Introducción

En esta práctica evidenciaremos los movimientos rítmicos simples del musculo liso bajo
condiciones normales ( solución de ringer ) y de la acción del calcio y potasio .

Una de las características de los animales es su capacidad para realizar movimientos

coordinados que le permitan la exploración y el aprovechamiento de su entorno. Este
movimiento es posible por la existencia de los músculos, formados por un tipo de células que
pueden cambiar su longitud. En los invertebrados a diferencia de los vertebrados se clasifican
en tres categorías que forma parte de la musculatura visceral o somática .

 Musculo estriado propiamente dicho

 Musculo de estriación oblicua
 Musculo liso

En el caso específico de Lumbricus terrestris se observa que está formado por segmentos
anulares , parece una serie de rosquillas en miniatura pegadas una tras otra. Cada segmento
posee movilidad propia gracias a dos grupos musculares. El primero, justo debajo de la piel,
forma un anillo alrededor del gusano. Bajo este encontramos el segundo grupo muscular, que
se extiende longitudinalmente. El avance se consigue al contraer y relajar los dos tipos opuestos
de musculatura mediante un movimiento rítmico en forma de onda que recorre todos los anillos
del cuerpo, presenta infinidad de receptores sensoriales (hasta 1.900 por segmento). De
acuerdo al libro Invertebrate Zoology las lombrices se mueven un promedio de 25cm por
minuto, y dado que por cada contracción se mueven alrededor de 2-3cm, quiere decir que
por minuto tendremos un aproximado de 12 contracciones por minuto.

El Ca2+ para la contracción proviene de reservas intracelulares o extracelulares , el

sistema troponina-tropomyosina asociado a los filamentos de actina y restricto a músculo
esquelético y cardiaco, la activación de la kinasa de la miosina de cadena ligera por Ca 2+ y
Calmodulina cuya fosforilación genera la contracción muscular y la unión directa del Ca 2+ a
la miosina en el caso de musculo liso .
El canal activado por acetilcolina que es producto de la sinapsis , tiene un diámetro de
aproximadamente 0,65 nm, que es lo suficientemente grande como para permitir que los iones
positivos importantes (sodio [Na+], potasio [K+] y calcio [Ca++]) se muevan con facilidad a través
de la abertura. Por el contrario, los iones negativos, como los iones cloruro, no lo atraviesan
debido a las intensas cargas negativas de la abertura del canal que las repelen.

El potasio (K+) en la actividad intensa del músculo esquelético se desplaza hacia la matriz
extracelular llegando a duplicar su concentración produciéndose hiperpolarización .Esto a
su vez puede explicar la importancia de la presencia del sodio (Na-) que permite la
repolarización y la consecuente contracción posible.
 RESULTADOS

Solución Tiempo N° de Subgrupo

contracciones
Ringer 1 min 26
ClK 1 min 22
Cl2Ca 1 min 28 1
Nicotina 1 min 35
Tabla 1 : Resultados del subgrupo 1

Subgrupo 1

NICOTINA 35

CL2CA 28

N° de contracciones/m
CLK 22

RINGER 26

0 10 20 30 40

Grafico 1

Los datos obtenidos por este grupo son los esperados con esta práctica , la menor
cantidad de contracciones por minuto en la solución ClK (22)y la mayor cantidad de
contracciones por solución en el caso de la nicotina (35).
 Solución Tiempo N° de Subgrupo
contracciones
Ringer 1 min 41
ClK 1 min 30
Cl2Ca 1 min 37 2
Nicotina 1 min 52
Tabla 2 : Resultados del subgrupo 2

Subgrupo 2

NICOTINA 52

CL2CA 37

N° de contracciones
CLK 30

RINGER 41

0 10 20 30 40 50 60

Grafico 2

En este grupo también obtuvo bueno resultados , solo hubo un pequeño error en cuanto a la
solución de Cl2Ca donde se obtuvo menor cantidad de contracciones por minuto con
respecto a la solución de ringer .
 Discusión

