U.T.I.

Biologa Celular

Oxidacin de cidos grasos y

ciclo de Krebs

Departamento de Bioqumica
Noviembre de 2005
Fases de la respiracin celular

1. La oxidacin de cidos grasos, glucosa y

algunos aminocidos produce acetil-CoA

2. Los grupos acetilo se incorporan al ciclo de

Krebs, se oxidan a CO2 y la energa liberada
se conserva en forma de ATP y en las
coenzimas reducidas NADH y FADH2

3. Los electrones transportados por el NADH y

el FADH2 se transfieren a la cadena
respiratoria, donde fluyen hacia el O2 para
formar H2O y promueven la formacin de ATP
en el proceso de fosforilacin oxidativa
Anatoma bioqumica de la mitocondria
-Oxidacin de cidos grasos
Los cido grasos deben ser activados
antes de su entrada a la mitocondria
La ligasa especfica para cidos grasos
de cadena larga es una enzima unida a
membrana mitocondrial externa y al
retculo endoplsmico
El ciclo de la carnitina permite la entrada
de los cidos grasos a la mitocondria

Translocasa
Estrategia general de la -oxidacin
 Balance de la -oxidacin (C16)

Palmitoil-CoA + 7CoA-SH + 7FAD + 7NAD+ + 7H2O

8 Acetil-CoA + 7FADH2 + 7NADH + 7H+

Balance de la -oxidacin (C16)
En el ltimo ciclo de oxidacin de un cido
graso de cadena impar el sustrato tiene 5
carbonos: la fragmentacin tioltica produce
acetil-CoA y propionil-CoA
 Control de la oxidacin de los cidos grasos

En la mayora de las clulas el control depende

de la disponibilidad de sustrato

En animales superiores esta disponibilidad est

determinada por accin de hormonas

En el hgado el malonil-CoA inhibe a la carnitina

acil transferasa I y por tanto la -oxidacin
El ciclo de Krebs
 La decarboxilacin oxidativa del piruvato
produce acetil-CoA, CO2 y NADH

Complejo multienzimtico: piruvato deshidrogenasa

formado por 3 enzimas y 5 coenzimas diferentes
implicadas en la reaccin y dos enzimas adicionales
implicadas en la regulacin
El complejo piruvato deshidrogenasa utiliza
5 coenzimas diferentes
Pirofosfato de tiamina Lipoamida

NAD FAD CoA

 El complejo piruvato deshidrogenasa est
formado por 3 enzimas diferentes

Enzima Coenzima No/complejo

E1 : piruvato deshidrogenasa TPP 24
E2 : dihidrolipoil transacetilasa Lipoato, CoA 24
E3 : dihidrolipoil deshidrogenasa FAD, NAD 12
 Los productos intermedios permanecen
unidos al complejo piruvato deshidrogenasa
Panormica del ciclo de Krebs

El ciclo de
Krebs tiene
8 pasos
 1. Formacin de citrato

El citroil-CoA es un interme-
diario transitorio de reaccin

La hidrlisis del enlace tioster

del intermediario hace que la
reaccin sea exergnica
2. Formacin de isocitrato va cis-aconitato

La aconitasa contiene un
centro hierro-azufre que
acta como centro de
fijacin de sustratos y
centro cataltico
3. Oxidacin del isocitrato a -cetoglutarato y CO2

Existen dos formas diferentes de isocitrato deshidrogenasa:

NAD dependiente (matriz mitocondrial)
NADP dependiente (matriz mitocondrial y citosol)
4. Oxidacin del -cetoglutarato a
succinil-CoA y CO2

El complejo de la -cetoglutarato
deshidrogenasa es muy parecido al
complejo piruvato deshidrogenasa,
tanto en estructura como en funcin
 5. Conversin del succinil-CoA en succinato

La formacin acoplada de GTP (o ATP) a

expensas de la energa liberada por la
decarboxilacin oxidativa del -ceto-glutarato es
otro ejemplo de fosforilacin a nivel del sustrato
 6. Oxidacin del succinato a fumarato

El malonato es un
fuerte inhibidor
competitivo de
esta enzima
En eucariotas, la succinato deshidrogenasa
se encuentra unida a la membrana mitocondrial
interna, contiene tres centros hierro-azufre
diferentes y una molcula de FAD unida
covalentemente.
7. Hidratacin del fumarato y produccin
de malato

Esta enzima es
especfica para el
fumarato y el L-malato
8. Oxidacin del malato a oxalacetato
 Balance del Ciclo de Krebs

Acetil-CoA + 3H2O + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi

2CO2 + 3NADH + FADH2 + CoASH + GTP

La energa de las oxidaciones del ciclo se
conserva con eficiencia
Los C de los cidos grasos entran al ciclo de Krebs
mayoritariamente va acetil-CoA
Los C de los aminocidos entran al ciclo de Krebs
en diferentes puntos
Los componentes del ciclo son importantes
intermediarios biosintticos (va anfiblica)
Las reacciones anaplerticas reponen los
intermediarios del ciclo de Krebs
Regulacin del Ciclo de Krebs
 Regulacin del ciclo de Krebs
Piruvato deshidrogenasa

1. Regulacin alostrica:
alostrica
Inhibidores: ATP, acetil-CoA, NADH y cidos grasos
de cadena larga
Activadores: AMP, CoA y NAD+

2. Modulacin covalente:
covalente adems de E1, E2 y E3 el complejo
PDH contiene 2 enzimas reguladoras capaces de modificar
covalentemente a E1
E1 quinasa : al fosforilar a E1 la inactiva
esta quinasa es activada por NADH y acetil-CoA
E1 fosfatasa:
fosfatasa al defosforilar a E1 la activa
esta fosfatasa es activada por Mg++ y Ca++
 Regulacin del ciclo de Krebs

1. Disponibilidad de sustratos

2. Inhibicin por acumulacin de productos:

3. Regulacin de las siguientes enzimas:

Citrato sintasa
Inhibidores: NADH, succinil-CoA, citrato, ATP
Activadores: ADP
Isocitrato deshidrogenasa
Inhibidores: ATP
Activadores: Ca++, ADP
-cetoglutarato deshidrogenasa
Inhibidores: succinil-CoA, NADH
Activadores: Ca++

El factor regulador ms importante es la relacin

intramitocondrial de [NAD+] / [NADH]