Batch alimentado

Discontinuo alimentado (fed-

(fed-batch).

F, SR

X
VX
VF S≈0
V0 VP
 Cuando se utiliza?
* Cuando se usan sustratos que aún a bajas concentraciones
inhiben el crecimiento, ej: etanol, metanol, ácido acético,
etc.

Etanol Acético

Exceso de etanol produce inhibición del crecimiento

y de la producción.
 Cuando se utiliza?
* Cuando se emplean mutantes auxótrofas en las que el
requerimiento nutricional, si es abundante provoca excesivo
crecimiento sin acumulación del metabolito deseado

H I J
A B C D
E F G

Si se agrega en el medio altas concentraciones de G crece

como cepa salvaje

Si se agrega en forma limitada G es posible

sobreproducir J
 Cuando se utiliza?

* Para la obtención de cultivos de alta densidad

(~100 g/l).

Qp = qP X

Si el qP esta optimizado

Incrementar la concentración de biomasa

 Cuando se utiliza?

* Cuando se emplean fuentes de carbono

causantes de represión catabólica o inducen una
cambio no deseado del metabolismo celular.

* Para controlar la viscosidad de caldos en los que

el producto modifica las características reológicas.
 Clasificación según la alimentación

* alimentación constante, flujo (F) y

concentración de sustrato limitante constantes
(Sr).
* alimentación lineal, flujo o concentración de
sustratos variables.

* alimentación exponencial, flujo exponencial y

concentración de sustrato constante.

* arbitraria.
 Clasificación de acuerdo al control
de alimentación

* procesos sin control feed-back en los que la

velocidad de flujo es programada según un esquema
prefijado.

* procesos con control feed-back en donde la

velocidad de flujo se interactiva con algún
parámetro, pudiendo ser directo ( medida de algún
sustrato o producto) o indirecto ( oxígeno, pH,
cociente respiratorio).
 Discontinuo alimentado (fed-batch).
d(XV)
= µ X V F1
dt

d(sV) = F SR - µ X V F2
dt Yxs

d(pV)
= µ X V YPX F3
dt

Si en F2 reemplazamos V  X queda

d(sV) = F SR - d(XV) 1 F4
dt dt YXS
En un sistema de cultivo en batch alimentado deseamos que la
velocidad de crecimiento este regulada por la alimentación por lo que
s ~ 0 y por lo tanto
d(SV)/dt = 0 o sea que el sustrato es completamente consumido
apenas ingresa en el bioreactor. Entonces considerando un flujo
constante y concentración de sustrato limitante constante tenemos:

d(XV) = F SR YXS F5
dt
E integrando da

X V = Xo Vo + ( F SR YXS ) t F6

la variación de volumen con el tiempo es igual a:

V = Vo + F t F7
 si combinamos las ecuaciones (F5) y (F1) resulta:
d(XV)
= F SR YXS
dt

F SR = µ X V
F8
d(XV)
Yxs = µ X V
dt

en realidad se puede utilizar cualquier valor de flujo que

sea menor a µmax.

F SR ≤ µ X V
Yxs F9
 Alimentación constante

como varia µ con el tiempo

1 d(XV) F10
µ=
X V dt
reemplazando en (F10) las ecuaciones (F5) y (F6),

F SR Yxs
µ= F11
Xo Vo + ( F SR YXS ) t

usando las ecuaciones (F7) y (F6) se llega a saber la

concentración de biomasa en cada momento,

Xo Vo + ( F SR YXS ) t F12
X=
Vo + F t
 Alimentación constante

14,0 0,25
biomasa X(g/l), XV (g)

12,0
0,2
10,0

8,0 0,15

µ, h-1
6,0
0,1

4,0
0,05
2,0

0,0 0
0 2 4 6 8 10 12 14 16

tiempo, hs

X XV m
Proceso de batch-alimentado a flujo constante. Producción de
nucleótidos por Kluvyveromyces marxianus a partir de suero de
leche.
 Cómo hacer los cálculos para un experimento?

por la ecuación general de rendimiento sabemos que:

(Xf Vf) - (Xo Vo)

YXS =
(SR- sres ) (Vf - Vo) (F13)

donde
SR = concentración de sustrato en el reservorio de alimentación
Sres = concentración de sustrato en el fermentador  0

Ejemplo:
Yx/s = 0.5 g/g; ; X0 =3.125 g/l ; V0 =0.5 l ; Vf = 1 l ; Xf = 20
g/l ; µ = 0.15 h-1, de la ecuación (F13) despejamos SR,

SR = Xf Vf - Xo Vo
(F14)
YXS (Vf - Vo)
SR = 73.75 g/l
de la ecuación (F9) despejamos F,

F = Xo Vo µ
(F15)
YXS SR

F= 6.35 ml/h
si el ∆V es 500 ml a un F=6.36 ml/h
 el proceso tardará 78.6 hs.
 Alimentación exponencial
d(XV)
= µ X V (F16)
dt

d(sV) = F SR - µ X V (F17)
dt Yxs

Integrando F16

(F18)
X V = Xo Vo e µ t
 Si se reemplaza XV en (F8) queda:

F SR = Xo Vo µ e µ t
(F19)

YXS

Para una alimentación exponencial la variación de

biomasa y la alimentación están dadas por las
ecuaciones anteriores.
 Cómo hacer para realizar los cálculos?
las variables a tener en cuenta son idénticas al ejemplo anterior, entonces:
Yx/s = 0.5 g/g; ; X0 =3.125 g/l ; V0 = 0.5 L ; Vf = 1 L ; Xf = 20 g/l ;
µ = 0.15 h-1 , SR = 67.5 g/l
siendo

F = Fo e µ t
(F20)
Fo = Xo Vo µ
(F21)
YXS SR
F0 =6.94 ml/h
Por la ecuación (F3) es posible calcular el tiempo total del proceso

t = ln X V - ln Xo Vo (F23)
µ

t = 17 hs.
 Ecuaciones considerando el coeficiente de
mantenimiento
Alimentación constante
µMAX X V
F SR ≤ + Xo Vo mS
Yxs

(X V) max = F * SR
mS

Alimentación exponencial

m t
F SR = Xo Vo e m + mS
Y XS
 Cultivos de Alta Densidad (HCDC)

En los procesos de producción de proteínas

recombinantes las productividades obtenidas
dependen QP= qP * X. Como normalmente es qP
aproximadamente del orden de 0.05g proteína/ g
de peso seco h-1, la única forma de aumentar la QP
es un aumento en la biomasa dentro del
fermentador
Ventajas
reducción del volumen del reactor,menores efuerzos en el
upsttream y downstream processing.

mayores productividades.

facilidades en la separación celular incrementándolos rendimientos.

reducción en los volúmenes de agua de desecho.

menores costos en los equipos.

Inconvenientes que surgen

Limitación de oxígeno, con la posible acumulación de
productos como lactato, acetato, etc.
Perfil de un proceso de HCDC de E. coli expresando el factor de
crecimiento de fibroblastos humano
 Fórmula General

F SR ≤ µ X V
Yxs
Alimentación constante

F SR Yxs
µ=
Xo Vo + ( F SR YXS ) t

X V = Xo Vo + ( F SR YXS ) t

µMAX X V
F SR ≤ + Xo Vo mS
Yxs
 Alimentación exponencial
Alimentación exponencial

F SR = Xo Vo µ e µ t

YXS

X V = Xo Vo e µ t

m t
F SR = Xo Vo e m + mS
Y XS