Universidad Andina del Cusco

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

TEMA:
MEDIOS DE CULTIVO

ASIGNATURA: LABORATORIO MICROBIOLOGÍA MÉDICA

DOCENTE:

ALUMNO: GUTIERREZ QUISPE, Lizandro

2018

Cusco- Perú

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MEDIOS DE CULTIVO
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metabólica de estos es tan grande que la variedad de
medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal adecuado para
todos ellos, ni siquiera refiriendonos a las bacterias con exclusividad.

METODOLOGÍA PARA REALIZAR UN CULTIVO BACTERIANO

Antes de realizar un cultivo es necesario contar con todo el material debidamente

esterilizado, además de tener la precaución de trabajar junto a una fuente de calor que
impida tanto un contagio de la persona que procesa la muestra, así como una posible
contaminación del cultivo donde se va a trabajar.

Para realizar un cultivo bacteriano es necesario tomar el asa e introducirla al fuego para
que se esterilice, dejar enfriar unos segundos y tomar la muestra que se va a estudiar;
abrir la caja petri y flamear delante del mechero, con el asa impregnada de la muestra se
efectúa un pequeño inóculo en el borde, de allí se parte la primera estriación; luego de la
esquina de una de las estrías de la primera estriación se realiza la segunda estriación y
finalmente de la esquina de una de las estrías de la segunda estriación, se realiza la
tercera estriación, procurando hacer las estrías mucho más separadas de las dos
primeras, con la finalidad de separar las colonias que sean sembradas; se tapa la caja y
se lleva a la incubadora, colocándola de lado contrario al que se sembró y se la deja en
las condiciones apropiadas para el crecimiento de cada bacteria (temperatura, atmósfera,
potencial rédox, tiempo.)

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CLASIFICACION

Se pueden realizar distintas clasificaciones atendiendo a su estado físico, composición, el

uso al que se destinan:

SEGÚN SU ESTADO FISICO

Medios Líquidos.

Son los que se presentan en este estado, denominándose por ello caldos. Contienen los
nutrientes antes citados, con adición de algún tampón, capaz de mantener el pH
adecuado. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la obtención de una
suspensión bacteriana de una determinada concentración.

Ejemplos:

 caldo nutritivo
 caldo tioglicolato
 agua peptonada

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Medios Sólidos.

Se prepara añadiendo un agente gelificante a un medio líquido determinado. Los más

usados son gelatina y agar.

Este conjunto, convenientemente esterilizado, se vierte en una placa de Petri o en tubos.

Las exigencias nutritivas y las condiciones físico-químicas son similares a las de los
medios líquidos. Pero, a diferencia de ellos, presentan la posibilidad de obtener colonias
aisladas, siempre que la cantidad de inóculo esté suficientemente diluida. En este caso se
puede observar la existencia de colonias separadas unas de otras, y cada una constituye
un clon (conjunto de bacterias que provienen de una célula madre, con el mismo
patrimonio hereditario y las mismas características fisiológicas).

Ejemplo.:

 agar nutritivo y todos los medios de aislamiento primario y de identificación.

Medios Semisólidos.

Se preparan a partir de medios líquidos, agregando un agente solidificante en una

proporción menor que para preparar medios sólidos. Uno de sus usos es la investigación
de la movilidad de las bacterias.

Ejemplo.:

 agar cepa
 agar sulfhídrico-indol-movilidad (SIM)
 medios base para utilización de aminoácidos

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SEGÚN SU COMPOSICION

Se dividen en medios complejos, sintéticos y semisintéticos;

Medios complejos.

Son aquellos que contienen ingredientes cuya composición no

es exactamente definida, y por consiguiente no es
rigurosamente constante. Además, no se conoce exactamente
la proporción de cada uno de sus componentes. Esto tiene
ciertos inconvenientes en condiciones experimentales, donde
la reproducibilidad no podrá ser exacta. En la práctica estos
medios dan excelentes resultados y son los más empleados.

Ejemplo:

 caldo nutritivo.

Medios Sintéticos

Son aquellos que poseen exclusivamente componentes

químicos definidos (se conocen todos los componentes)
disueltos en agua destilada, donde la proporción de cada
uno de sus componentes es conocida exactamente. Entre
ellos se encuentran los medios mínimos, pues en ellos se
intenta comprobar el crecimiento de una bacteria
determinada, con muy pocos nutrientes. Los medios
definidos son ampliamente usados en investigación, pues a
menudo se quiere conocer qué está metabolizando el
microorganismo experimental.

