Unidad 3 Receptores PDF

Ctedra de Qumica Medicinal
Fac Cs. Exts. Qcas.y Nat-UnaM
RECEPTORES Y TRANSMISORES
Los receptores son los componentes de una clula que tienen la capacidad de
identificar una sustancia, hormona o neurotransmisor. La idea de que existen
receptores, viene de principios de siglo, cuando Langley, Dale y cols., sugieren que
pueden existir sustancias receptivas en la superficie de las membranas de clulas
excitables: Lo primero, que al menos, dos sustancias especiales (sustancias
receptivas), estn presentes en la regin neural del msculo, y que los impulsos
nerviosos slo pueden causar contraccin actuando en una sustancia receptora. Lo
segundo que las sustancias receptoras, forman ms o menos fcilmente
componentes disociables. As, la nicotina en combinacin con esas sustancias...
(Langley, 1909).
El concepto de receptores como habiamos visto fue introducido por Paul Ehrlich y Paul
Langley (1902). Este ltimo lleg a la conclusin de que los frmacos deban fijarse en
alguna parte, que deba haber una unidad receptora o de fijacin: Esto mediante sus
observaciones de los efectos del curare, que produce paralizacin del msculo estriado
por ausencia de respuesta a estmulos, not que el nervio estaba indemne, al igual que el
msculo, era el estmulo el que no se transmita. Deba existir que haba una zona en la
que se estaba fijando el F.
Paul Ehrlich y Sachahiro Hata a inicios del siglo XX
Posteriormente Ehrlich concluy que los Frmacos actuaban porque tenan que fijarse en
alguna parte. Estudiando tejidos vivos teidos, consigui teir en forma selectiva algunas
Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 1

clulas y no el resto del tejido, descubriendo el principio de la SELECTIVIDAD; una

sustancia (F o curare en este caso) puede actuar selectivamente sobre una clula. Luego
estudi el tratamiento de algunas enfermedades parasitarias y consigui obtener algunos
Frmacos que podan destruir el parsito sin afectar las clulas del husped. Este es el
gran principio de la farmacologa, en el sentido de obtener los Frmacos ms selectivos
posible, que acten exclusivamente sobre la clula enferma (a veces muy difcil, ej.
terapia contra el cncer, ya que antineoplasicos pueden detener el crecimiento de los
tumores, pero tambin afectan tejido sano, vale decir, son frmacos que tienen muy poca
selectividad).
Ehrlich deca que en la estructura qumica de los Frmacos haba una zona que denomin
TOXOFORO, la que ejerca una accin y para ello deba fijarse en alguna parte del tejido:
los QUIMIORRECEPTORES. El resto de la molcula del frmaco sirve como transporte
para el grupo funcional.
Hay algunas propiedades de los Frmacos que refuerzan esta teora, en el sentido de que
la accin debe estar ejercida en una parte especfica:
o La potencia, es decir, hay Frmacos que actan con dosis muy bajas (10-6
M)
o Existe una especificidad qumica, los Frmacos con estructura semejante
provocan generalmente los mismos efectos.
o Tambien hay una especificidad biolgica, los Frmacos actan slo
sobre algunas clulas y no sobre otras, lo que equivale a la selectividad.
Se pueden clasificar los Frmacos en 2 grandes grupos, de acuerdo a la relacin que hay
entre la estructura qumica y la actividad:
1 Frmacos estructuralmente inespecficos:

- accin biolgica no depende de su estructura qumica, sino de sus propiedades
fsicoqumicas (pK, poder de oxido-reducin, modificacin de la permeabilidad de las
membranas).
- actan en dosis relativamente altas
- al introducir alteraciones en su estructura qumica no cambia sustancialmente su
actividad.

Ej.: anestsicos generales, alcohol, antispticos (cresol).
2 Frmacos estructuralmente especficos: grupo ms importante de Frmacos.

- actividad biolgica depende de la estructura qumica
- modificaciones en la estructura qumica alteran su efecto, pudiendo aumentar su
actividad o incluso generando Frmacos antagonistas.
- tienen un alto potencial, se requieren bajas dosis para lograr su accin.
RECEPTORES: son molculas de naturaleza proteica, generalmente asociadas a

membranas celulares. Esta protena puede estar asociada a otros elementos que son los
que determinan el efecto.
El receptor est encargado de reconocer el ligando, tiene la capacidad de reconocerlo en
forma selectiva y se une desencadenndose el efecto, el cual est mediado por otras
estructuras que estn unidas al R. Un R para ejercer su accin lo tiene que hacer a travs
de 2dos mensajeros.
Se traduce la unin del receptor con el F en una seal que va al interior de la clula, una
transduccin de la informacin, y en la clula pueden pasar muchos eventos, entre otras
cosas liberacin de 2dos mensajeros que promueven cambios en la permeabilidad de las
membranas.
Hay dos etapas que median la interaccin F-R:

