Probióticos en acuicultura

La acuicultura es el sector de producción de alimentos de más rápido crecimiento en el

mundo. Sin embargo, el cultivo de peces actualmente sufre graves pérdidas debido a
enfermedades infecciosas. El uso de medicamentos antimicrobianos, pesticidas y
desinfectantes en la prevención de la enfermedad acuícola y la promoción del
crecimiento ha llevado a la evolución de cepas de bacterias resistentes. Por lo tanto, la
investigación sobre el uso de probióticos para la acuicultura está aumentando con la
demanda de una acuicultura sustentable amigable con el medio ambiente. Los
beneficios de tales suplementos incluyen un mejor valor alimenticio, contribución
enzimática a la digestión, inhibición de microorganismos patógenos, actividad
antimutagénica y anticancerígena y aumento de la respuesta inmune. Estos probióticos
son bacterias inocuas que ayudan al bienestar del animal huésped y contribuyen, directa
o indirectamente, a proteger al animal huésped contra los patógenos bacterianos
dañinos. El uso de probióticos en la acuicultura acaba de comenzar, debido a que la
microbiota gastrointestinal de los organismos acuáticos ha sido mal caracterizada y sus
efectos no se han estudiado extensamente. Esta revisión resume y evalúa el
conocimiento breve sobre el organismo probiótico, la acción del probiótico en el cultivo
de peces y la evaluación de la seguridad de los probióticos en la acuicultura.

1. Introducción
Hoy, la acuicultura es el sector productor de alimentos de más rápido crecimiento en el
mundo, con una tasa de crecimiento anual promedio del 8.9% desde 1970, comparado
con solo 1.2% para la pesca de captura y 2.8% para los sistemas terrestres de
producción de carne de cultivo durante el mismo período.1 La acuicultura mundial ha
crecido enormemente durante los últimos cincuenta años, desde una producción de
menos de un millón de toneladas en la década de 1950 a 59,4 millones de toneladas en
2004. Este nivel de producción tuvo un valor de 70,3 mil millones de dólares. Las
enfermedades y el deterioro de las condiciones ambientales a menudo ocurren y resultan
en pérdidas económicas graves.2 Durante las últimas décadas, los antibióticos se
utilizaron como estrategia tradicional para el manejo de enfermedades de los peces y
también para la mejora del crecimiento y la eficiencia de la conversión alimenticia.
Sin embargo, el desarrollo y la propagación de patógenos resistentes a los
antimicrobianos estaban bien documentados3,4. Existe un riesgo asociado con la
transmisión de bacterias resistentes de entornos acuícolas a humanos, y el riesgo
asociado con la introducción en el ambiente humano de bacterias no patógenas que
contienen antimicrobianos genes de resistencia y la posterior transferencia de tales
genes a patógenos humanos.5 Considerando estos factores, se ha intensificado la
investigación en el desarrollo de nuevas estrategias de suplementación dietética en las
que varios compuestos promueven la salud y el crecimiento como probióticos,
prebióticos, simbióticos, fitobióticos y otras dietas funcionales suplementos han sido
evaluados. 6 En este contexto, la intervención microbiana puede desempeñar un papel
vital en la producción acuícola, y los tratamientos probióticos efectivos pueden
proporcionar un amplio espectro y una mayor protección de la enfermedad no
específica.7,8 Esta revisión resume y evalúa el conocimiento más amplio sobre los
probióticos, la selección de probiontes, comúnmente organismo probiótico utilizado, su
modo de acción y la regulación de la seguridad de los probióticos en la acuicultura.
2. Definición de probióticos
La palabra "probiótico" fue introducida por Parker, 1974.9 Según su definición original,
los probióticos son "organismos y sustancias que contribuyen al equilibrio microbiano
intestinal". Fuller, 198910 revisó la definición como "suplemento de alimento
microbiano vivo que afecta beneficiosamente al animal huésped al mejorar su equilibrio
microbiano intestinal". Por lo tanto, varios términos como bacterias "amigables",
"beneficiosas" o "saludables" también se usan comúnmente para describir los
probióticos. Aunque la aplicación de probióticos en la acuicultura parece ser
relativamente reciente, 11 el interés en estos tratamientos favorables al medio ambiente
está aumentando rápidamente. Moriarty, 199812 propuso ampliar la definición de
probióticos en la acuicultura a "aditivos para el agua" microbianos. Un número
creciente de estudios han abordado explícitamente los probióticos, y ahora es posible
estudiar su estado del arte, desde el uso empírico hasta el enfoque científico.13,14

