Metodología:

El análisis de la síntesis de aminoácidos en esta práctica se basa en la comparación del

origen de los aminoácidos mediante la marcación de los átomos de carbono que los
conforman. Los aminoácidos se sintetizan mediante una secuencia de reacciones que
dependen de sustratos carbonados y enzimas. Se agregó glucosa con carbono radiactivo,
única fuente de carbono en la muestra control, y además otro aminoácido u otra molécula
con carbono no marcado en las demás muestras. Como todos los aminoácidos tienen
carbono y en el experimento han de obtenerlo o bien de la glucosa radiactiva, o bien del
otro compuesto carbonado no marcado, se puede evidenciar si el compuesto no marcado
interviene en la síntesis de un cierto aminoácido o no, viendo la inhibición en la
radiactividad total observada. Este experimento solo funciona en una población joven y
sana que sintetice sin problemas todos sus aminoácidos necesarios, como la seleccionada;
puesto que de otra forma podrían alterarse los resultados debido a fallas en la síntesis y
no a la ausencia de vías. El grupo control acá marcó el 100% de la radiación a comprar
puesto que en esta muestra la única fuente de carbono era la marcada. En pocas palabras,
se usó método de exclusión en función de la participación activa de aminoácidos u otros
en la vía de biosíntesis de nuevos aminoácidos. Esta fue la mecánica usada en toda la
práctica.

Como conocimiento previo a la experiencia se sabía que los aminoácidos tienen un vínculo
muy fuerte con el ciclo de Krebs, ya que estos se pueden sintetizar a partir de
intermediarios del ciclo del ácido cítrico como el oxalacetato o el α-cetoglutarato por
transaminación. Además precursores del primer sustrato del ciclo de Krebs (Acetil-CoA), el
piruvato o el acetato, también entran en relación con la síntesis de aminoácidos sea por
propia transaminación o debido a que pueden llegar a convertirse en oxalacetato o α-
cetoglutarato. Precisamente por esto se evaluó al oxalacetato, α-cetoglutarato, piruvato y
acetato en el experimento además de los otros aminoácidos.
Conclusiones:
1. El primer cuadro de datos que se tiene es de difícil procesamiento puesto que los
valores varían en demasía sin tener una referencia parametrada, es por esto que
se pasó todos los datos en relación porcentual al valor obtenido en el control.
Recién al tener datos porcentuales se pudo analizar la información dada.
2. Al reconocer los aminoácidos competidores y estimar el porcentaje de inhibición
que ocasionaban sobre otro aminoácido, se hallaba una concordancia: cuanto más
sea utilizado el carbono del aminoácido competidor para conformar el "inhibido"
menor sería la radiactividad leída. Así los aminoácidos competidores solían tener la
mayor inhibición sobre ellos mismos.
3. La síntesis de aminoácidos desde 14C Glucosa, según lo observado en el
experimento, se reduce drásticamente (e incluso se anula) en presencia del
aminoácido en cuestión. Esto puede interpretarse mediado por un mecanismo de
regulación para evitar gastar energía innecesaria, puesto que la síntesis de
aminoácidos es siempre catabólica. Se puede sugerir que las enzimas involucradas
en la síntesis de un aminoácido sufren inhibición por producto final (el aminoácido
en cuestión).
4. Determinar los aminoácidos que terminaban una vía y los que no fue un paso
primordial. Esto se pudo deducir al ver aminoácidos que únicamente inhibían la
radiactividad sobre ellos mismos, de modo que no entraban a un proceso donde
pudieran transformarse en otros, en base a este conocimiento se seguía buscando
las conexiones cuando se trataba de un aminoácido no terminal.
5. Se vio que el aspartato inhibía la síntesis desde 14C Glucosa de: asp, thr, met, ile,
lys, glu, pro. Excluyendo al glutamato y a la prolina, que se sintetizan desde el α-
cetoglutarato relacionado con el aspartato mediante el ciclo de Krebs, se logró
postular el esquema de interrelación evaluando a la homoserina y a la treonina:
Ile
Thr
Homoserina
Met
Asp
Lys
6. Se vio que el glutamato inhibía la síntesis desde 14C Glucosa de: glu, pro, arg, asp,
thr. Excluyendo al aspartato y a la treonina, que se sintetizan desde el oxalacetato
relacionado con el glutamato mediante el ciclo de Krebs, se logró postular el
esquema de interrelación evaluando al semialdehído glutámico:
 Pro
SaGlu
Glu
Arg
7. Se vio que el serina inhibía la síntesis desde 14C Glucosa de: cys, ser, gly, ala, leu,
val. Se logró postular el esquema de interrelación evaluando a la valina y al
piruvato:

Ala

Piruvato
Gly Leu
Val
Serina

Cys

8. Se postuló, como hipótesis, que la serina podía ser un precursor irreversible del
piruvato, al evidenciar que de la serina y del piruvato se podían sintetizar la
alanina, valina y leucina; pero que del piruvato no se sintetizaba serina ni sus otros
derivados (glicina y cisteína). Lo mismo se postuló con respecto el aspartato y la
homoserina.
9. Se ve que los aminoácidos terminales utilizan menos el carbono no radiactivo,
sumándole a este detalle que por ejemplo el acetato inhibe un 40% los
aminoácidos de la familia del glutamato, pero solo un 17% a los aminoácidos de la
familia del aspartato, se puede sugerir que existe pérdida de carbonos o bien
dificultad para la síntesis de aminoácidos que deban atravesar por varios
intermediarios. Como se sabe el acetato puede entrar al ciclo de Krebs volviéndose
Acetil-CoA, y este podrá volverse α-cetoglutarato y luego oxalacetato, pero en ese
orden, coincidiendo con que el primero se puede volver glutamato y el segundo en
aspartato, de modo que existe liberación de carbonos y varios pasos lo cual
sustenta lo dicho.
10. A pesar de que se sabe que existe una vía para transformar al acetato en alanina,
no se evidenció en la experiencia, puesto que la alanina no fue afectada por este.