Introducción
Encurtidos de pepino refrigerado han
ganado en popularidad en las últimas
décadas (actualmente estimado en alrededor
del 25% de las ventas de salmuera), ya que
conservan la calidad nítida y otros en
comparación con los procesos de
fermentación, encurtidos. Para la
fabricación de encurtidos refrigerados, los
pepinos son lavados y envasados en
salmuera con especias apropiadas.
Equilibrando las concentraciones de NaCl
oscilan entre 1% y 3%. Desemejante de
shelf-stable pick- generalmente no se
procesan térmicamente. La vida útil de los
encurtidos depende de la temperatura de
refrigeración y si Vinagre (ácido acético) y
conservantes (por ejemplo, ben-Zoato) son
agregados a la salmuera. Las características
de los productos en el final de su vida útil
pueden incluir un aumento de la turbidez y
del acidez de la salmuera, la formación de
gas y un cambio de color de los pepinos de
verde a oliva. La vida útil de las salmueras
refrigeradas es de alrededor de 3 semanas
cuando el vinagre y benzoato de sodio no
son agregados. La vida útil se extiende a
aproximadamente 3 meses con estos
ingredientes, si la temperatura se mantiene
entre 2 ° C y 5 ° C.
Tipo de producto contiene típicamente
0,2% a 0,4% de ácido acético y 0,1%
Benzoato sódico, con una salmuera pH muy
por debajo de 4,6 y típicamente 4,2 o
menos. Los encurtidos refrigerados no
acidificados, que son objeto de este estudio,
tienen un pH inicial de aproximadamente
5,5.
Etchells y Bell (1976) revisaron una amplia
gama de productos de salmuera, incluidos
los tipos no acidificados y acidificados.
Citaron la popularidad del tipo no
acidificado, especialmente en áreas
metropolitanas como la ciudad de Nueva
York donde se identifican por nombres
como "overnight", "half-sour", "Kosher
new dills", y los productos no acidificados
pueden someterse a ferrmentación
intencional o no intencional. Cuando
fermenta, el producto en salmuera se
mantiene fuera de refrigeración por algunos
días para permitir la fermentación leve
antes de empacar en todo- venta o venta al
por menor y ponerlos bajo
refrigeración. Cuando la turbidez de la
salmuera se hace evidente en los encurtidos
refrigerados, el ácido láctico bacterias
(LAB) son las principales responsables de
la turbidez (Reina 2003). Debido a que el
producto no está acidificado o tratado
térmicamente, el PH relativamente alto
(aproximadamente 5,5), y contiene
ingredientes vegetales frescos, la seguridad
de este tipo de producto ha sido una
preocupación, aunque no se conocen casos
de enfermedades transmitidas por los
productos. El número de LAB en o sobre la
fruta fresca de pepino es variado
dependiendo de la temporada de cosecha, el
origen de la fruta y el tamaño del fruto
(Etch-Ells y Jones 1943). Listeria
monocytogenes se ha demostrado que
crecen cuando se inoculan en el producto
con un número bajo de LAB bajo las
condiciones oratorias (Romick 1994). Si
estos productos fueron inoculados con un
cultivo de LAB, puede ser posible prevenir
el crecimiento o supervivencia de bacterias
patógenas por exclusión competitiva o
biocontrol (Breidt y Fleming 1997).
A pesar de los esfuerzos para desarrollar
culturas protectoras de LAB como
biocontrol en frutas y hortalizas
mínimamente procesadas (MPFV) en años
recientes (Bennik y otros 1999, Leroy y
otros 2002, Pal-Mai y Buchanan 2002), se
han identificado pocos cultivos para su uso
en productos alimenticios
comerciales. Rendimiento satisfactorio en
condiciones óptimas de laboratorio no es
garantía de éxito potenciales de biocontrol
sean aplicados a los alimentos en
condiciones de procesamiento típicas. La
adaptación ecológica y el crecimiento de los
cultivos en los productos alimenticios
determinara su eficacia como culturas de
biocontrol. Culturas bacterianas aisladas del
mismo tipo de vegetales o productos en los
que serán utilizados posteriormente como
agentes de control biológico pueden
posibilidades de éxito en el control de
patógenos (Vescovo y otros 1996; Breidt y
Fleming 1997). Los objetivos de esta
investigación fueron: seleccionar, aislar y
caracterizar LAB naturalmente Pepinos
salados y no acidificados adecuados para
uso como biocontrol Agentes en productos
de salmuera refrigerados no acidificados.

