ENZIMAS

INDICE TEMÁTICO
 Enzimas.....¿Para qué? .........................................................................................................................3
 El tiempo es fundamental
 Menos energía, más rápido
 Condiciones para el trabajo enzimático. .....................................................................4
 ¿Velocidad de una reacción? ................................................................................................................5

 La variación de algo en función del tiempo...

 Cinética Michaeliana

 Ante la presencia de enzima y de sustrato ... ¿siempre se obtiene producto? ....................................6

 ¿Siempre la cinética es michaeliana o hiperbólica? .............................................................................7

 Enzimas Reguladoras

 Enzimas Alostéricas

 Bibliografía............................................................................................................................................8

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 Enzimas.....¿Para qué?
1- El tiempo es fundamental
Al comienzo de esta materia acordamos que una de las características que debe reunir
nuestro objeto en estudio para considerarlo vivo es la capacidad de metabolizar. De hecho la
posibilidad de realizar reacciones químicas de manera eficiente y selectiva, es una de las
condiciones fundamentales para la vida.
Sabemos que los seres vivos podemos obtener energía de los hidratos de carbono. Los
organismos aeróbicos por ejemplo, realizamos la respiración celular aeróbica, proceso metabólico
en el cual los azúcares son degradados en presencia de O2, a CO2 y H2O. Este proceso es altamente
exergónico y libera la energía que utilizamos en todas nuestras funciones (como la consumida en
el trabajo que estamos desarrollando ahora mismo al leer estas líneas, sin ir más lejos!). Sin
embargo, este proceso termodinámicamente favorable es sumamente lento y esto lo
experimentamos diariamente al constatar que el azúcar puede permanecer largos períodos de
tiempo en nuestra alacena sin degradarse. ¿Cuál es el motivo? Debido a su lentitud, sin
catalizadores los procesos bioquímicos serían incompatibles con el tiempo de vida de un individuo.
¡El tiempo es fundamental!
Las enzimas son centrales en la vida celular: Actúan conservando y transformando la
energía química en secuencias ordenadas de reacciones, catalizando tanto los procesos anabólicos
como catabólicos, por lo que su estudio es sumamente relevante. Si bien se reconoció y describió
la catálisis a fines de 1700 y en 1878 se acuñó el término enzimas, recién en la década del 30 del
pasado siglo se comprobó que las mismas eran proteínas1.

2- Menos energía, más rápido

¿Por qué los reactivos se transforman en producto? Existe una barrera energética entre
ambos que es la requerida para alinear los grupos reaccionantes, para la formación de cargas
transitorias inestables, re arreglos de las uniones químicas, etc. Este hecho puede observarse en la
figura 1 que nos muestra que para reaccionar, las moléculas deben sobrepasar esta barrera y
elevar su nivel energético. En el pico de la gráfica se encuentra el punto en el que se igualan las
probabilidades de decaer a producto o a reactivos, lo cual se conoce como Estado de Transición. La

1 Si bien en este texto nos centraremos en las enzimas proteicas, hoy sabemos que no todos los catalizadores biológicos
lo son, ya que en los 80 se describieron ARN con capacidad catalítica. Los mismos se denominan Ribozimas.

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diferencia de energía entre el nivel de los reactivos y el estado de transición se denomina Energía
de Activación. De ella depende la tasa de una reacción, es decir: cuanto más elevada es la energía
de activación más lenta es la reacción.

FIGURA 1:
Energía en función del curso de la
reacción:
Como ejemplo se plantea la
respiración celular aeróbica:
C6H12O6 + O2 H2O + CO2

En rojo se ve el trazado de la
reacción en ausencia de catalizador y
en azul en presencia del mismo.

Como cualquier catalizador, las enzimas aceleran las reacciones en las cuales actúan.
Sin embargo, a diferencia de cualquier otro lo hacen interactuando específicamente en forma
directa con el reactivo.

Analiza el siguiente video para repasar qué son las enzimas y por qué aceleran las
reacciones en las que intervienen, y responde: ¿Qué es el Sitio Activo? ¿Qué es el sustrato? ¿Cómo
puede relacionarse esto con su especificidad?

https://www.youtube.com/watch?v=WOAcp15VLJ0

3- Condiciones para el trabajo enzimático.

Recordemos lo estudiado en la unidad de biomoléculas sobre los niveles estructurales
de las proteínas. Para el trabajo enzimático óptimo los catalizadores deben presentar una
conformación particular, por eso las condiciones del medio como el pH y la temperatura deben ser
tenidos en consideración.