Ejemplos:

 medio basal de sales y una fuente de carbono determinada.

Medios Semisintéticos.

Cuando alguno de sus componentes no tiene composición definida. En estos casos, se

añaden factores de crecimiento bajo la forma de un extracto orgánico complejo, como por
ejemplo, extracto de levaduras, peptona cono fuente de nitrógeno, glucosa como fuente
de carbono.

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SEGÚN AL USO AL QUE SE DESTINEN

Se dividen en: selectivos, diferenciales, enriquecidos, identificación y transporte:

Medios de Enriquecimiento.

Se basan en la libre competencia por los sustratos. Son

siempre líquidos que favorecen o permiten la
multiplicación de unas bacterias, inhibiendo parcialmente
la de otras. Pueden ser: de enriquecimiento propiamente
dichos, que se basan en las propiedades metabólicas del
microorganismo, o de enriquecimiento selectivo, en cuyo
caso se agrega un agente de selección que puede ser, un
colorante, un antibiótico, etc. Este agente de selección no
favorece el desarrollo del microorganismo a enriquecer,
sino que inhibe a la flora acompañante.

Ejemplos:

 caldo tioglicolato
 caldo infusión cerebro corazón (BHI)
 agua peptonada alcalina

Medios Selectivos (o Inhibidores)

Pueden ser sólidos o líquidos, a los que se les agrega uno o más agentes de selección.
Favorecen el crecimiento de microorganismos particulares, en los que la “selectividad” se
consigue alterando las condiciones físicas del medio o añadiendo compuestos químicos,
que sean nocivos para las bacterias cuyo crecimiento no interesa. Los medios inhibidores
pueden considerarse una variante más restrictiva de los medios selectivos. Las
posibilidades de selección son infinitas y existen decenas de medios selectivos especiales
disponibles.

Ejemplos:

 agar MacConkey
 Agar salmonella-shigella
 Agar Tayer Martin

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Medios Diferenciales.

Son siempre sólidos y se utilizan para diferenciar

colonias. Son medios que diferencian entre grupos
distintos de bacterias e incluso permiten una
identificación tentativa según las características
biológicas del microorganismo. A estos medios se les
agrega, por ejemplo, un indicador de pH que permite
diferenciar a microorganismos que fermentan un
determinado hidrato de carbono.

Ejemplos:

 El agar MacConkey (diferencial y selectivo)

 eosina azul de metileno
 Agar Mac Conkey-sorbitol
 El agar Xilosa-lisina-desoxicolato
 Agar cisteína lactosa deficiente en electrolitos

Medios Enriquecidos.

Son medios a los que se le agrega un nutriente extra (además de las sustancias nutritivas
normales, incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento de
microorganismos exigentes). Pueden ser líquidos o sólidos. En estos medios no crece un
determinado grupo de bacterias sino todas. Este enriquecimiento se hace por adición de
sangre u otros productos biológicos (sangre, suero, leche, huevo, bilis, líquido ascítico,
etc.) que aportan dichos factores. En ocasiones es posible añadir suplementos artificiales
a los medios para producir un enriquecimiento del mismo, por ejemplo Polivitex, Isovitalex,
etc.

Ejemplos:

 agar sangre
 agar chocolate
 caldo infusión
 cerebro-corazón
 caldo tristona-soya

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Medios de Identificación.

Son los medios destinados a comprobar alguna

cualidad específica que puede servirnos para
reconocer la identidad de un microorganismo. Estos
medios han de poseer los elementos necesarios para
asegurar el crecimiento de los microorganismos, el
sustrato específico que vaya a ser metabilozado y el
indicador que nos muestre el resultado.

Ejemplos.:

 agar citrato de Simons

 agar sulfhídrico-indol-movilidad (SIM)
 agar manitol salado
 agar triple azúcar hierro (TSI)

Medios de Transporte.

Se usan para transporte de aquellas muestras que no

van a procesarse de inmediato o que deban ser
trasladadas de un laboratorio a otro, y que puedan
contener microorganismos “fastidiosos” para su
desarrollo por lo que se debe impedir el
sobrecrecimiento de bacterias que colonizan con
frecuencia piel y mucosas. Estos medios son
generalmente semisólidos, tamponados y sin
sustancias nutritivas.

Ejemplos:

 Stuart-Amies
 Cary-Blair.

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