3. Selección de probióticos
La selección de bacterias probióticas generalmente ha sido un proceso empírico basado
en evidencia científica limitada. Muchas de las fallas en la investigación probiótica se
pueden atribuir a la selección de microorganismos inapropiados. Se han definido los
pasos de selección, pero deben adaptarse a las diferentes especies y entornos host. Es
esencial comprender los mecanismos de la acción probiótica y definir criterios de
selección para los probióticos potenciales.15 Los criterios generales de selección se
determinan principalmente por consideraciones de seguridad biológica,

a. Métodos de producción y procesamiento.

b. Método de administración del probiótico y
c. La ubicación en el cuerpo donde se espera que los microorganismos estén activos.15

Tres modos generales de acciones probióticas han sido clasificados y presentados por
Oelschlaeger, 2010 16 de la siguiente manera: (1) Los probióticos pueden modular las
defensas intestinales del huésped, incluidos el sistema inmunitario adquirido y el
inmunizado, y este modo de acción es muy importante para la prevención y tratamiento
de enfermedades infecciosas. enfermedades pero también para el tratamiento de la
inflamación del tracto digestivo o partes del mismo. (2) Los probióticos también pueden
tener un efecto directo sobre otros organismos, en general y patógenos, y este principio
es en muchos casos de gran importancia en la prevención, el tratamiento y la
restauración del equilibrio microbiano en el intestino. (3) Finalmente, los efectos
probióticos pueden basarse en acciones que afectan los productos microbianos, los
productos hospedadores y los ingredientes de los alimentos, y las succiones pueden
provocar la inactivación de toxinas y la desintoxicación del huésped y de los
componentes del alimento en el intestino. Según el resumen anterior, los tres modos de
acción de los probióticos están probablemente asociados con la microbiota intestinal y /
o digestiva. Por lo tanto, ha sido evidente que de hecho estamos tratando con otro
"órgano", el llamado "canal microbiótico" con el mayor conocimiento de la actividad
específica de la microbiota intestinal.17

4. organismo probiótico
Hoy en día, los probióticos son bastante comunes en la salud promoviendo "alimentos
funcionales" para los humanos, así como suplementos terapéuticos, profilácticos y de
crecimiento en la producción animal y la salud humana.18e20 Por lo general, las
bacterias del ácido láctico (LAB) se han utilizado e investigado ampliamente para
humanos y los animales terrestres y las BAL también se sabe que están presentes en el
intestino de peces sanos21,22. El interés en LAB radica en el hecho de que son
residentes naturales del GIT humano con la capacidad de tolerar el ambiente ácido y
bilioso del tracto intestinal. Las BAL también funcionan para convertir la lactosa en
ácido láctico, reduciendo así el pH en el TGI y evitando naturalmente la colonización
por muchas bacterias23. Las bacterias de ácido láctico más ampliamente investigadas y
utilizadas son los Lactobacilos y Bifidobacterias.20,24,25
Otros probióticos comúnmente estudiados incluyen la espora que forma Bacillus sp. y
las levaduras Bacillus sp. se han protegido de la capacidad de adhesión, producen
bacteriocinas (péptidos antimicrobianos) y proporcionan inmunoestimulación.26e29
Los anaerobios obligatorios o facultativos grampositivos son dominantes en la
microbiota gastrointestinal de los hombres y adultos con daño renal.30 Los
mitosprobiontes pertenecen a los grupos dominante o secundario - géneros dominantes
entre estas microbiotas, p. ej. Bifidobacterium, Lactobacillus, Streptococcus.30 Los
anaerobios facultativos negativos a glóbulos rojos predominan en el tracto digestivo de
peces y mariscos, aunque los anaerobios simbióticos pueden ser dominantes en el
intestino posterior de algunos peces herbívoros tropicales.31 Vibrio y Pseudomonas son
los géneros más comunes en crustáceos, 32 peces marinos y bivalvos.33,34 Aeromonas,
Plesiomonas y Enterobacteriaceae son dominantes en peces de agua dulce.33 Bacillus
spp. tienen un mayor interés en los probióticos, ya que pueden conservarse en forma de
esporas y, por lo tanto, almacenarse indefinidamente en el estante.35 La lista de
microorganismos autorizados como probióticos en los alimentos para animales con
arreglo a la Directiva 70/524 / CEE del Consejo figura en el cuadro 1. Además, otros
probióticos se comercializan en el mercado que se ha notificado, pero que no aparecen
en la última lista autorizada de aditivos para piensos publicada por la Comisión.