1.- Unin: el reconocimiento de los dos elementos moleculares.
2.- Transduccin de la seal y la aparicin del efecto.
La mayora de los Rs responden a protenas que estn en la membrana. Pero no
debemos olvidar que existen tambin protenas que estn en el citosol, en el
citoplasma de la clula, y son unidades de transduccin que se relacionan con la
respuesta de ciertas hormonas, las cuales se unen a Rs solubles ubicados en el
citosol, los que tienen que ver con la asociacin con DNA, o sea, una estructura
proteica que se une al F y que tambin se une al DNA, y posteriormente esto es
incorporado al ncleo, modificndose de esta manera la sntesis proteica.
De esta manera actan una gran cantidad de hormonas esteroidales.
Respuestas funcionales luego de la unin del ligando o F al R:

a. Modificacin a la permeabilidad inica: un tipo de respuesta al acoplamiento F-

R es el aumento a la permeabilidad a ciertos iones, vale decir, hay R que estn
ligados a canales inicos que al ser estimulados provocan la entrada o salida de
ciertos cationes o aniones.
b. Modificacin de ciertas protenas asociadas al R: ej.: la familia de las
prostaglandinas. Hay Rs que estn asociados a sistemas enzimticos, de modo
que al unirse el agonista con su R, se activa este sistema enzimtico y aumenta la
formacin de sustancias intracelulares, que son los 2dos mensajeros. Ej.: Rs -
adrenrgicos asociado a ciclasa, sta se activa cuando llega el ligando
favorecindose la formacin de AMPc, que acta como 2do mensajero. Otros
provocan formacin de GMPc con movilizaciones de Ca, actan amplificando la
informacin que viene del R.
c. Unidades de transcripcin que pueden modificar la sntesis de protenas.
Tabla : Neurotransmisores conocidos y supuestos.
Un enfoque para distinguir clases de receptores es identificar molculas implicadas en la

transmisin rpida comparadas con las de transmisin lenta. Los componentes que
generalmente se cree que interactan con los ligandos de los canales inicos de apertura
y los receptores para la neurotransmisin rpida incluyen: cido glutmico, acetilcolina,

GABA y glicina. Los neurotransmisores asociados a cambios en segundos mensajeros

intracelulares como el AMP cclico e inositol trisfosfato, incluyen: serotonina, dopamina,
noradrenalina y neurotransmisores asociados a muchos pptidos. Los neurotransmisores
que actan a travs de canales inico y sistemas de segundos mensajeros, considerados
de transmisin rpida y lenta respectivamente. Esta categorizacin simple, es un punto de
arranque til pero hay muchas excepciones notables. Por ejemplo, aunque la acetilcolina
y el cido glutmico a menudo se asocian a (rpido) ligandos de canales inicos de
apertura, pueden tambin actuar a travs de (lento) receptores metabotrpicos para
modular los niveles de segundos mensajeros intracelulares. Inversamente, algunos de los
efectos de las catecolaminas parece que ocurren a travs de la modulacin de la
conductancia de los canales de calcio y/o potasio.
Categoras de transmisin sinptica.
REPRESENTACIN GRFICA DE RECEPTORES
La teora eneunciada anteriormente establece que los receptores ocupan un espacio

fsico concreto y real, que poseen una estructura, y que dicha estructura tiene que ver con
su funcionamiento.
Existen diversos modos de representarlos, entre otros el topolgico, el esquemtico, el
que los incluye en una cadena de eventos disparados a partir de su estimulacin, entre
otros. La conveniencia entre una u otra de dichas representaciones depende de cul o
cules aspectos se quieran enfatizar. Veamos cada una de las representaciones
mencionadas.

Topolgica: su nfasis est dirigido a mostrar, aunque esquemticamente, cul

es la estructura del receptor en s mismo, identificando sus diferentes dominios y
sitios de accin. Un ejemplo tpico podra ser el receptor 7TMS (as llamado
porque presenta siete hlices proteicas que se encuentran ancladas en la bicapa
lipidica de la membrana plasmtica) de epinefrina, con siete dominios
transmembrana.
Receptor de epinefrina: se puede ver su estructura de siete dominios transmembrana

(numerados del I al VII), y los segmentos extra e intracelulares del receptor. AG=
agonista; OH= hidroxilos; N= extremo amino terminal (extracelular); C= extremo
carboxiterminal (intracelular); Protena G= seala al sitio de interaccin con el receptor.
Esquemtica de la transduccin de seales a partir del receptor: seala,

simplemente, el o los caminos (muchas veces hipotticos o en plena revisin a
medida que se obtiene mayor evidencia experimental) que sigue la transduccin
de seales a partir de la estimulacin de un receptor dado. Ver ms adelante
Esquemtica de los sitios de accin presentes en un receptor: tiene por

objetivo sealar cul o cules son los dominios que se reconocen en la estructura
de un receptor, pero de un modo claramente esquemtico, tendiendo a enfatizar la

funcin y no su estructura topolgica. Como ejemplo vemos el receptor GABA,

muy abundante en el SNC.
Receptor de Gaba/canal de cloro. Tomado de "Basic Neurochemistry" (GJ. Siegel)
Se observa los siguientes dominios del receptor GABA y sus sitios regulatorios. Las siglas
representan lo siguiente: Cl-= canal de cloro (aumentada por la activacin del receptor
GABA, y al ingresar ms cloro se refuerza la hiperpolarizacin de la clula -tpico receptor
inhibitorio); BDZ= benzodiacepinas (grupo muy conspicuo de drogas con propiedades
ansiolticas, hipnforas, miorrelajantes y anticonvulsivantes). Tpicamente su unin a
ligandos exgenos (tambin se han propuesto ligandos endgenos) aumenta la
frecuencia de apertura del canal de cloro producida por estimulacin GABA; BARB=
barbitricos (v.g. fenobarbital, tiopental sdico, pentobarbital). Prolongan la duracin de la
apertura del canal de cloro producida por estimulacin GABA; PICRO=picrotoxina.
Disminuye el ingreso de cloro a la clula, cumpliendo el efecto contrario a la estimulacin
GABA.
Teora de la Ocupacin: es la ms usada y la ms antigua. Fue postulada por Clark en