Materiales y métodos
Eli-tipo pepinillo producto
Los pepinos (de 3,5 a 3,8 cm de diámetro)
se lavaron y blanquearon para 15 s a 80ºC
(Breidt y otros 2000) y se colocaron
inmediatamente 46 Oz conteniendo 680 mL
de salmuera estéril fría (5C) preparada en
un autoclave (4% de NaCl, para equilibrar a
NaCl al 2%) con 1 g de Aceite estéril de
ajo (Aquaresin ajo, Kalsec, Kalamazoo,
Mich., EE.UU.) y 5 g de especias de
decapado irradiadas, estériles (Ba-Tempte,
Brooklyn, NY, ESTADOS
UNIDOS). Anteriormente hemos
encontrado que el aceite de ajo Aquaresin
del ajo no presenta flora microbiana
detectable (datos no mostrados). Este
procedimiento reduce significativamente la
microflora total y aumenta la vida útil, pero
no elimina el LAB y otras microfloras
típicamente presentes en productos de
salmuera refrigerados no acidificados
(Breidt y otros) 2000). Las especias se
irradiaron con una dosis de 13 kGy en
recipientes de capacidad de 1 litro mediante
el uso de Co60 (Departamento de Ingeniería
Nuclear, NCSU, Raleigh, NC, EE.UU.).
Los frascos se refrigeraron a 5ºC
durante 3 semanas y después se
transfirieron a varias temperaturas de abuso
(16ºC, 25ºC, 30ºC). Las muestras de
salmuera fueron diluidas apropiadamente en
solución salina estéril (NaCl al 0,85%) y en
placas de agar De Man, Rogose y Sharpe
(MRS) (Difco, Detroit, Mich., EE.UU.)
suplementado con azida sódica al 0,02%
(modificado MRS o MMRS) para
seleccionar LAB. Las bacterias fueron
enumeradas por automático utilizando una
máquina de chapado en espiral (Autoplate
4000, Spiral Biotech, Bethesda, Md.,
EE.UU.) y una placa automatizada de
lectura (QCount, Spiral Biotech). Colonias
aisladas con diferentes psicologías fueron
re-rayados en MRS agar.
También se tomaron muestras de
pepinos blanqueados y no blanqueados para
enumerar la carga inicial de LAB. Los
pepinos (200 g) fueron blanqueados con
solución salina estéril (NaCl al 0,85%)
durante 2 min a alta velocidad. Las
muestras mezcladas se mezclaron en un
estomago durante 1 minuto en el "alto"
(Stomacher 400, Spiral Biotech); La
suspensión celular fue eliminado del lado
del filtro de las bolsas stomacher (Spiral
Biotech) y chapado. Para enumerar el bajo
(<100 unidades formadoras de colonias
[CFU] /G) número de LAB, se utilizaron 3
métodos diferentes de chapado:
propagación (0,1 ml) usando un separador
de vidrio, filtración por membrana usando
filtros de botella (muestras de 100 ml,
Millipore Corp., Bedford, Massachusetts,
USA), y verter el revestimiento (muestras
de 1 mL) sobre agar MMRS.