5. Mecanismos de acción
Los diferentes modos de acción o propiedades son el deseo sobre el potencial probiótico
como el antagonismo a los patógenos36,37. La capacidad de las células para producir
metabolitos (como vitaminas) y enzimas 38, colonización o propiedades de adhesión39
mejoran el sistema inmune40.

5.1. Exclusión competitiva de bacterias patógenas

La exclusión competitiva es un fenómeno por el cual una microflora previene o reduce
la colonización de un desafío bacteriano competidor para la misma ubicación en el
intestino. El objetivo de los productos probióticos diseñados bajo exclusión competitiva
es obtener: una microbiota estable, agradable y controlada en cultivos basada en lo
siguiente; competencia por sitios de fijación en la mucosa, competencia por nutrientes y
producción de sustancias inhibitorias por la microflora que impide la replicación y / o
destruye las bacterias desafiantes y por lo tanto reduce la colonización. 12 Se muestran
diferentes estrategias en la adhesión de microorganismos a esos sitios de unión como
fuerzas pasivas , interacciones electrostáticas, fuerzas hidrófobas, estéricas, ácidos
lipoteicoicos, adherencias y estructuras específicas de adhesión.41 La adhesión y
colonización de las superficies de la mucosa son posibles mecanismos de protección
contra los patógenos a través de la competencia por los sitios de unión y los
nutrientes.42.

5.2. Producción de compuestos inhibidores

El antagonismo bacteriano es un fenómeno común en la naturaleza; por lo tanto, las
interacciones microbianas juegan un papel importante en el equilibrio entre
microorganismos competitivos beneficiosos y potencialmente patógenos43. Los
compuestos antagonistas se definen como sustancias químicas producidas por
microorganismos (en este caso bacterias) que son tóxicas (bactericidas) o inhibidoras
(bacteriostáticas) hacia otros microorganismos. Se cree que la presencia de bacterias que
producen compuestos antibacterianos en el intestino del huésped, en su superficie o en
su agua de cultivo previene la proliferación de bacterias patógenas e incluso las elimina.
La estructura del compuesto antibacteriano a menudo no se dilucida y su modo de
acción no se ha informado. Además, ninguno de estos informes demuestra que el
compuesto antibacteriano se produzca in vivo. Esto será de gran importancia si se
entiende la producción de estos compuestos y su modo de acción. Si la producción de
compuesto antibacteriano es el único modo de acción, es posible que el patógeno
eventualmente desarrolle resistencia hacia el compuesto. Esto dará como resultado un
tratamiento efectivo. Se deben evaluar los riesgos del patógeno para desarrollar
resistencia contra el compuesto activo, para asegurar un efecto estable de la bacteria
probiótica.