Analiza el siguiente video para ver el efecto de la temperatura sobre las enzimas.
http://www.educ.ar/dinamico/UnidadHtml__get__d672afb8-ead5-490d-81ef-
44c2339cfbbb/index.html

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 ¿Velocidad de una reacción?
1- La variación de algo en función del tiempo...

Si un amigo nos cuenta que en su camino a Mar del Recuadro 1:

Plata mantuvo un promedio de 120 km/h todos entendemos lo que
eso significa. Sin embargo si hablamos de una reacción química, Imaginémonos en el laboratorio.
podemos deducir que debemos expresar la variación de algo en Tenemos 4 tubos de ensayo, cada uno
función del tiempo, pero ... ¿cuál esa variable? de ellos contiene la misma cantidad de
Lo que podemos generalizar de toda reacción es que los enzima el mismo medio de reacción,
reactivos se transforman en productos: pH y temperatura. Del segundo al
R↔P cuarto le agregamos cantidades
Entonces si tenemos formas de medir la concentración crecientes del mismo sustrato.

de producto obtenido... la cuestión se simplifica a medir la

variación de la concentración de producto en función del tiempo y
esa será la velocidad de una reacción. (Recuadro 1)
Cuando estudiamos la tasa de una reacción catalizada y
cómo ésta varía en respuesta a la modificación de algún parámetro
experimental, nos adentramos en el terreno de la Cinética
Enzimática.

2- Cinética Michaeliana Los incubamos en condiciones óptimas

para el trabajo de la enzima en
Estudiando la cinética enzimática L. Michaelis y M. cuestión. Determinamos en cada uno
Menten, propusieron que la reacción se da en dos pasos sucesivos de ellos la aparición de producto en
en los que el sustrato se acompleja con la enzima, para función del tiempo, deduciendo la
velocidad inicial VO.
posteriormente obtenerse el producto:

E + S ↔ ES ↔ P + E Este valor lo graficamos en función de

la concentración de sustrato para
Al analizar cómo varía la velocidad de una reacción en obtener la gráfica de CINÉTICA
función de la concentración de sustrato (según la metodología ENZIMÁTICA.
comentada en el recuadro 1) obtuvieron el siguiente gráfico:

FIGURA 2:
Velocidad de la reacción en
función de la concentración
de sustrato.
Tipo de curva: hipérbole.
Se observa un valor máximo
de velocidad (Vmax).

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 Esta hipérbole nos muestra que a medida que aumenta la concentración de sustrato,
incrementa la velocidad de la reacción. Sin embargo, en un punto se
alcanza una velocidad máxima (Vmax) es decir que, aunque se
Recuadro 2:
incremente notablemente la concentración de sustrato, el valor de la
velocidad permanece constante. Se infiere entonces que las enzimas Km es la concentración de sustrato
son saturables, es decir que llegan a un punto en el que no pueden en la cual las enzimas están
aumentar la rapidez con que reconocen y se unen al sustrato y lo trabajando a la mitad de su
transforman en producto, quedando entonces libres para reconocer velocidad máxima. Correspondería a
otra molécula de sustrato y reiniciar su ciclo de trabajo. la mitad de su saturación si en ese
Por otro lado vemos que el valor medio de velocidad eje se midiera saturación en lugar
máxima (1/2 Vmax), se obtiene con una concentración dada de de velocidad. Por lo tanto, si menor
sustrato. Este valor, conocido como Constante de Michaelis (Km), es cantidad de sustrato se requiere
para llegar a una velocidad media,
una medida de la afinidad de la enzima por el sustrato. (Recuadro 2)
mayor será la afinidad de la enzima
por ese sustrato.

Ante la presencia de enzima y de sustrato ...

La hexokinasa es una enzima que
¿siempre se obtiene producto? une un grupo fosfato en el carbono
6 de la glucosa, pero también de la
Existen moléculas denominadas Inhibidores Enzimáticos, fructosa. Para la isoenzima cerebral
que pueden interferir en la catálisis disminuyendo o deteniendo la los respectivos Km son 0.5 mM y 1.5
reacción enzimática. Cuando este evento es reversible, estas mM. ¿Hacia cuál de estos sustratos
moléculas presentan al menos dos mecanismos de acción. presenta mayor afinidad la
Si el inhibidor es de estructura química similar al sustrato, hexoquinasa? ¿Cuál es la
puede ocupar el sitio activo (EI), compitiendo con el sustrato e consecuencia de este hecho?
impidiendo la formación del complejo ES. Sólo a altas concentraciones
de sustrato, en las cuales éste "gana" en la competencia con el
inhibidor por ocupar el sitio activo, el efecto inhibitorio se hace
despreciable. Puede por tanto alcanzarse la misma velocidad de
reacción que en ausencia del mismo. Este mecanismo recibe el
nombre de Inhibición Competitiva. (Fig 3)
Por otro lado puede ocurrir que el inhibidor se una a la enzima en un sitio diferente al
activo. No existe competencia entre inhibidor y sustrato por lo que se conoce a este mecanismo
reversible como Inhibición No Competitiva. En este caso no se alcanza la Vmax a ninguna
concentración de sustrato. (Fig 4)

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 FIGURA 3:
Efecto de un inhibidor competitivo.