Culturas bacterianas y métodos de
identificación
Las bacterias utilizadas en este
estudio, además de los aislados descritos
subsecuentemente, se enumeran en la Tabla
1. LAB se cultivó durante la noche (15 h) A
30ºC en caldo MRS. Escherichia coli K12
y Pseudomonas flu-orescens se cultivaron
durante la noche a 37 C en tripticasa de soja
de la glucosa (ETG) caldo. Los
aislamientos LAB se cultivaron en agar
MRS y se ensayaron en busca de gas
producción de glucosa en caldo MRS que
contiene 1% de glucosa con los tubos de
Durham. El metabolismo fermentativo
(homofrmentor o heterofermentor) se
determinó con Heterolactic-Homo-
Diferenciación láctica (HHD) (McDonald y
otros 1987). Reacción de catalasa se
determinó por el método de 3% H2O2
(Paludan-Muller y otros 1999) y el
citocromo oxidasa por Dry-Deslice las tiras
de oxidasa (Difco). Aislados presuntivos de
LAB (catalasa y oxidasa negativas de las
placas de agar MRS) se caracterizaron
además por una reacción en cadena de la
polimerasa (PCR) (Breidt y Fleming 1996)
utilizando el método intergénico 16S-23S
espaciador transcrito (ITS), seguido por
restricción con RsaI (ITS-PCR). Primers
para la PCR fueron G1-16S (5
GAAGTCGTAACAAGG 3) y L2 - 23S (5
GGGTTTCCCCATTCGGA 3). PCR fue
realizada usando un Robocycler Gradient
96 (Stratagene, La Joya, Calif.,
EE.UU.). Aislados representativos de cada
grupo fueron más caracterizado por
secuenciar regiones variables en las
primeras 350 bases
Desde el extremo 5 el gen 16S rRNA
(Barrangou y otros 2002) utilizando los
cebadores RU-16S (5
'AGAGTTTGATCCTGGCTCAG 3) y RD-
16S (5
GTCTCAGTCCCAATGTGGCC3). Todos
los cebadores se obtuvieron de Sigma-
Genosys (The Woodlands, Tex.,
EE.UU.). Productos de PCR fueron
purificados antes de la secuenciación
utilizando un Wizard SV PCR purificación
Kit (Promega, Madison, Wis.), Y la
secuenciación fue realizada por Davis
secuenciación (Davis, California,
EE.UU.). La identificación bioquímica fue
realizado mediante un método de
microplaca (AN Anaerobic Microplate,
Biolog, Hayward, Calif., EE.UU.) o el kit
API 50 CHL (Biomerieux, Hazel-
Madera, Mich., EE.UU.) de acuerdo con las
instrucciones del fabricante.
Ensayo de Bacteriocinas
El cribado para la producción de
bacteriocina se llevó a cabo con Agar
método de ensayo de recubrimiento
(Fleming y otros 1975). Culturas se
hicieron crecer durante la noche (15 h) en
caldo MRS a 30ºC y se cosecharon por
centrifugación (13.000 g, 10 min). El
sobrenadante se ajustó a pH 7 con NaOH,
se hierve durante 1 minuto a 100ºC para
seleccionar para termo- bacteriocinas
estables, y el filtro esterilizado. Para placas
de recubrimiento, 10 L el sobrenadante
libre de células se colocó sobre agar MRS o
TSG (tryp-Ticase agar de soja más 1% de
glucosa) y se dejaron secar. Las placas se
cubrieron con 3 ml de agar blando (0,75%
de agar) que contiene aproximadamente
10 6 células CFU / mL de una noche turbia
cultivo de los organismos objetivos
indicados (discutidos posteriormente). Las
placas se incubaron 24 h a 30ºC o 37ºC y se
comprobaron zonas de inhibición alrededor
del área de mancha después de 24 h. Un
control positivo punto de sobrenadante de
un productor de nisina
conocido, Lactococcus lactis LA218, se
incluyó en cada ensayo. Además de la
incubación a 30ºC, placas
con Listeria como el organismo indicador
se incubaron a 5 C Durante 15 d.
Determinación de tasas de crecimiento y
experimentos de biocontrol
Las tasas de crecimiento de LAB
y L. monocytogenes B164 (serotipo 4b)
fueron determinados utilizando un lector de
microplacas automatizado (Modelo
EL x 808 UI lector de microplacas Bio-Tek
con Kineticalc V2.0 Software, Bio-Tek,
Winooski, Vt.) A una densidad óptica de
600 nm (OD). Las tarifas fueron calculadas
a partir de los datos de (OD) utilizando un
modelo Gompertz con paquete de software
de ajuste de curva no lineal (F. Breidt,
inédito). Los experimentos se realizaron en
un volumen final de 200 µL con células de
un cultivo de una noche se inocularon con
una inicial A600 de 0,05 (aprox. 1
10 7 UFC / ml) en medio de jugo de pepino
que contiene 2% o 4% Sal a 5ºC, 10ºC,
15ºC y 21ºC. Medio de jugo de pepino
(Breidt y otros 2004) consistente en 60% de
zumo de pepino y 40% de agua se esterilizó
por filtración y se almacenó a 5ºC hasta su
uso. Para el crecimiento curvas y
experimentos de biocontrol, las células se
incubaron en 15 mL tubos de ensayo de
tapa roscada de plástico con células
preparadas Cussed previamente) en un
volumen final de 10 ml. Los tubos se
colocaron en un baño de agua de
calentamiento-enfriamiento (Neslab, RTE-
211, Neslab Instruments, Inc., Newington,
NH, EE.UU.). Para experimentos de
cambio de temperatura, la temperatura del
baño se ajustó como se indica. Las células
fueron mediante placas a intervalos
apropiados en agar MRS (LAB) o TSG
(Listeria). Todos los ensayos se realizaron
con 2 o más replicaciones.