5.3. Mejora de la respuesta inmune contra

Microorganismos patógenos Los sistemas inmunes de peces y vertebrados superiores
son similares y ambos tienen dos componentes integrales: 1) el sistema de defensa
innato, natural o no específico formado por una serie de componentes celulares y
humorales, y 2) el sistema inmune adaptativo, adquirido o específico caracterizado por
la respuesta inmune humoral a través de la producción de anticuerpos y por la respuesta
inmune celular que está mediada por linfocitos, capaz de reaccionar específicamente
con antígenos.
La microbiota normal en el ecosistema GI influye en el sistema inmune innato, que es
de vital importancia para la resistencia a enfermedades de los peces y se divide en
barreras físicas, componentes humorales y celulares. Los parámetros humorales innatos
incluyen péptidos antimicrobianos, lisozima, componentes del complemento,
transferasas, pentraxinas, lectinas, antiproteasas y anticuerpos naturales, mientras que
las células citotóxicas no específicas y los fagocitos constituyen efectores inmune
celulares innatos. Las citoquinas son un componente integral de la respuesta inmune
adaptativa e innata, particularmente IL-1b, interferón, factor de necrosis tumoral-a,
factor de crecimiento transformante-by varias cehmocinas regulan la inmunidad
innata.44 El sistema inmune no específico puede ser estimulado por los probióticos. Se
ha demostrado que la administración oral de la bacteria Clostridium butyricum a la
trucha arcoiris mejoró la resistencia de los peces a la vibriosis al aumentar la actividad
fagocítica de los leucocitos. Rengpipat et al, 2000 7 mencionaron que el uso de Bacillus
sp. (cepa S11) proporcionó protección contra la enfermedad mediante la activación de
las defensas inmunitarias tanto celulares como humorales en el camarón tigre (Penaeus
monodon). Balcazar, 2003 45 demostró que la administración de una mezcla de cepas
bacterianas (Bacillus y Vibrio sp.) Influyó positivamente en el crecimiento y la
supervivencia de juveniles de camarón blanco y presentó un efecto protector contra el
sistema inmune, al aumentar la fagocitosis y la actividad antibacteriana.

5.4. Efectos antivirales

Algunas bacterias usadas como probióticos candidatos tienen efectos antivirales.
Aunque no se conoce el mecanismo exacto por el cual estas bacterias ejercen sus efectos
antivirales, las pruebas de laboratorio indican que la inactivación de virus puede ocurrir
por sustancias químicas y biológicas, como extractos de algas marinas y agentes
extracelulares de bacterias. Se ha informado que cepas de Pseudomonas sp., Vibrio sp.,
Aeromonas sp., Y grupos de corineformes aislados de criaderos de salmónidos,
mostraron actividad antiviral contra el virus de la necrosis hematopoyética infecciosa
(IHNV) con más del 50% de reducción de placa.46 Girones et al. al, 198947 informó
que una bacteria marina, tentativamente clasificada en el género Moraxella, mostró
actividad antiviral contra poliovirus. Direkbusarakim et al, 199848 aislaron dos cepas de
Vibrio spp. de un criadero de camarones tigre negro. Estos aislados mostraron
actividades antivirales contra el VNHI y el virus Oncorhynchus masou (OMV), con
porcentajes de reducción de la placa entre el 62 y el 99%, respectivamente.

6. Regulación de seguridad

El perfil de seguridad de una cepa probiótica potencial es de importancia crítica en el

proceso de selección. Esta prueba debe incluir la determinación de la resistencia a la
cepa a una amplia variedad de clases comunes de antibióticos, tales como tetraciclinas,
quinolonas y macrólidos, y la subsiguiente confirmación de la ausencia de transmisión
de genes de resistencia a los fármacos o plásmidos de virulencia. 49 La evaluación
también debe tener en cuenta la formulación del producto final, ya que puede inducir
efectos adversos en algunos sujetos o anular por completo los efectos positivos. Una
mejor comprensión de los posibles mecanismos por los cuales los organismos
probióticos podrían causar efectos adversos ayudará a desarrollar ensayos efectivos que
predicen qué cepas podrían no ser adecuadas para su uso en productos probióticos.
Además, deberían aplicarse técnicas moleculares modernas para garantizar que las
especies de probióticos utilizados en la acuicultura se identifiquen correctamente, tanto
para la garantía de la calidad como para la seguridad.