1920. Segn esta teora, la interaccin entre un F y su R es igual que cualquier otra
reaccin qumica que sigue la ley de accin de masas.Una de las primeras cosas a tener
en cuenta en relacin al tema del que nos ocupamos, es que los receptores (y por lo tanto
los conceptos asociados a dicho trmino) determinan en gran medida las relaciones

cuantitativas que ejercen las drogas. Esto queda ilustrado en el siguiente grfico,
denominado del tipo curva dosis-respuesta:
Como se puede apreciar en la curva de la izquierda, se ha graficado en las abscisas la

concentracin creciente de una droga, de izquierda a derecha, en tanto las ordenadas
sealan el efecto, tambin creciente de dicha droga hipottica. A medida que se
incrementa la dosis (C), tambin se va incrementando proporcionalmente la respuesta (E),
hasta que se llega a una meseta en donde a pesar de que se incremente la dosis la
respuesta no aumentar. El punto en el cual se alcanza el mximo de la respuesta para la
droga en cuestin se denomina E mximo (Emax). Por otra parte, la C en la que se alcanza
la mitad del Emax se denomina EC50. Sin embargo, lo dicho no nos dice nada acerca de
receptores. Sin embargo veamos la curva de la derecha, que repetimos abajo para mayor
comodidad:

La curva es, sin ninguna duda, muy similar a la que acabamos de mencionar, y sin
embargo est haciendo referencia a otro tema: la ordenada representa esta vez la
cantidad de receptores (B) que estn ocupados a cada concentracin dada (C) de una
droga determinada. La forma de una y otra curva nos hacen prestar atencin,
fundamentalmente, al hecho que a travs de su parecido podemos comenzar a sospechar
la existencia de una ntima relacin entre la concentracin de una droga, los receptores
que posee el organismo para esa droga, y el efecto que se obtendr de la utilizacin de la
misma, cosa que ampliaremos luego.
Esquema General del equilibrio aplicado al modelo de droga receptor.
Desde el punto de vista de la cintica qumica : si x es la concentracin molar del

frmaco y a su vez A es el nmero total de receptores por unidad de volumen (si bien esto
no suele ser conocido) y a su vez y es la concentracin de los receptores ocupados por
el frmaco. Podemos enunciar una ecuacin de cintica qumica como:
Velocidad de formacin Vf = k1 x (A - y)
Velocidad de disgregacin Vd = k2 (y)
En el estado estacionario Vf = Vd
k1 x (A - y) = k2 (y)
k1 x / k2 = (y) / (A - y)

Las ecuaciones se completan desde el equilibrio qumico, dado que muchos de los
factores de la ecuacin anterior no son conocidos ni pueden ser medidos (A, y ).
Considerando el equilibrio qumico :
Kf
F + R FR
Kd
Donde Kd = [F] [R] / [FR]
Recordemos que en cualquier momento la cantidad total de receptores van a ser la suma
de los receptores libres del sistema sumados a los que ya estn formando complejo droga
receptor. Asi pues:
R totales = [R libres] + [FR]
Seguramente no podemos conocer con exactitud la concentracin total de los receptores

pero si podemos tratar de simplificar estos trminos si utilizamos una serie de
experimentos donde graficamos los efectos biolgicos de acuerdo a las concentraciones
de droga. Recordemos que estos conceptos son similares a los que vimos inicialmente en
las curvas de efecto biolgico concentracin:
Efecto mximo
supone la totalidad
de los receptores
ocupados
Cualquier porcentaje
de efecto a lo largo
de la curva Por
ejemplo el 50% del
efecto
Definamos en forma terica el hecho de que el efecto es una funcin de la cantidad de

complejos FR existentes (aunque no conozcamos la funcin matemtica):
E= f (FR)

Si comparamos ambos efectos tendremos, dividiendo el efecto por el efecto mximo que :
E/ E max = f (FR) /f [R]+ [FR] Porque Emax = f R totales
Es decir que al efecto mximo la cantidad de receptores totales forman complejo FR y no

existen R libres R totales = [FR]mximo y [R libres] = 0
Cancelando la expresin de las funciones tendremos que se obtiene por comparacin:
E/ E max = [FR] / [R]+ [FR]
E/ E max = [F] [R] / Kd
[R]+ [FR]
Convirtiendo toda la expresin por la propiedad de las fracciones :
E/ E max = [F]
Kd / [R] x ( [R]+ [FR])

Siguiendo las operaciones , efectuando un producto distribuitivo en el denominador
E/ E max = [F]
(Kd + Kd . [FR] /[R] )

Y si recordamos de la ecuacin de equilibrio qumico [F] = Kd . [FR] /[R] . La ecuacin
se simplifica en trminos que podemos medir dado que se pueden medir los efectos [E] y
las concentraciones de frmaco [F] .
E/ E max = (
[F] / Kd + [F] )
Determinar la Kd es sencillo dado que si medimos y comparamos el E maximo con la

mitad del efecto E 50% nos es sencillo inferir que :

