayor heterogeneidad en los resultados. Se escogieron las semillas de un color
marrón claro, evitándose las verdosas, también se quitó las posibles contaminaciones
como pequeñas piedras.
Las semillas escogidas fueron enjuagadas primero con agua de caño y luego con lejía al
10% durante 10 minutos. Se enjuagó tres veces con agua destilada para remover los
restos de lejía.
Etapa Imbibición
Se separaron 2 grupos de semillas (de 80 semillas cada grupo) y se colocaron en beakers
con 2 tratamientos: agua destilada y disolución de 100 µM de ABA, por 1 hora.
El experimento fue realizado por duplicado, por lo que se tienen 80 semillas para cada
repetición, y por ende 20 para cada tratamiento.
Etapa de Germinación
Se repartieron 20 semillas en cada placa Petri que contenía un pedazo de papel toalla en
su base previamente cortado y posicionado, y se aplicó cada tratamiento.
Fueron 4 tratamientos: H2O, ABA, AG3 y ABA-AG3. Es decir, cada placa Petri con
papel toalla contenía 10 ml de cada solución y 20 lentejas.
Las semillas embebidas en agua fueron para los tratamientos H2O y AG3 y las
embebidas en ABA fueron para los tratamientos ABA y ABA-AG3.
Incubación
Se incubaron las placas Petri a oscuridad en una estufa a 25°C y se contó la cantidad de
semillas germinadas tras lapsos de 24, 48 y 72 horas.
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RESULTADOS
Luego de la instalación del experimento, se tuvo que evaluar el número de semillas que
iban germinando durante 24h, 48h y finalmente 96h, se obtuvieron los valores
representados en las tablas
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Tabla 1.2
EXPERIMENTO ABA-AG3
n°semillas
% semillas germinadas
mesa TRAT # Sem. germinadas
24h 48h 96h 0.00 24.00 48.00 96.00
1 AGUA 20 11 15 16 0.00 0.55 0.75 0.80
1 AGUA 20 9 13 14 0.00 0.45 0.65 0.70
2 AGUA 20 13 17 19 0.00 0.65 0.85 0.95
2 AGUA 20 13 15 18 0.00 0.65 0.75 0.90
3 AGUA 13 10 12 12 0.00 0.50 0.60 0.60
3 AGUA 12 9 12 12 0.00 0.45 0.60 0.60
Total 105 65 84 91 0.00 0.62 0.80 0.87
1 AG3 20 10 13 13 0.00 0.50 0.65 0.65
1 AG3 20 13 15 16 0.00 0.65 0.75 0.80
2 AG3 20 15 19 20 0.00 0.75 0.95 1.00
2 AG3 20 16 17 20 0.00 0.80 0.85 1.00
3 AG3 13 8 10 12 0.00 0.40 0.50 0.60
3 AG3 13 11 13 13 0.00 0.55 0.65 0.65
Total 106 73 87 94 0.00 0.69 0.82 0.89
1 ABA 20 2 10 12 0.00 0.10 0.50 0.60
1 ABA 20 2 8 9 0.00 0.10 0.40 0.45
2 ABA 20 4 11 16 0.00 0.20 0.55 0.80
2 ABA 20 4 16 20 0.00 0.20 0.80 1.00
3 ABA 20 5 15 18 0.00 0.38 1.15 1.38
3 ABA 20 3 14 15 0.00 0.25 1.17 1.25
Total 120 20 74 90 0.00 0.17 0.62 0.75
1 ABA-AG3 20 3 16 17 0.00 0.23 1.23 1.31
1 ABA-AG3 20 2 11 14 0.00 0.15 0.85 1.08
2 ABA-AG3 20 7 12 16 0.00 0.35 0.60 0.80
2 ABA-AG3 20 3 12 17 0.00 0.15 0.60 0.85
3 ABA-AG3 20 5 16 18 0.00 0.25 0.80 0.90
3 ABA-AG3 19 6 16 18 0.00 0.32 0.84 0.95
Total 119 26 83 100 0.00 0.22 0.70 0.84
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Tabla 1.3 de Comparaciones múltiples – SPSS
HSD de Tukey
Variable (I) (J) Diferencia de Error Sig.
dependiente Tratamiento Tratamiento medias (I-J) típico
AG3 -1,33333 1,22701 ,701
*
Agua ABA 7,50000 1,22701 ,000
*
ABA-AG3 6,50000 1,22701 ,000
Agua 1,33333 1,22701 ,701
*
AG3 ABA 8,83333 1,22701 ,000
*
ABA-AG3 7,83333 1,22701 ,000
horas24 *
Agua -7,50000 1,22701 ,000
*
ABA AG3 -8,83333 1,22701 ,000
ABA-AG3 -1,00000 1,22701 ,847
*
Agua -6,50000 1,22701 ,000
*
ABA-AG3 AG3 -7,83333 1,22701 ,000
ABA 1,00000 1,22701 ,847
AG3 -,50000 1,57938 ,989
Agua ABA 1,66667 1,57938 ,720
ABA-AG3 ,16667 1,57938 1,000
Agua ,50000 1,57938 ,989
AG3 ABA 2,16667 1,57938 ,530
ABA-AG3 ,66667 1,57938 ,974
horas48
Agua -1,66667 1,57938 ,720
ABA AG3 -2,16667 1,57938 ,530
ABA-AG3 -1,50000 1,57938 ,779
Agua -,16667 1,57938 1,000
ABA-AG3 AG3 -,66667 1,57938 ,974
ABA 1,50000 1,57938 ,779
AG3 -,50000 1,83258 ,993
Agua ABA ,16667 1,83258 1,000
ABA-AG3 -1,50000 1,83258 ,845
Agua ,50000 1,83258 ,993
AG3 ABA ,66667 1,83258 ,983
ABA-AG3 -1,00000 1,83258 ,947
horas96
Agua -,16667 1,83258 1,000
ABA AG3 -,66667 1,83258 ,983
ABA-AG3 -1,66667 1,83258 ,800
Agua 1,50000 1,83258 ,845
ABA-AG3 AG3 1,00000 1,83258 ,947
ABA 1,66667 1,83258 ,800
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Según la tabla 1.3 de comparaciones múltiples obtenidas mediante SPSS 21.0 se tiene
que en el lapso de 24 horas no existe una diferencia estadísticamente significativa entre
los tratamientos de agua y la hormona AG3 en las raíces de Lens culinaris, así como
para la comparación entre ABA y ABA-AG3.