 Ringer :
La contracción muscular se puede inducir por factores mecánicos , químicos o eléctricos
, siendo este último la manera que se utilizó en el experimento, esta contracción
muscular se lleva a cabo por la interacción de los filamentos de actina y miosina de la
fibra muscular . Se hizo uso de Ringer al diseccionar la lombriz , bañamos
constantemente con esta solución es un fluido de montaje ya que permite que el
musculo liso de Lumbricus terrestris siga contrayéndose , a condiciones normales , es
una solución isotónica que contienes todos los iones necesarios para el proceso de
contracción , pero tenemos que tener en cuenta que la composición varía dependiendo
de la especie (CaCl2 0,12 g ; KCl 0,14g ; NaCl 6,50 g ; NaHCO 0,20 g). En el caso del primer
grupo presento 26 contracciones por minuto y en el segundo subgrupo 41 contracciones
por minuto , citando a la literatura mencionada anteriormente señala que se presenta
12 contracciones por minuto en condiciones normales , se presenta casi el doble hasta
el triple , se piensa que esto se debe a las diferentes composiciones de Ringer, como
mencionamos cada especie tiene una solución a concentraciones especificas o también
a la contaminación por medio de las pipetas(goteros ) con otras soluciones como la
nicotina.

 Con solución ClK:

La participación de ClK se da como una respuesta fisiológica , actúa como un estímulo
sensibilizante de Ca+2 , al encontrarse una gran concentración de Ca+2 en el medio
intracelular que proviene del retículo sarcoplasmico y del medio extracelular , pero en
mayor cantidad de este último .Para que el musculo regrese a su estado de relajación
debe ir disminuyendo las concentraciones de Ca+2 gradualmente , es por esto que las
contracciones disminuyen , se libera Ca+2 al medio extracelular , esto lo hace con ayuda
de los canales de K + , por lo tanto hay un ingreso de K + y salida de Ca+2, la liberación al
citosol se da con la activación de la quinasa y fosforilacion . Los canales de calcio se
cierran en estas condiciones , por lo tanto no se da la unión con el calmodulina , no se
activa la miosina , minizándose las contracciones hasta que se regule el sistema y se
produzca una nueva contracción , en el subgrupo 1 se observó concordancia con lo
planteado , disminuyo las contracciones por minuto de 26 a 22 y en el subgrupo 2 de
igual manera de 41 a 30 concentraciones por minuto , cabe mencionar que al agregar
una solución se esperaba 30 seg para observar los efectos.
 Con solución Cl2Ca :
Luego de agregar ClK lavamos con Ringer nuevamente , para que las células se
reestablezcan , esperamos un tiempo de recuperación , luego adicionamos la solución
con Cl2Ca . Tanto en animales vertebrados como invertebrados , el Ca+2 es el factor
regulador más importante en el mecanismo de la contracción muscular , permite la
interacción entre los filamentos de actina y miosina , la activación de la kinasa de la
miosina de cadena ligera por Ca2+ y Calmodulina cuya fosforilación genera la
contracción muscular y la unión directa del Ca2+ a la miosina en el caso de musculo liso
. La concentración de iones de calcio en el líquido extracelular es superior a 10-3 molar ,
en comparación con menos de 10-7 molar en el interior de la célula muscular lisa , esto
produce una difusión rápida de los iones de calcio hacia el interior de la célula desde el
líquido extracelular cunado se abren los poros de calcio. El tiempo para que se produzca
esta difusión es en promedio 200 y 300 ms y se denomina periodo de lactancia , este
periodo es aproximadamente 50 veces mayor para la contracción del musculo liso que
para el musculo esquelético , por lo tanto al aumentar la concentración de Ca2+ , al
agregar la solución de Cl2Ca , deberían aumentar las contracciones , pero de manera
gradual , en el subgrupo 1 resulto lo esperado ya que aumento las contracciones de 26
a 28 contracciones por minuto y en el subgrupo 2 los resultados no son malos ya que
vario de 41 a 37 contracciones por minuto , esto se debe a que no se realizó un buen
lavado y quedo algún remanente de ClK que disminuyo las concentraciones.