E/ E max = y Kd = [F] 50
Es decir que la KD ser la concentracin de frmaco que determine la mitad del efecto
biolgico. La unin de un F con su R no es distinta de la unin de una enzima con su
sustrato. La teora de la ocupacin ha sido bastante til porque permite explicar como
acta un F y tambin permite hacer representaciones grficas de la relacin dosis-efecto.
Si la relacin del efecto es la mitad del efecto mximo, resulta que: KD = (F) que produce
el 50% del efecto mximo. Si la relacin entre el efecto y el efecto mximo es . resulta
que: la KD es igual a la [F] que produce el 50% del efecto mximo, lo que se conoce
tambin como DOSIS ACTIVA 50.
Esta teora de la ocupacin parte de algunos supuestos:
Ej. : todos los Frmacos actan de la misma manera, es decir, todos los Frmacos son
capaces de producir el efecto mximo, sin embargo se descubri que haban agonistas
que a pesar de cantidades muy grandes nunca alcanzaban el efecto mximo, los cuales
fueron llamados agonistas parciales, son Frmacos que a pesar de que se aumente la
dosis van a llegar a un plateau que ser inferior a los agonistas que producen el efecto
mximo.
Tambin hay Frmacos que son muy potentes y que no requieren ocupar todos los Rs
para producir el efecto mximo, es decir, les basta ocupar una cierta fraccin de Rs para
producir el efecto mximo. Aqu se introdujo un concepto, que es el concepto de
receptores de reserva; aquellos Rs que no necesitan ser ocupados para alcanzar efectos
mximos. Supongamos que del 100% de los Rs, a un F le basta ocupar un 60% de ellos
para lograr el efecto mximo, de tal manera que el restante 40% constituiran los Rs de
reserva.

Alfred Joseph Clark y Robert Stephenson principales tericos de la Universidad de

Edimburgo en el estudio de fenmenos de receptores durante los aos 30 y50
Estos son dos inconvenientes que tiene la teora de la ocupacin, que no fueron
consideradas por Clark, llev a hacer modificaciones a esta teora, las cuales fueron
hechas por ARIENS Y STEPHENSON.
ARIENS postul que no basta que un F tenga afinidad por su R para producir el efecto,
(porque con la teora de la ocupacin lo principal de todo era la afinidad). Si slo bastara
la afinidad ningn F lograra el efecto mximo, en cambio, hay frmacos que no lo
producen, y lo que postul Ariens es que se necesita otra propiedad del F para producir el
efecto: en primer lugar se necesita afinidad y tambien se necesita una capacidad propia
del F para generar un efecto, el llam a esa capacidad ACTIVIDAD INTRINSECA (AI)
Entonces: E (efecto) = [FR] donde [FR] es la concentracin de F unido a su R.
E mx. = [RT] donde RT son los Rs totales.
Un F que produce el efecto mximo se conoce como agonista completo y se dice que su
es igual a 1.Si el agonista se une a un R y no produce ningn efecto decimos que
carece de actividad intrnseca, por lo tanto = 0, y ese F se comporta como un
antagonista porque es capaz de unirse al R pero impide que el agonista ejerza su accin.
Si 0 < < 1 el F, agonista, ser capaz de producir un efecto inferior al efecto mximo. La
actividad intrnseca es importante porque determina que la unin del F al R se traduzca en
un efecto.

STEPHENSON deca que la relacin entre el efecto y el efecto mximo es una funcin de
un estmulo (S), funcin que no necesariamente es lineal, el que es igual a una constante
llamada eficacia (e) por la fraccin unida al R
A
B
Potencia: equivale a la cantidad de F necesaria para producir determinado efecto. La

ms caracterstica es la estimada para lograr el 50% del efecto. En el grfico el F B es
menos potente que el F A. Desde el punto de vista prctico lo que importa es la eficacia.
En el grfico el F A tiene igual eficacia que el F B, ambos alcanzan el mismo efecto. Un F
ms potente es aquel en el que necesito menor dosis para alcanzar el efecto deseado (en
comparacin con otro F que logra el mismo efecto, pero a dosis mayores). La potencia se
relaciona con la afinidad del F por su R.
La eficacia es el equivalente de la actividad intrnseca. Est representando la capacidad

del F de producir un efecto. Para Ariens es una f(x) lineal y para Stephenson la respuesta
puede ser de cualquier tipo.

Representaciones grficas de la relacin dosis /efecto. Tomado de Farmacologa de

Flores
TEORA DE LOS ESTADOS CONFORMACIONALES
Plantea que los Rs farmacolgicos pueden estar en 2 estados de actividad; en forma

activa o en forma inactiva. Esto se plante fundamentalmente en relacin a los Rs que
estn unidos a canales inicos, de tal manera que la forma activa del R sera aquella que
produce apertura del canal y el R est inactivo cuando el canal est cerrado. Esto se
asocia a los estados productivos o improductivos de la protena G; el R est activo cuando
la protena G puede provocar la formacin de otros 2dos mensajeros.