Análisis estadístico
El análisis de la varianza fue
calculado por el Lineal General Modelos
Procedimiento de SAS versión 8.0 (SAS
Inc., Cary, NC, USA).
Resultados y discusión
Microbiología de los encurtidos del tipo-
deli
Los recuentos totales de aerobios en
placas sobre los pepinos tenían entre 103 y
104 UFC/g después del escaldado. LAB
dominó la microflora de los encurtidos
como la fermentación ocurrieron, a pesar de
que sólo representaban el 1% del recuento
microbiano total (10 a 100 UFC /G) en los
pepinos después de blanquear. La turbidez
de la salmuera para A 5ºC típicamente
ocurrieron a las 5 semanas o más después
de la salmuera. En algunos casos, no se
observó turbidez después de varios meses.
Aislados bacterianos
Se obtuvieron 118 aislamientos
LAB de la salmuera de los productos
almacenados a 5 ° C, 16 ° C, 25 ° C y 30 °
C. Aislados tentativamente identificados
como LAB por pruebas bioquímicas, que el
45,8% eran homofermentadores y el 54,2%
eran heterofermentadores utilizando tanto el
medio HHD como los métodos de tubo
Durham. Bacterias con diferentes patrones
de identificación molecular de sus patrones
de PCR ITS PCR-RFLP. Elegido para la
identificación secuenciando el extremo 5
'del ARNr 16S (Que contiene 2 regiones
variables). Caracterización genotípica de
los aislamientos se correlacionaron bien con
su perfil bioquímico como determinado por
pruebas API o BIOLOG, con la excepción
de Weissella y Enterococcus (Tabla 2). En
el caso de Enterococcus, no identificaron en
el BIOLOG o en los bioMérieux (API)
bases de datos. En el caso
de Weissella spp., Se identificaron 16 cepas
como Lactobacillus coprophillus por API
50 CHL. algunos Lactobacillus
y Leuconostoc spp. han sido reclasificados
como Weissella, y L. coprohillus ahora se
conoce como Weissella confusa (Paludan-
Müller y Otros 1999). Las bacterias
identificadas
incluyen Enterococcus, Lactococcus, Leuco
nostoc, Lactobacillus, Pediococcus, y Weiss
ella
especies. La temperatura parecía ser un
factor importante en el tipo de microflora
aislada de la salmuera no acidificada
producto: especies de Lactobacillus se
aislaron a las 5 C; Leuconostoc especies a 5
° C y 16 ° C; Enterococcus a los 16 C, 25 C
y 30 C; y Lactococcus y Weissella en 16 C,
18 C, y 25 C (Tabla 2).
Caracterización de aislamientos
Las tasas de crecimiento de LAB
seleccionados se compararon con el
crecimiento tasa de L. monocytogenes B164
a 20 ° C y 5 C en el jugo de pepino Medio a
diferentes concentraciones de sal (0%, 2% y
4% de NaCl). A 20 C, L.
mesenteroides LR50, LR55, Lactobacillus
curvatus aislamientos de este estudio, así
como L. lactis LA218 (una cepa productora
de nisina aislado originalmente de
chucrut; Harris y otros 1992) fueron
encontrados a crecer más rápido que L.
monocytogenes B164 en absoluto
concentración de sal (Figura 1), aunque al
4% de NaCl, la tasa de crecimiento de
la cepa L. lactis fue similar a la
cultura monocytogenes L..
Las tasas de la figura 1-crecimiento de
bacterias del ácido láctico y Listeria
monocytogenes en el jugo de pepino a 20
C con 0%, 2%, y NaCl al 4%. Las barras
abiertas = Lactobacillus
mesenteroides LR50; diagonal ascendente
= Lactobacillus curvatus LR55; hacia
abajo diagonal = Lactococcus
lactis LA218; rayitas cruzadas = Listeria
monocytogenes B164.
