EXTRACCION DEL

ADN
La extracción de ADN de una muestra celular
se basa en el hecho de que los iones salinos
son atraídos hacia las cargas negativas del
ADN, permitiendo su disolución y posterior
extracción de la celula. Se empieza por lisar
(romper) la célula mediante un detergente.

Lisis celular por

medio de
detergentes es
una manera más
suave de romper
la membrana
celular.
El detergente hace que la célula vacié su contenido
molecular en una disolución tampón en la que se
disuelve el ADN en ese momento, el tampón contiene
ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN,
carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor
proporción las proteínas asociadas al ADN, de gran
longitud, se habrán fraccionado en cadenas mas
pequeñas y separadas de el por acción del detergente.
Solo queda, por tanto, extraer el ADN de esa muestra de
tampón y detergente, para lo cual se utiliza alcohol
isoamílico
Realizar la extracción de ADN de tejidos animales y
vegetales y reflexionar sobre la simpleza de su
composición con sencillas técnicas.
Observar la estructura fibrilar del ADN.
Establecer la relación entre el proceso de extracción y
propiedades quimico-fisicas del ADN.
REACTIVOS. MATERIAL BIOLÓGICO

Agua destilada Cebolla grandes frescas

Sal común Kiwis
Bicarbonato sodico Sumo de piña o de
Detergente liquido o papaya
champú
Ajos
Alcohol isoamilico a 0°C
tomate
Alcohol de 96°
(isopropanol)
Alcohol de 90° (etanol)
 Preparar el tampón. Elegir la muestra que va a
Mantener en un baño de proporcionar el ADN. Cortar en
hielo. cuadritos

Retirar 5 ml del caldo molecular Mezclar en un recipiente limpio

a un tubo de ensayo y añadir
con pipeta 10 ml de alcohol
isoamílico enfriado a 0ºC.
5 ml de triturado celular con 10
Triturar la muestra con
ml del tampón frio y agitar
un poco de agua .
vigorosamente durante 2mn.
Filtrar el liquido.

Se introduce la punta de una varilla

estrecha hasta justo debajo de la
separación entre el alcohol y el tampón.
Remover la varilla hacia delante y hacia
atrás y poco a poco se irán enrollando los
fragmentos de mayor tamaño de ADN.

Añadir media cucharada pequeña de sal
en medio vaso de agua. Añadir un
chorro de líquido lavaplatos.
Añadir al vaso entre media y una
cucharada (2,5 ml) pequeña de la
solución de sal y líquido de lavaplatos.
Mueva la solución con una cucharilla
despacio para que no se forme espuma.
Observe el punto en que se juntan las dos
capas. Atrapar los hilos de ADN con un
gancho de vidrio cucharilla) sumergiéndolo
con cuidado a través de las dos capas.
Poner aproximadamente una cucharada
grande (20 – 25 ml) de agua clara en la
boca. Enjuagar la boca con fuerza
moviendo el agua de una mejilla a otra
unos 30 segundos. Escupe el agua en
un vaso de agua limpio.
Incorpore con cuidado una cucharada
pequeña de etanol (alcohol 96º para las heridas)
helado en el vaso. El alcohol se debe de echar de
forma que vaya resbalando por las paredes del
vaso.
Una vez cogido el ADN trasládelo a un
vaso con alcohol para verlo mejor y para
mantenerlo.
Se pudo comprobar mediante la técnica de extracción
y purificación el contenido de ADN, que las células
animales como vegetales contienen dentro de su
estructura una cantidad de información genética o
ADN.
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es
ADN puro ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de
ARN. Una extracción "profesional" se realiza añadiendo
enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden
que se unan al ADN.

El ADN se precipita en el
alcohol fuera de la solución, ADN
donde puede ser visto.
Además de permitirnos ver
el ADN, el alcohol separa el
ADN de otros componentes
celulares, los cuales son alcohol
dejados en la solución
acuosa.
 Zumo de piña y de papaya (contienen
una enzima, la papaína, que contribuye a
eliminar las proteínas que puedan
contaminar el ADN), está es una enzima
que corta las proteínas se trata de
romper lo que hay dentro de la célula
dejando intacto el ADN al añadir el
alcohol se consigue separar el ADN, que
tiene mas afinidad con el alcohol que con
el agua.

 La saliva arrastra las células del epitelio que recubre las paredes internas de
la boca y que se están desprendiendo constantemente. La sal común
(NaCl), con esa concentración, es un medio hipertónico que provoca el
estallido de las células y los núcleos, quedando libre las fibras de cromatina.
El detergente cumple la misión de formar un complejo con las proteínas
histonas y separarlas del ADN
Al realizar adecuadamente el procedimiento sobre
extracción del ADN pudimos observar la estructura
fibrilar del ADN.
A través de este experimento pudimos analizar que
cada uno de los ingredientes tiene su propia función.
La solución de sal y jabón sirve para romper la
membrana plasmática y nuclear e incluso la pared
celular. El detergente elimina las proteínas que
degradan el ADN. El alcohol etílico sirve para
precipitar el ADN.