Heiz Otto Schild Terico de las formas matemticas aplicadas a la teora ocupacional de
receptores
RA: receptor activo, RI: receptor inactivo, E: constante alostrica. Ambas formas
(RA y RI) se encuentran en equilibrio en ausencia de F. El F se puede unir a ambas
formas dando lugar a los complejos FRA con las consiguientes constantes de disociacin.
Puede ser que F tenga mayor afinidad por la forma activa del R, y ese F se va a presentar
como un agonista, y si su afinidad es tan grande que est desplazada la ecuacin
exclusivamente hacia el lado de los RA, tendr una eficacia = 1 y se comportar como un
agonista completo. Estos Frmacos son capaces de producir el efecto mximo.
Posibilidades de afinidad por la forma activa (RA):
- Hay Frmacos que pueden tener afinidad por 2 tipos de Rs

Puede ser que el F tenga afinidad tanto por la forma activa como por la forma
inactiva. Si la afinidad es mayor por la primera forma tendremos un efecto que
ser menor comparado con el del agonista completo. La actividad intrnseca ser
menor que 0, pero mayor que 1.
F que tiene igual afinidad por las 2 formas de Rs. Si la afinidad es igual no
habr efecto porque se mantiene el estado de equilibrio previo, por lo tanto esos
Frmacos carecen de eficacia y se comportan como antagonistas.
Frmacos que tienen mayor afinidad por la forma inactiva que por la activa.
Situacin poco frecuente. El efecto ser el opuesto al dado por el agonista, l
cerrar los canales inicos si el agonista los abre; a este F se le ha llamado
antagonista negativo o antagonista inverso.
Por lo tanto un ligando puede comportarse como:
agonista completo
agonista parcial
agonista inverso; se da en relacin a los canales inicos, por ej.: a nivel
de los Rs GABA. No es solamente un canal inico sino que hay sitio de unin de
GABA y tb. de otros ligandos: esteroides, barbitricos, etc. Hay Frmacos que
favorecen la apertura del canal (GABA, benzodiazepinas, etc.) pero hay sustancias
que ejercen el efecto adverso que al unirse al R se benzodiazepinas, en vez de
favorecer la apertura de canales producen un aumento del cierre de ellos.

MECANISMO DE RECEPTORES
La especificidad de las reacciones mediadas por un receptor, depende de la naturaleza

del transmisor, de receptor y del sistema de mensajeros asociado. Por ejemplo, la
acetilcolina puede interactuar con diferentes receptores muscarnicos para inhibir la
actividad de la adenil ciclasa, o activar la actividad de la fosfolipasa C o los canales de
potasio. La noradrenalina y la serotonina pueden actuar para estimular o inhibir la
actividad de la adenil ciclasa, estimular la actividad de la fosfolipasa C y estimular o inhibir
los canales de potasio o calcio.
PROTEINAS TRANSMEMBRANA
La actividad de los neurotransmisores es mediada por interaccin con los miembros de un

nmero limitado de familias de receptores. Estas familias incluyen los ligandos de canales
inicos de apertura, los receptores asociados a protena G, factor de crecimiento que
tienen actividad tirosina quinasa y los receptores esteroideos que son macromolculas
intracelulares que funcionan para transportar esteroides dentro del ncleo donde actan
para modular la actividad transcriptora.
Clases de receptores. Receptores de membrana y Receptores citoplasmticos

Los ligandos de canales inicos de apertura son receptores heteromricos que contienen
mltiples subunidades. El anlisis hidrofbico sugiere que cada uno incluye muchas
hlices transmembrana. El miembro prototpico de esta familia de receptores es el
receptor colinrgico nicotnico. Este receptor est compuesto por cinco subunidades, dos
cadenas y una cadena , y .
Caractersticas estructurales de los receptores colinrgicos. Tomado de "Basic

Neurochemistry" (GJ. Siegel)
El receptor b-adrenrgico, fue el primer miembro aislado, clonado y secuenciado de lo que

se conoce como la superfamilia de receptores asociados a la protena G. Los miembros
de esta familia, tienen secuencias y estructuras muy similares.

Diagrama esquemtico generalizado del receptor asociado a la protena G. Tomado de

"Southeastern Louisiana University
Los miembros de la familia de receptores asociados a la protena G, actan a travs de un

mecanismo que implica la intervencin del guanidn trifosfato. Al menos se han
identificado, por ahora, cuatro familias de protenas G.
Estructura y composicin de sistemas de traduccin por protena G. Tomado de "Sigma-

Aldrich, Inc
La modulacin de los niveles intracelulares de AMP cclico y los cambios en la hidrlisis

fosfoinositol son reacciones mediadas por una protena G asociada a receptores. La

estimulacin e inhibicin de la actividad de la adenil ciclasa implica reacciones semejantes

en las cules, el GTP se une a la subunidad a de Gs o Gi. El resultado final es un cambio
en la actividad de la adenil ciclasa y un cambio en los niveles intracelulares de AMP
cclico. El AMP cclico, sucesivamente se une a la subunidad reguladora de la protena
quinasa A, permitiendo que la fosforilacin mediada por la subunidad cataltica de quinasa
A, se produzca. La terminacin de la seal implica hidrlisis enzimtica de AMP cclico por
la fosfodiesterasa y la conversin de GTP en GDP por la actividad de la GTPasa en las
subunidades a de las protenas G. El complejo ternario compuesto por agonista, receptor
y protena G, representa un estado de alta afinidad del receptor.
En otros casos, se da la activacin mediada por el transmisor de la fosfolipasa C. Esto