A 5º C, L. monocytogenes crecieron
más rápido que todos los aislamientos de
LAB, alcanzando la densidad celular
máxima en 5 a 7 d (datos no mostrados).
Debido a su metabolismo
homofermentativo y sus características, L.
curvatus LR55 fue elegido para la prueba
adicional como un putativo organismo
biocontrol. Se encontró que L.
curvatus LR55 hizo Bacteriocina (como se
observa en la placa de agar) y crecieron más
lento que la L. monocytogenes en 5 C. Sin
embargo, un abuso de temperatura 21º C
podría inhibir L. monocytogenes. En un
experimento de cambio de temperatura (de
5º C a 21º C) realizado en
medio jugo de pepino con un 4% de
NaCl, recuentos de L. monocytogenes se
redujeron rápidamente después del cambio
en la temperatura cuando L. curvatus LR55
estaba presente, en comparación con un
cultivo puro de L. monocytogenes (Figura
2).
Producción de bacteriocina por
aislamientos
Las bacterias productoras de
bacterias productoras de muestras de
salmuera Identificadas en placas de agar
MRS por la inhibición del crecimiento de
las colonias de taladrado en los patrones
espirales obtenidos mediante el chapado de
la salmuera muestras. El espectro de
actividad antimicrobiana analizado por la
zona de ensayo de inhibición contra el
panel de cepas mostradas en la Tabla 1.
Tres de estos posibles aislamientos
productores de bacteriocinas mostraron
actividad antimicrobiana termoestable de
los sobrenadantes del cultivo cuando se
ensayaron sobrenadantes de salmuera. Estos
aislamientos pertenecían
géneros Lactococcus (LR80), Enterococcus
(LR110), y Leuconostoc (LR50), y mostró
que la actividad bacteriocina contra 3 L.
monocytogenes serotipo 4b cepas (B181,
B182, B184). Curiosamente la zona de
inhibición no era evidente cuando los
sobrenadantes de salmuera
probado contra cepas de L.
monocytogenes B183 (serotipo 1 / 2a) y
B184 (serotipo 1 / 2b). A nuestro entender,
este tipo de selectividad de la cepa de
actividad de la bacteriocina no se ha
informado previamente. Sin embargo,
después de que los cultivos se transfirieron
en el laboratorio y se cultivaron para
almacenamiento congelado, la actividad
bacteriocina anti-listerial aparentemente
perdió. Resultados similares con los
productores de bacteriocina de clase II
fueron reportados por otros autores
(Vaughan y otros 2001).
Seis cepas de L. lactis (cepas LR1 a
LR7) mostraron bactericida estables
actividad similar a cuando se
usó Pediococcus dextrinicus como el
organismo indicador (Figura 3). La
supuesta actividad bacteriocina también se
encontró estos aislados para
inhibir Lactobacillus plantarum, L.
mesenteroides y L. monocytogenes 4b, que
es similar al paterno esperado para la
bacteriocina nisina. Curiosamente, 3 de
estos aislados, LR5, LR6 y LR7, no
mostraron actividad detectable contra L.
monocytogenes 1 / 2a y 1 / 2b
cepas. Caracterización adicional de esta
actividad bacteriocina será objeto de trabajo
futuro.
Discusión
La microflora de frutas y verduras
está relacionada con la agronomía
incluyendo el agua de riego, los fertilizantes
y el tipo de suelo (Taormina y Beuchat
2002). La ecología del resultado productos
vegetales frescos depende de las
condiciones de características de las frutas y
hortalizas que se están procesando. Por
frutas con pH bajo, como tomates,
lactobacilos típicamente predominantes
durante el almacenamiento, aunque la
microflora inicial incluye levaduras, mohos
y bacterias Gram-negativas (Drosinos y
otros 2000). El deterioro de los vegetales de
hoja, naturalmente bajos en contenido de
debido a bacterias Gram-negativas, pero en
productos ricos en azúcar tales como
Pepinos y repollo, descomposición o
microflora fermentativa se compone de
LAB y levaduras (Jacxsens y otros 2003).