Para el lapso de 48 horas se tiene que no existe una diferencia significativa
estadísticamente ente ninguno de los tratamientos, de la misma manera sucede para el
lapso de 96 horas.
1.00
0.90
0.80
Frecuencia Germinación
0.70
0.60
Agua
0.50
AG3
0.40
ABA
0.30 ABA-AG3
0.20
0.10
0.00
0 24 48 72 96
Horas de Tratamiento
La gráfica 1.1 muestra que la frecuencia de germinación llegó a ser relativamente mayor
con respecto a los demás tratamientos realizados; sin embargo mediante la prueba
realizada con SPSS sabemos que no existe diferencia estadísticamente significativa,
exceptuando parte del tratamiento a las 24horas.
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DISCUSIÓN
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Durante el protocolo de regulación de la germinación de semillas de Lens culinaris, la
etapa de imbibición es relevante para la activación del metabolismo y la respiración, la
producción de proteínas, el transporte de sustancias de reservas, además de la
elongación del embrión y ruptura de la testa, de la cual sale la radícula, como principal
indicio de germinación (4). La imbibición se genera por las diferencias de potencial,
principalmente el mátrico, entre la semilla y la solución a la que está expuesta, el agua
claramente como solvente.
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El uso de fitohormonas y otros compuestos para aumentar el porcentaje de germinación
no es algo nuevo, investigaciones en diferentes modelos vegetales indican el uso de
AG3, KNO3, etc. Se ha visto incremento del 23% sobre el porcentaje de germinación
normal a los 14 días en un cultivos de Capsicum chinense (chili habanero) a una
concentración de 500 mg/L de AG3, con un incremento de materia seca del 40% (8).
Por otro lado, se destaca además el empleo de la fitohormona AG3 para restaurar el
porcentaje de germinación normal frente alguna acción inhibitoria (como exposición a
luz de onda rojo lejano o a ABA), aunque en esta experiencia no presentara una
restauración significativa, quizá por falta de exposición a luz de onda rojo lejano
precisamente, como se ha reportado (pues no presenta efecto la hormona en oscuridad)
(9).
BIBLIOGRAFÍA
1. Hojjat SS, Galstayan M. Effects of different temperatures and duration on germination of
Lentil (Lens culinaris Medik.) seeds. Russ Agric Sci [Internet]. Allerton Press, Inc.; 2012
Mar 28;38(2):101–5. Available from:
http://www.springerlink.com/index/10.3103/S106836741202019X
2. Canadian Food Inspection Agency. The Biology of Lens culinaris Medikus (Lentil).
2014; Available from: http://www.inspection.gc.ca/plants/plants-with-novel-
traits/applicants/directive-94-08/biology-documents/lens-culinaris-medikus-lentil-
/eng/1330978380871/1330978449837#b1
3. Thavarajah D, Thavarajah P, Vial E, Gebhardt M, Lacher C, Kumar S, et al. Will
selenium increase lentil (Lens culinaris Medik) yield and seed quality? Front Plant Sci
[Internet]. Frontiers; 2015 May 19;6:356. Available from:
http://www.frontiersin.org/Plant_Nutrition/10.3389/fpls.2015.00356/abstract
4. Suárez D, Melgarejo LM. I. BIOLOGÍA Y GERMINACIÓN DE SEMILLAS Marco
conceptual.
5. Cohn MA. Seed development, dormancy and germination. Annual Plant Reviews,
Volume 27. Ann Bot. 2008 Aug;102(5):877–8.
6. Smýkal P, Vernoud V, Blair MW, Soukup A, Thompson RD. The role of the testa during
development and in establishment of dormancy of the legume seed. Front Plant Sci.
2014;5:351.
7. Carrillo Barral N. Influencia del nitrato, ácido abscísico (ABA) y giberelinas (GA) en la
transición dormición germinación de semillas de Sisymbrium officinale (L.) Scop.
sometidas a “post-maduración.” 2016.
8. Villegas-Torres OG, Domínguez-Patiño ML, Acosta-Durán CM, Sotelo-Nava H, López-
Gómez JD, Flores-Sánchez G. Importance of the Role of Gibberellic Acid and Potassium
Nitrate in Seed Germination Habanero. J Chem Chem Eng. 2013;7:145–53.
9. Schopfer P, Plachy C, Frahry G. Release of Reactive Oxygen Intermediates (Superoxide
Radicals, Hydrogen Peroxide, and Hydroxyl Radicals) and Peroxidase in Germinating
Radish Seeds Controlled by Light, Gibberellin, and Abscisic Acid. PLANT Physiol.
2001 Apr;125(4):1591–602.
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