produce la escisin del fosfatidil inositol bifosfato. Tanto el diacilglicerol (DAG) como el
inositol trifosfato (IP3) resultantes de esta reaccin, son activos biolgicamente. El
diacilglicerol, que contiene dos molculas de cido graso, se difunde en el plano de la
membrana y activa una enzima, protenquinasa C. El inositol trifosfato, por otro lado,
causa liberacin de Ca2+ desde los almacenes en el retculo endoplasmtico.
ESTUDIO DE RECEPTORES
En 1971, el primer ensayo de acoplamiento con radioligandos exitoso, hizo posible

estudiar los receptores colinrgicos nicotnicos en los rganos elctricos de peces y
anguilas. En 1973, se describi por primera vez la unin esteroespecfica de opiceos
radiomarcados en lugares de unin en cerebros de mamferos. En los diez aos
siguientes, los ensayos de unin de radioligandos cuantitativos fueron desarrollados para
receptores en variedad de sustancias y transmisores y ligandos radiomarcados con 3H o
125I estn ahora disponibles para el estudio de muchas clases de receptores. Esta amplia
disponibilidad de ligandos apropiados ha llevado a una expansin rpida en el uso de
ensayos de unin con radioligandos para caracterizar receptores y subtipos de
receptores.
Antes del empleo extendido de ensayos de acoplamiento in vitro, las propiedades de los
receptores, se inferan de la medida de respuesta biolgica. Este enfoque demostr ser
productivo en la clasificacin de receptores e incluso llev a la identificacin de subtipos
de receptores; sin embargo, medir una repuesta biolgica tanto in vivo como in situ puede
ser muy diferente que medir la unin del receptor in vitro. Por ejemplo, la distribucin en el

tejido de una sustancia administrada in vivo, puede variar dependiendo de su capacidad

para cruzar las barreras de difusin, as como la barrera hematoenceflica o en la
extensin en la cul la sustancia se une con las protenas plasmticas. La naturaleza
lipoflica o hidroflica de un componente puede determinar si tiene igual acceso o no a
todos los receptores a un tejido dado. Tambin, las sustancias pueden ser metabolizadas
antes de que tengan una oportunidad de interactuar con un receptor. Estas
transformaciones metablicas pueden producir componentes que son ms o menos
activos que la sustancia previa y as puede alterar marcadamente la especificidad
farmacolgica observada. Las sustancias no sujetas a alteraciones estructurales son a
menudo eliminadas del medio extracelular por mecanismos de recogida neuronal y
extraneuronal. Adems, in vivo, la reaccin de una sustancia es frecuentemente atenuada
por mecanismos compensatorios de retroalimentacin. La interpretacin de una reaccin
biolgica medida tambin puede ser difcil si la sustancia tiene mltiples lugares de
accin, un fenmeno que tambin puede suceder in vitro con tejido que contienen
mltiples clases de subtipos de receptores. A veces, los subtipos del receptor median la
misma reaccin fisiolgica y pueden ejercer estos efectos a travs del mismo sistema
efector. La reaccin farmacolgica observada puede ser afectada por el grado de
selectividad de la sustancia y por las densidades relativas de los subtipos que estn en el
tejido. En general, la caracterstica ms segura de los receptores viene de estudios
llevados a cabo con preparaciones simples de aislamiento de tejidos que muestran curvas
reproducibles graduadas dosis-respuesta. Incluso con estas preparaciones, es a menudo
imposible definir exactamente las caractersticas cinticas de las interacciones sustancia-
receptor.
Los radioligandos proporcionan pruebas precisas que permiten el examen especfico de la

interaccin inicial entre una sustancia y su lugar de acoplamiento. Por ejemplo, las
cinticas de asociacin y disociacin de un complejo receptor-radioligando, puede ser
determinado exactamente usando un simple tejido homogenizado. Un perfil farmacolgico
que est basado en la disociacin del equilibrio constante de unas series de ligandos no
marcados pueden ser definidos midiendo la inhibicin de la unin de un radioligando con
esos componentes no marcados. El uso de radioligandos tambin permite la
caracterizacin de receptores en ausencia de una reaccin biolgica medible. Esto puede
ser importante, por ejemplo, en el estudio de receptores del SNC, donde los efectos de
neurotransmisores son preparaciones de tejidos complejos y aislados son difciles de

obtener. El uso de ensayos de acoplamiento con radioligandos puede dar estimaciones

significativas del nmero o densidad de receptores en un tejido particular.
Consecuentemente, pueden observarse cambios en la densidad de los receptores
resultante de condiciones patolgicas o intervenciones farmacolgicas. Los ensayos de
acoplamiento pueden tambin emplearse para discriminar mltiples clases de receptores
en un nico tejido y para estimar sus proporciones relativas. Adems, los ensayos de
acoplamiento con radioligandos proporcionan la nica medida por la cul los receptores
pueden ser medidos durante la solubilizacin, purificacin y reconstitucin, pasos
necesarios para la comprensin completa de la funcin del receptor.
Estructura de membrana. Tomado de "Basic Neurochemistry" (GJ. Siegel)
Hay dos tipos bsicos de ensayos que emplean radioligandos. El primero, ensayos de
unin directos, miden la interaccin directa de un radioligando con un receptor. Los
ensayos de unin directa permiten la determinacin de propiedades cinticas y de
equilibrio y proporciona estimaciones de la densidad de receptores. Tambin se emplean
para elegir las condiciones apropiadas y los radioligandos para determinar las
propiedades farmacolgicas de los receptores. Los segundos, ensayos de unin indirecta,
miden la inhibicin del acoplamiento de un radioligando a un ligando no marcado para
deducir indirectamente la afinidad de los receptores por el ligando no marcado. Este
enfoque es particularmente til en la caracterizacin farmacolgica de receptores porque
los estudios pueden llevarse a cabo con componentes que podran no convenir a los