7. Discusión

La aplicación de probióticos en la acuicultura es prometedora, pero requiere

considerables esfuerzos de investigación. Sin embargo, se han investigado a fondo
varios productos probióticos, y han demostrado su eficacia como posible uso en la
acuicultura.
Las preparaciones bacterianas beneficiosas que son probióticos específicos de la especie
se han vuelto más ampliamente disponibles para la comunidad acuícola. Estas
preparaciones muestran un efecto beneficioso específico como prevención de
enfermedades y ofrecen un elemento natural para obtener un entorno intestinal y un
sistema inmunológico sanos y estables. El establecimiento de un programa sólido de
prevención de enfermedades, que incluya probióticos y buenas prácticas de manejo,
puede ser beneficioso para aumentar la producción de organismos acuáticos.

8. Conclusión

La aplicación de probióticos en la acuicultura es prometedora, pero requiere

considerables esfuerzos de investigación. Es esencial comprender los mecanismos de
acción para definir los criterios de selección para los probióticos potenciales. Por lo
tanto, todavía se necesita más información sobre las interacciones huésped / microbio in
vivo y desarrollo de herramientas de monitoreo (por ejemplo, biología molecular) para
una mejor comprensión de la composición y funciones de la microbiota indígena, así
como de cultivos microbianos de '' probióticos ''. '. El uso de probióticos es una
herramienta de gestión importante, pero su eficacia depende de la comprensión de la
naturaleza de la competencia entre especies o cepas.
Probiotics in aquaculture
Aquaculture is the world’s fastest growing food production sector. However, fish
culture is currently suffering from serious losses due to infectious diseases. The use of
antimicrobial drugs, pesticides and disinfectant in aquaculture disease prevention and
growth promotion has led to the evolution of resistant strains of bacteria. Thus, the
research into the use of probiotics for aquaculture is increasing with the demand for
environment e friendly sustainable aquaculture. The benefits of such supplements
include improved feed value, enzymatic contribution to digestion, inhibition of
pathogenic microorganisms, antimutagenic and anti-carcinogenic activity, and increased
immune response. These probiotics are harmless bacteria that help the well being of the
host animal and contribute, directly or indirectly to protect the host animal against
harmful bacterial pathogens. The use of probiotics in aquaculture has just begun, due to
the fact that gastrointestinal microbiota of aquatic organisms has been poorly
characterized, and their effects are not studied extensively. This review summarizes and
evaluates brief knowledge about the probiotic organism, the action of probiotic in fish
culture and the safety evaluation of probiotics in aquaculture.

1. Introduction
Today, aquaculture is the fastest growing food-producing sector in the world, with an
average annual growth rate of 8.9% since 1970, compared to only 1.2% for capture
fisheries and 2.8% for terrestrial farmed meat production systems over the same
period.1 World aquaculture has grown tremendously during the last fifty years from a
production of less than a million tonne in the early 1950s to 59.4 million tonnes by
2004. This level of production had a value of US$70.3 billion. The diseases and
deterioration of environmental conditions often occur and result in serious economic
losses.2 During the last decades, antibiotics used as traditional strategy for fish diseases
management and also for the improvement of growth and efficiency of feed conversion.
However, the development and spread of antimicrobial resistant pathogens were well
documented.3,4 There is a risk associated with the transmission of resistant bacteria
from aquaculture environments to humans, and risk associated with the introduction in
the human environment of nonpathogenic bacteria, containing antimicrobial resistance
genes, and the subsequent transfer of such genes to human pathogens.5 Considering
these factors, there has been heightened research in developing new dietary
supplementation strategies in which various health and growth promoting compounds as
probiotics, prebiotics, synbiotics, phytobiotics and other functional dietary supplements
have been evaluated. 6 In this context, microbial intervention can play a vital role in
aquaculture production, and effective probiotic treatments may provide broad spectrum
and greater nonspecific disease protection.7,8 This review summarizes and evaluates the
broader knowledge about the probiotics, selection of probionts, commonly used
probiotic organism, their mode of action and safety regulation of probiotics in
aquaculture.