Puede observarse que la Vmax es la misma en

presencia y en ausencia del inhibidor. Sin
embargo, en su presencia se alcanza a mayor
concentración de sustrato. Por este motivo la Km
(Km aparente) es mayor, es decir que se necesita
mayora cantidad de sustrato para que la enzima
alcance la mitad de su velocidad máxima.

FIGURA 4:
Efecto de un inhibidor no competitivo.

Dado que el inhibidor no se une al sitio activo,

puede acomplejarse con la enzima
independientemente de la cantidad de sustrato
presente. La consecuencia de ello es la
disminución de la velocidad. Esto se produce ya
que se dispone de una menor cantidad de
enzimas para formar producto dado que coexisten
los complejos enzima sustrato y enzima inhibidor.

¿Siempre la cinética es michaeliana o hiperbólica?

1- Enzimas Reguladoras

En el metabolismo celular grupos de enzimas trabajan juntas en pasos secuenciales. Es

así como el producto de una enzima se convierte en sustrato de la próxima, con tantos pasos
como sean necesarios para la obtención de una molécula final. En alguno o algunos de estos
pasos, se presentan enzimas que tienen un efecto mayor sobre la tasa de toda la vía metabólica.
Éstas son las Enzimas Reguladoras.

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 2- Enzimas Alostéricas

La actividad de algunas de ellas es regulada a través de la unión no covalente y

reversible de reguladores denominados Moduladores o Efectores Alostéricos. Estas enzimas son
conocidas como Alostéricas y, generalmente, son oligoméricas ubicándose en algunos casos los
sitios activo y regulatorio (o Sitio Alostérico) en subunidades separadas. Una enzima puede ser
regulada por uno o varios moduladores, cada uno de los cuales tiene un sitio alostérico específico
de unión. El efecto de esta interacción puede ser inhibitorio o estimulador de la actividad
enzimática, diferenciándose entonces efectores Negativos o Inhibidores, de los efectores Positivos
o Activadores.
Las enzimas alostéricas se caracterizan por presentar cambios conformacionales
inducidos por la unión del sustrato al sitio activo como así también, la de los moduladores a los
sitios alostéricos. Éstos interconvierten al catalizador de un estado más activo a menos activo,
presentado cada uno de estos estados una conformación particular. Estas enzimas presentan una
cinética sigmoidea la cual refleja por lo general la cooperación entre las subuindades proteicas. Si
imaginamos una proteína oligomérica, en la que una de sus subunidades está cambiando su
conformación como consecuencia de la unión del sustrato o del modulador, podemos inferir que
dicho cambio será trasladado a las subunidades unidas a ella. Es así como el cambio en la
estructura de una subunidad es transferido a las adyacentes por medio de las interacciones no
covalentes en la interfase entre las subunidades.

FIGURA 5:
Velocidad de la reacción en función de la
concentración de sustrato.

Tipo de curva: Sigmoidea

En azul se observa la cinética de la enzima en
ausencia de moduladores. La curva superior es
la cinética en presencia de un Activador y la
inferior de un Inhibidor

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 BIBLIOGRAFÍA
* Nelson D. L., Cox M. M. Lehninger. Principles of Biochemistry. 5th Edition. W. H. Freeman and Co.
N York.

* Curtis, Barnes, Schnek, Massarini. Curtis. Biología. 7ª Edición, Panamericana:

http://books.google.es/books?id=mGadUVpdTLsC&printsec=frontcover&dq=biologia&hl=es&ei=OoVrToXqFbHE0AHt1ajsBA&sa=X&oi=book_result&ct=
book-thumbnail&resnum=2&ved=0CDMQ6wEwATgK#v=onepage&q=biomol%C3%A9culas&f=false

*Sadava, Heller, Orians, Purves, Hillis. Vida. La Ciencia de la Biología. 8ª Edición, Panamericana
http://books.google.es/books?id=Rlw3cKDaMfEC&printsec=frontcover&dq=vida+la+ciencia+de+la+biologia&source=bl&ots=T00EDVIAMs&sig=wOg252
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