radioligandos, incluso porque son muy lipoflicos o porque la afinidad del receptor para
estos componentes es muy baja.
En la practica, el radioligando se une no slo al receptor, sino tambin a otros

componentes del sistema de ensayo, incluyendo las paredes de los tubos de ensayo, el
filtro, y constituyentes del tejido. Aunque la naturaleza exacta de esta unin no especfica
es generalmente desconocida, a menudo se da instantneamente. La unin no especfica
es generalmente no saturable y proporcional a la concentracin del radioligando. La mala
identificacin de este componente no especfico es una fuente de error comn en el
anlisis de datos de la unin del radioligando, que produce una sobreestimacin de la
densidad de receptores y lleva, en algunos casos, a la conclusin incorrecta de que
mltiples clases de receptores coexistan en un tejido dado. La unin no especfica puede
ser cuantificada aadiendo altas concentraciones de un ligando competitivo no marcado
que sea especfico para el receptor de inters. La cantidad de radioligando que queda
unido en presencia del ligando no marcado, se define como acoplamiento no especfico.
En un experimento de saturacin, el componente no especfico de unin en cada
concentracin de radioligando se resta de la cantidad total de radioligando unido que
produce la cantidad de radioligando especficamente adherida al receptor.
Las interacciones de ligandos no marcados con un receptor, pueden caracterizarse

estudiando su capacidad de inhibir la unin de un radioligando. Ya que los ligandos no
marcados son mucho ms numerosos que los radioligandos, son esenciales los ensayos
de unin indirecta para caracterizar una poblacin de receptores completamente.
Tradicionalmente, los receptores han sido clasificados en trminos del orden de potencia
de varios componentes que o causan o antagonizan una respuesta funcional. Los
ensayos de unin indirecta, hacen posible definir la especificidad farmacolgica de un
receptor basado en las conductas de disociacin para variedad de componentes
determinados desde la inhibicin de la unin de un radioligando. Otro uso importante de
los ensayos de unin indirecta es definir el nivel de acoplamiento no especfica. Una
definicin exacta de acoplamiento no especfico se requiere para el anlisis de datos de
unin tanto directos como indirectos y debera establecerse antes de determinar las
propiedades cinticas y de equilibrio del radioligando.
PROTENAS G

Existen mltiples formas de las protenas G en el sistema nervioso, cada protena G es un

heterodmero compuesto de subunidades , y simples. La actividad funcional de las
protenas G implica su disociacin y reasociacin en respuesta a seales extracelulares.
Las protenas G unen directamente algunos receptores neurotransmisores con canales
inicos y regulan niveles intracelulares de segundos mensajeros.
A finales de los 50 cuando Sutherland y sus colegas demostraron que la adrenalina

induce glucogenolisis en el hgado estimulando la sntesis de un segundo mensajero,
adenosn 3, 5-monofosfato cclico (AMP o AMPc). Desde aquella poca, el AMPc y otras
pequeas molculas (ej. GMPc, NO y los metabolitos y fosfatidilinositol y del cido
araquidnico). Estos mensajeros median muchas de las acciones de hormonas y
neurotransmisores sobre diversos aspectos del funcionamiento neuronal. En la actualidad
la atencin se ha centrado tambin en una clase de protenas unidas al nucletido
guanina, llamadas protenas G como los factores que tpicamente se acoplan a los
receptores de membrana para la generacin de segundos mensajeros intracelulares.
Con la excepcin de la transmisin sinptica mediada va receptores que forma canales

inicos, la familia de protenas G parece estar implicada en todas las seales de
transmembrana en el sistema nervioso. Las protenas G, identificadas y caracterizadas
por Rodbell, Gilman y otros, son llamadas as a causa de la capacidad para unir los
nucletidos de guanina, guanosina trifosfato (GTP) y difosfato guanosina (GDP), tambin
poseen una actividad GTPasa intrnseca. Muchos tipos de protenas efectoras estn
influidas por las protenas G; estas incluyen en canales inicos, adenil ciclasa, fosfolipasa
C (que cataliza la hidrlisis de fosfatidilinositol), fosfolipasa A2 (que catalizas la hidrlisis
del cido araquidnico), y fosfodiesterasa (PDE) (en segmentos exteriores de
bastoncillos).
Fueron identificadas tres formas de protena G en estudios tempranos. Gt, denominada

transducina, fue identificada como la protena G que se une a la rodopsina para la
regulacin del funcionamiento de clulas fotorreceptoras, y Gs y Gi fueron identificados
como las protenas G que se unen a los receptores de membrana para la estimulacin e
inhibicin, respectivamente, de la adenil ciclasa, la enzima que cataliza la sntesis de
AMPc.