2. Definition of probiotics

The word “probiotic” was introduced by Parker, 1974.9 According to his original
definition, probiotics are “organisms and substances which contribute to intestinal
microbial balance”. Fuller, 198910 revised the definition as “live microbial feed
supplement which beneficially affects the host animal by improving its intestinal
microbial balance”. Therefore, several terms such as “friendly”, “beneficial”, or
“healthy” bacteria are also commonly used to describe probiotics. Although application
of probiotics in aquaculture seems to be relatively recent,11 the interest in such
environment friendly treatments is increasing rapidly. Moriarty, 199812 proposed to
extend the definition of probiotics in aquaculture to microbial ‘‘water additives’’. A
growing number of studies have dealt explicitly with probiotics, and it is now possible
to survey its state of the art, from the empirical use to the scientific approach.13,14

3. Selection of probiotics
Selection of probiotic bacteria has usually been an empirical process based on limited
scientific evidence. Many of the failures in probiotic research can be attributed to the
selection of inappropriate microorganisms. Selection steps have been defined, but they
need to be adapted for different host species and environments. It is essential to
understand the mechanisms of probiotic action and to define selection criteria for
potential probiotics.15 General selection criteria are mainly determined by bio safety
considerations,
a. Methods of production and processing.
b. Method of administration of the probiotic and
c. The location in the body where the microorganisms are expected to be active.15
Three general modes of probiotics actions have been classified and presented by
Oelschlaeger, 201016 as follow: (1) Probiotics might be able to modulate the host’s gut
defenses includingtheinnate aswell as theacquiredimmunesystemand this mode of action
is most likely important for the prevention and therapy of infectious diseases but also
for the treatment of inflammationof the digestive tract or parts thereof. (2) Probiotics
canalsohave a direct effectonother organisms, commensaland or pathogenic ones and
this principle is inmany cases is of great importance in the prevention, treatment and
restoration of the microbial equilibriumin thegut. (3) Finally, probiotic effectsmay be
based on actions affecting microbial products, host products and food ingredients and
suchactionsmay result in inactivation of toxins and detoxification of host and food
components in the gut. According to above summary, all three modes of probiotics
actions are all likelihood associated with gut and/or gut microbiota.Therefore,
ithasbecomeapparent thatwe are in fact dealing with another “organ”, the so called
“microbiotic canal” with the increased knowledge of the specific activity of the gut
microbiota.17

