ESPECTROFOTÓMETRO.

El espectrofotómetro es un instrumento con el que se apoya la espectrofotometría

para medir la cantidad de intensidad de luz absorbida después de pasar a través
de una solución muestra.
Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve
para medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una
misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones y la
concentración o reacciones químicas que se miden en una muestra. También se
utiliza en laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y
microorganismos.
Con el espectrofotómetro, la cantidad de una sustancia química conocida
(concentraciones) también puede determinarse midiendo la intensidad de la luz
detectada. Dependiendo del rango de longitud de onda de la fuente de luz, se
puede clasificar en dos tipos diferentes:
 Espectrofotómetro UV-Vis: utiliza luz en el rango ultravioleta (185 – 400 nm)
y rango visible (400 – 700 nm) de espectro de radiación electromagnética.
 Espectrofotómetro de infrarrojos: utiliza luz en el espectro de infrarrojos
(700 – 15,000 nm) del espectro de radiación electromagnética.
El espectrofotómetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática
a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha
muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:
 Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra,
 Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está
presente en la muestra.
PARTES DE UN ESPECTROFOTÓMETRO.
El espectrofotómetro, en general, consta de dos dispositivos; un espectrómetro y
un fotómetro.
 Un espectrómetro es un dispositivo que produce, dispersa y mide la luz.
 Un fotómetro tiene un detector fotoeléctrico que mide la intensidad de la luz.
Espectrómetro: Produce un rango deseado de longitud de onda de luz. Primero
un colimador (lente) transmite un haz recto de luz (fotones) que pasa a través de
un monocromador (prisma) para dividirlo en varias componentes de longitudes de
onda (espectro). Entonces un selector de longitud de onda (ranura) transmite sólo
las longitudes de onda deseadas.
Fotómetro: Después de que el rango deseado de longitud de onda de luz pasa a
través de la solución muestra en la cubeta, el fotómetro detecta la cantidad de
fotones que se absorbe y luego envía una señal a un galvanómetro o una pantalla
digital.
COMPONENTES DE UN ESPECTROFOTÓMETRO.
Fuente de luz: La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las
siguientes condiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía
espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lámpara de wolframio
(también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón, lámpara de deuterio y
lámpara LED que se utilizan en los laboratorios.
Monocromador: El monocromador aísla las radiaciones de longitud de onda
deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz
monocromática.
Está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de
dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente
que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un
prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud
deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de
salida.
Compartimento de Muestra: Es donde tiene lugar la interacción con la materia
(debe producirse donde no haya absorción ni dispersión de las longitudes de
onda). Es importante destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de
Lambert-Beer en su máxima expresión, con base en sus leyes de absorción, en lo
que concierne al paso de la molécula de fundamental-excitado.
Detector: El detector es el encargado de captar la radiación y, a su vez, dejarla en
evidencia para su estudio posterior. Existen dos tipos:
a) los que responden a fotones;
b) los que responden al calor.
Fotodetectores: En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16
fotodetectores para percibir la señal en forma simultánea en 16 longitudes de
onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza
las partes móviles del equipo.
Celdas: Celdas de espectrofotometría. En un primer plano, dos de cuarzo aptas
para el trabajo con luz ultravioleta; en segundo plano, de plástico, para
colorimetría (es decir, empleando luz visible). Son los recipientes donde se
depositan las muestras líquidas a analizar. El material del cual están hechas varía
de acuerdo a la región que se esté trabajando; son de vidrio o plástico si se trabaja
en la región visible, de cuarzo si se trabaja en la ultravioleta y de NaCl si se trabaja
la región de infrarrojo. Se caracterizan por tener dos paredes correspondientes a
los lados ópticos por donde cruza el haz de luz.
 ESPECTROFOTOMETRÍA
La espectrofotometría es un método científico utilizado para medir cuanta luz
absorbe una sustancia química, midiendo la intensidad de la luz cuando un haz
luminoso pasa a través de la solución muestra, basándose en la Ley de Beer-
Lambert. Esta medición también puede usarse para medir la cantidad de un
producto químico conocido en una sustancia.
PRINCIPIOS.
En la espectrofotometría se aprovecha la absorción de radiación electromagnética
en la zona del ultravioleta y visible del espectro. La muestra absorbe parte de la
radiación incidente en este espectro y promueve la transición del analito hacia un
estado excitado, transmitiendo un haz de menor energía radiante. En esta técnica
se mide la cantidad de luz absorbida como función de la longitud de onda utilizada.
La absorción de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la
estructura de las moléculas, y es característica de cada sustancia química.
La espectrofotometría ultravioleta-visible utiliza haces de radiación del espectro
electromagnético, en el rango UV de 180 a 380 nm, y en el de la luz visible de 380
a 780 nm, por lo que es de gran utilidad para caracterizar los materiales en la
región ultravioleta y visible del espectro.