En los productos vegetales
salteados, la disminución del pH, la
concentración la temperatura y la
temperatura influyen en el tipo de
microorganismos la fermentación (Fleming
y otros, 1995). Cuatro etapas pueden
diferenciarse en fermentaciones vegetales,
cada una caracterizada por diferentes
grupos de microorganismos: iniciación
(varios Gram-positivo Bacterias Gram
negativas), fermentación primaria (LAB y
levaduras), fermentación secundaria
(levaduras) y post-fermentación
(Crecimiento superficial de levaduras
oxidativas, mohos y bacterias). En los
vegetales la fermentacion de mesa donde
las bajas temperaturas de sal y común,
como fermentaciones de col (2% de NaCl y
18 C), el LAB poblaciones están dominadas
por heterofermentors
como Leuconostoc o Weisella spp. Al
comienzo de la fermentación, seguido de
una variedad de homofermentadores
(Plengvidhya 2003). En las fermentaciones
con mayores concentraciones de sal inicial
y temperaturas más cálidas típico de las
fermentaciones de pepino y aceituna (6% o
más de NaCl, 25º C), LAB
homofermentativo tales como L.
plantarum predominan las fermentaciones
(Fleming y otros 1995). Refrigerado deli-
estilo salmuera productos contienen una
salmuera de baja sal normalmente un 2%
NaCl.
El agente de biocontrol ideal para
los encurtidos no acidificados deli podría
describirse como sigue: (1) perteneciente al
grupo LAB; (2) Un homofermentor para
evitar la producción de gas; (3) capaz de
sobrevivir a la ambiente inicial de hasta 4%
de sal y bajas temperaturas de
almacenamiento; (4) capaces de crecer
lentamente pero más rápidamente que la
bacteria durante el almacenamiento
refrigerado, pero sin acortar vida útil del
producto; Y (5) capaces de crecer más
rápido que los patógenos y para producir
sustancias inhibidoras (bacteriocinas)
contra la patógeno a temperaturas de
abuso. Idealmente, el candidato de
biocontrol organismos serían capaces de
utilizar los recursos bioquímicos
disponibles, y por lo tanto se puede aislar
preferiblemente del producto para que se
pretende utilizar (Breidt y Fleming
1997). Las terminales deben ser de
aproximadamente 4 para conservar el
pepino fresco sabor y color en encurtidos
deli-estilo. Los consumidores de este tipo
de no le gustan el sabor ácido fuerte de las
salmueras que resulta de altas
concentraciones de ácido láctico. La
fermentación espontánea de los encurtidos
refrigerados no acidificados en caso de
abuso o temperatura refrigerada. Se debió
principalmente a LAB. Esto sugiere que el
producto puede ser considerados inocuos
para el consumo humano después del
abuso.
Dos LAB aislados identificados en
este estudio, L. mensenteroides LR50 y L.
curvatus LR55, fueron capaces de crecer
más rápido que L. monocytogenes genes en
presencia de sal de 4% en jugo de pepino
(Figura 1), mientras que una cepa de L.
lactis nisina producing- de choucroute
(tipos de fermentado a NaCl al 2%) era
aparentemente menos tolerante a la sal. Los
mecanismos utilizados por los aislados
LAB (LR50 y LR55) para inhibir Listeria a
temperaturas de abuso queda caracterizado,
pero hizo no parecen implicar bacteriocinas
termoestables. Otros factores están
probablemente involucrados, como la
producción de ácidos y la disminución del
pH y producción de otros metabolitos.
conclusiones se han elaborado
con Salmonella enteritidis, lo que podría
crecer en tomates a temperatura ambiente,
pero no en refrigeración las temperaturas
debido al crecimiento de LAB que produjo
láctico, acético, propiónico y fórmico,
dando como resultado una disminución del
pH (Drosinos y otros 2000). Lactobacillus
curvatus LR55, aislado de salmueras no
acidificadas, reúne varios, pero no todos, de
los criterios para un agente de biocontrol
ideal contra L. monocytogenes en minería
productos de salmuera procesados de forma
homofermentativo metabolismo (lo cual es
deseable para que no se produzca
producción de gas en frascos) de
supervivencia a bajas temperaturas, y
características de crecimiento en una gama
de condiciones de sal. Como un aislado de
mínimamente procesado se
presumiblemente bien adaptado para el
crecimiento en la presencia de ajo, sal y
especias presentes en estos
productos. Ensayos productos de la
salmuera de mínimamente procesados co-
inoculados
con L.L. monocytogenes y curvatus o
cultivos similares que producen bacteriemia
teriocins activo contra L.
monocytogenes (que L. curvatus LR55 No
hace) será objeto de futuras investigaciones.