4. Probiotic organism
Today probiotics are quite commonplace in health promoting “functional foods” for
humans, as well as therapeutic, prophylactic and growth supplements in animal
production and human health.18e20 Typically, the lactic acid bacteria (LAB) have been
widely used and researched for human and terrestrial animal purposes, and LAB are
also known to be present in the intestine of healthy fish.21,22 Interest in LAB stems
from the fact that they are natural residents of the human GIT with the ability to tolerate
the acidic and bile environment of the intestinal tract. LAB also function to convert
lactose into lactic acid, thereby reducing the pH in the GIT and naturally preventing the
colonization by many bacteria, 23 The most widely researched and used lactic acid
bacteria are the Lactobacilli and Bifidobacteria.20,24,25
Other commonly studied probiotics include the spore formingBacillus
sp.andyeasts.Bacillus sp.havebeenshowntopossess adhesion abilities, produce
bacteriocins (antimicrobial peptides) and provide immunostimulation.26e29 Gram-
positive obligate or facultative anaerobes are dominant in the gastrointestinal
microbiotaofmanandterrestrialfarmanimals.30Mostprobionts belong to dominant or sub-
dominant genera among these microbiota, e.g., Bifidobacterium, Lactobacillus,
Streptococcus.30Gram-negative facultative anaerobes prevail in the digestive tract of
fish and shellfish, though symbiotic anaerobes may be dominant in the posterior
intestine of some herbivorous tropical fish.31 Vibrio and Pseudomonas are the most
common genera in crustaceans,32 marine fish and bivalves.33,34 Aeromonas,
Plesiomonas and Enterobacteriaceae are dominant in freshwater fish.33Bacillus spp.
hold added interest in probiotics as they can be kept in the spore form and therefore
stored indefinitely on the shelf.35 The list of microorganism authorized as probiotics in
feeding stuffs under Council Directive 70/524/EEC are given in Table 1. In addition,
other probiotics are commercialized on the market that has been notified, but that do not
appear in the last authorized list of feed additives published by the Commission.

5. Mechanisms of action
Different modes of action or properties are desire on the potential probiotic like
antagonismto pathogens36,37 ability of cells to produce metabolites (like vitamins) and
enzymes,38 colonization or adhesion properties39 enhance the immune system.40

5.1. Competitive exclusion of pathogenic bacteria

Competitive exclusion is a phenomenon whereby an established
microflora prevents or reduces the colonization of a competing bacterial challenge for
the same location on the intestine. The aim of probiotic products designed under
competitive exclusion is to obtain: stable, agreeable andcontrolled microbiota in
cultures based on the following; competition for attachment sites on the mucosa,
competition for nutrients and production of inhibitory substances by the microflora
which prevents replication and/destroys the challenging bacteria and hence reduce
colonization.12 Different strategies are displayed in the adhesion of microorganism to
those attachment sites as passive forces, electrostatic interactions, hydrophobic, steric
forces, lipoteichoic acids, adhesions and specific structures of adhesion.41Adhesion and
colonization of the mucosal surfaces are possible protective mechanisms against
pathogens through competition for binding sites and nutrients.42

5.2. Production of inhibitory compounds

Bacterial antagonism is a common phenomenon in nature; therefore, microbial
interactions play a major role in the equilibrium between competing beneficial and
potentially pathogenic microorganisms.43 Antagonistic compounds are defined as
chemical substances produced by microorganisms (in this case bacteria) that are toxic
(bactericidal) or inhibitory (bacteriostatic) toward othermicroorganisms. The presence
of bacteria producing antibacterial compounds in the intestine of the host, on its surface,
or in its culture water is thought to prevent proliferation of pathogenic bacteria and even
eliminate these. The structure of the antibacterial compound is often not elucidated and
their mode of action has not been reported. Furthermore none of these reports
demonstrate that the antibacterial compound is produced in vivo. This will be of
significant importance, if production of these compounds and its mode of action are
understood. If the production of antibacterial compound is the onlymode of action, it is
possible that the pathogen eventually will develop resistance toward the compound.
This will result inanineffective treatment.Theriskof thepathogento develop resistance
against the active compound has to be evaluated, to assure a stable effect of the
probiotic bacterium.