 Con solución de Nicotina :

El objetivo molecular primario de la nicotina son los receptores nicotínicos de

acetilcolina (nAChRs), que son canales ligados por el ligando compuestos de homo- o
heteropentamer de varias subunidades (α1-α10; β1-β4) y funcionan como canales de
entrada de cationes a través de la membrana plasmática . Nicotina interactúa con varios
nAChR subtipos con diferentes afinidades (1 a 130 μ M) . La activación de nAChR provoca
Ca2 + respuesta en parte a través de Ca2 + permeación directa a través del canal receptor
. Además, nAChR mediada por la despolarización de la membrana puede activar Ca2 +
dependiente de voltaje canales (VDCCs) para aumentar aún más Ca2 + señales generadas
por nAChRs. Estos dos mecanismos son complementarios fisiológicamente, de modo
que la entrada de Ca2 + a través de los canales nAChR que rectifican hacia adentro es
predominante en condiciones de reposo o hiperpolarizadas, mientras que la afluencia
de Ca2 + a través de VDCCs ocurre en los potenciales más despolarizantes. La nicotina
al inicio actúa como relajante muscular al liberar óxido de nitrógeno pero luego aumenta
las concentraciones considerablemente. En el caso del subgrupo 1 resulta lo esperado
se obtuvo la mayor cantidad de contracciones por minuto de 26 a 35 , y en el caso del
subgrupo 2 también se observa buenos resultados , la nicotina cumplió con su función ,
esto se dio debido a un buen lavado previamente con ringer .
 Cuestionario

¿Cuál es el efecto de las drogas sobre el músculo liso del tubo digestivo de
invertebrados y vertebrados?

Los bloqueadores de los canales de calcio (BCC), también conocidos como antagonistas
del calcio, bloqueadores de la entrada de calcio, o bloqueadores del canal lento, son
medicamentos que actúan mediante el bloqueo de la corriente de calcio hacia el interior
y afectan particularmente a las células donde la entrada de calcio es relativamente más
importante.

Los canales voltaje-dependientes de Ca2+, de la membrana se subdividen en 4 tipos

fundamentales según su electrofisiología y sensibilidad a ciertos fármacos y toxinas.
Estos canales se denominan en la actualidad:

 Canales L: De activación prolongada y alta conductancia. Localizados en el

músculo esquelético, cardíaco y vascular. Función: Contracción
 Canales T: De apertura transitoria (localizados en tejidos marcapasos). Función:
entrada Ca2+ a niveles negativos de potencial de membrana.
 Canales N: Ni L ni T, o neuronales. Función: liberación de transmisores en los
sinaptosomas cerebrales.
 Canales P: Localizados en las células Purkinge del cerebelo.
 Canales R: Sus características están siendo estudiadas.

Los "bloqueantes" específicos de estos canales son:

 Canales L: antagonistas del Calcio;

 Canales T: iones níquel, amilorida y mibefradil
 Canales N: conotoxina omega (veneno de un molusco marino) y-
 Canales P: veneno de las arañas de chimenea.

Los canales tipo L de Ca2+, se componen de diversas sub unidades: alfa 1, alfa 2, beta,
gama y delta.

Los lugares de unión a los antagonistas del calcio son heterogéneos. Se conocen tres
lugares de reconocimiento de las dihidropiridinas, a las que se accede desde la superficie
extracelular de la membrana. En cambio, el lugar de reconocimiento de las
fenilolquilamidas (verapamilo) se sitúa dentro de la célula y se extiende hasta la cadena
carboxiterminal del complejo. El Mibefradil se une a un sitio nuevo y único del canal de
calcio y puede competitivamente, inhibir o desplazar al diltiazem, al verapamil, etc. Sin
unirse al receptor de la dihidropiridina. Hasta cierto punto, el inicio lento de los efectos
del amilodipino y, en parte, su perfil farmacológico especial son consecuencia de la
ionización de la molécula al pH fisiológico normal, que "impide" su aproximación a los
lugares de unión.
 Bibliografía

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