5.3. Enhancement of the immune response against

pathogenic microorganisms The immune systems of fish and higher vertebrates are
similar and both have two integral components: 1) the innate, natural or nonspecific
defense system formed by a series of cellular and humoral components, and 2) the
adaptive, acquired or specific immune system characterized by the humoral immune
response through the production of antibodies and by the cellular immune response
which is mediated by Tlymphocytes, capable of reacting specifically with antigens.
The normal microbiota in the GI ecosystem influences the innate immune system,
which is of vital importance for the disease resistance of fish and is divided into
physical barriers, humoral and cellular components. Innate humoral parameters include
antimicrobial peptides, lysozyme, complement components, transferring, pentraxins,
lectins, antiproteases and natural antibodies, whereas nonspecific cytotoxic cells and
phagocytes constitute innate cellular immune effectors. Cytokines are an integral
component of the adaptive and innate immune response, particularly IL-1b, interferon,
tumor necrosis factor-a, transforming growth factor-b and several cehmokines regulate
innate immunity.44 The nonspecific immune system can be stimulated by probiotics. It
has been demonstrated that oral administration of Clostridium butyricum bacteria to
rainbow trout enhanced the resistance of fish to vibriosis, by increasing the phagocytic
activity of leucocytes. Rengpipat et al, 2000 7 mentioned that the use of Bacillus sp.
(strain S11) provided disease protection by activating both cellular and humoral
immune defenses in tiger shrimp (Penaeus monodon). Balcazar, 2003 45 demonstrated
that the administration of a mixture of bacterial strains (Bacillus and Vibrio sp.)
positively influenced the growth and survival of juveniles of white shrimp and
presented a protective effect against the immune system, by increasing phagocytosis and
antibacterial activity.

5.4. Antiviral effects

Some bacteria used as candidate probiotics have antiviral effects. Although the exact
mechanism by which these bacteria exerts its antiviral effects is not known, laboratory
tests indicates that the inactivation of viruses can occur by chemical and biological
substances, such as extracts from marine algae and extracellular agents of bacteria. It
has been reported that strains of Pseudomonas sp., Vibrio sp., Aeromonas sp., and
groups of coryneforms isolated from salmonid hatcheries, showed antiviral activity
against infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) with more than 50% plaque
reduction.46 Girones et al, 198947 reported that a marine bacterium, tentatively
classified in the genus Moraxella, showed antiviral activity against poliovirus.
Direkbusarakim et al, 199848 isolated two strains of Vibrio spp. from a black tiger
shrimp hatchery. These isolates displayed antiviral activities against IHNV and
Oncorhynchus masou virus (OMV), with percentages of plaque reduction between 62
and 99%, respectively.

6. Safety regulation

The safety profile of a potential probiotic strain is of critical importance in the selection
process. This testing should include the determination of strain resistance to a wide
variety of common classes of antibiotics such as tetracyclines, quinolones and
macrolides and subsequent confirmation ofnon-transmission of drug resistance genes or
virulence plasmids. 49 Evaluation should also take the end-product formulation into
consideration because this can induce adverse effects in some subjects or negate the
positive effects altogether. A better understanding of the potential mechanisms whereby
probiotic organisms might cause adverse effects will help to develop effective assays
that predict which strains might not be suitable for use in probiotic products.
Furthermore, modern molecular techniques should be applied to ensure that the species
of probiotics used in aquaculture are correctly identified, for quality assurance as well as
safety.

7. Discussion

The application of probiotics in aquaculture shows promise, but needs considerable

efforts of research. However, a number of probiotic products have been thoroughly
researched, and evidenced their efficacy a possible use on aquaculture.
Beneficial bacterial preparations that are species-specific probiotics have become more
widely available to the aquaculture community. These preparations show specific
beneficial effect as disease prevention and offer a natural element to obtain a stable
healthy gut environment and immune system. The establishing of strong disease
prevention program, including probiotic and good management practice can be
beneficial to raise aquatic organism production.

8. Conclusion

The application of probiotics in aquaculture shows promise, but needs considerable

efforts of research. It is essential to understand the mechanisms of action in order to
define selection criteria for potential probiotics. Therefore, more information on the
host/microbe interactions in vivo, and development of monitoring tools (e.g. molecular
biology) are still needed for better understanding of the composition and functions of
the indigenous microbiota, as well as of microbial cultures of ‘‘probiotics’’. The use of
probiotics is an important management tool, but its efficiency depends on understanding
the nature of competition between species or strains.