Adems de Gt, Gs y Gi, los otros tipos principales de protena G en el cerebro son
designados Go, Golf, Ggust, Gz, Gq y G11-16.
Los diferentes tipos de protenas G contienen distintas subunidades , que son

responsables por su actividad funcional especfica. Los tipos de subunidades de
protenas G que se saben que existen estn listados en siguiente tabla.
alfa-subunidades de protena G heterotrimricas en el cerebro. (Tomado de Basic

Neurochemistry, Siegel, G (Ed))
La actividad funcional de las protenas G implica su disociacin y reasociacin en

respuesta a seales extracelulares. En estado de reposo, las protenas G funcionan como
heterodmeros que estn unidos a GDP y no estn asociados con receptores
extracelulares o con protenas efectoras intracelulares. Cuando un ligando se une a (y
activa) un receptor, da lugar a un cambio conformacional en el receptor, lo que provoca
que se asocie a la subunidad de la protena G al receptor, esto altera la conformacin
de la subunidad y conduce al desplazamiento del GDP por el GTP unido a la subunidad
, a la separacin de las subunidades desde la protena G, y a la liberacin de la unin

receptor-protena G. Este proceso genera una subunidad unida a GTP, que es

biolgicamente activa y que puede regular la actividad funcional de las protenas efectoras
dentro de la clula. El sistema vuelve a su estado de reposo cuando el ligando es liberado
desde el receptor y la actividad de la Gtpasa que hidroliza al GTP que estaba unido a la
subunidad a en GDP. La accin posterior conduce a la reasociacin de las subunidades
libres con las subunidades compuestas para restaurar el heterodmero original, que es
la protena G.
Se ha dicho que las protenas G provocan la fosforilacin por medio de protenas

quinasas dependientes de AMPc y calcio-dependientes y por medio de protenas
quinasas tirosina.
Las protenas G controlan los niveles de AMPc intracelular mediando la capacidad de los
neurotransmisores para activar o inhibir la adenil ciclasa (siguiente tabla).
Ejemplos de la regulacin de neurotransmisores por medio de la adenil ciclasa. (Tomado

de Basic Neurochemistry, Siegel, G (Ed))
Las protenas G asocian algunos receptores de neurotransmisores directamente a los

canales inicos. En la mayora de los casos, la subunidad liberada desde la interaccin
receptor-protena G directamente abre o cierra un canal inico especfico. Uno de los

ejemplos mejor establecidos de este tipo de mecanismos en el cerebro es la asociacin

de receptores opiceos, 2-adrenrgicos, D2 dopaminrgicos, muscarnicos colinrgicos,
serotoninrgicos 5-HT1A y GABAB. Algunos de estos mismos receptores de
neurotransmisores se han demostrado que se asocian de la misma manera a canales
Ca2+ dependientes del voltaje va los mismos tipos de protenas G, aunque los canales
son inhibidos por esta interaccin.
El mecanismo por medio del cual los neurotransmisores estimulan la adenil ciclasa est
bien establecido. La activacin de estos receptores de neurotransmisores que se asocian
a Gs resulta en la generacin de subunidades Gas que se unen a activan directamente
la adenil ciclasa.
La capacidad de los receptores de neurotransmisores para estimular la va de segundo

mensajero fosfatidilinositol est mediada por la activacin de la fosfolipasa C, que cataliza
la hidrlisis del fosfatidilinositol en los segundos mensajeros inositol trifosfato y
diaciglicerol. Ahora parece que la activacin inducida por los neurotransmisores de la
fosfolipasa C est mediada va protenas G. En la mayora de los casos, Gq est
implicada, y se piensa que Gaq se une a directamente activa ciertas formas de
fosfolipasa C. El mecanismo por el que las protenas G median la regulacin
neurotransmisora del metabolismo del cido araquidnico, va la activacin o inhibicin de
la fosfolipasa A2, est menos comprendida, pero puede tambin implicar a los subtipos Gi
y Go.
Un rasgo que unifica a las diferentes clases de protenas G es que la unin a GTP
incrementa la afinidad de las protenas por algunas molculas objetivos, mientras que la
unin de GDP reduce esta afinidad.
Una clase principal de protena G, denominada protenas G pequeas, es la familia ras,

que fueron inicialmente identificadas como los productos de oncogenes de virus de
sarcoma de rata. Homlogos celulares normales de oncogenes son a menudo referidos
como proto-oncogenes.
ADENILCICLASA

La regulacin de la formacin de AMPc por medio de los receptores de neurotransmisor

as como las vas de mensajero intracelular est determinada por la actividad de la
enzima adenilciclasa (tambin denominada adenilatociclasa). La adenilciclasa puede
tambin ser activada por la fosfocolina. El sustrato para la adenilciclasa es un compuesto
de Mg2+ y ATP.
TIPOS DE ADENILCICLASA
Hasta la fecha, cuatro formas distintas de la enzima han sido definitivamente

identificadas; estas se denominan como tipos I a IV. El tipo I de adenilciclasa se
encuentra fundamentalmente en el cerebro. El tipo II es producido a los niveles ms
altos en el cerebro pero se encuentra tambin a niveles ms bajos en los pulmones
y en el tejido olfatorio. El tipo III est en grandes cantidades en el epitelio olfatorio.
El tipo IV parece estar ampliamente distribuido y est presente a niveles altos en el
cerebro.
Las protenas de adenilciclasa contienen dos grandes regiones hidrofbicas, cada una de
las cuatro tiene seis dominios de unin de membrana putativos. Hay dos grandes
dominios citoplasmticos, uno entre las dos regiones hidrofbicas y otro en el trmino
carboxi de la protena. Los dominios citoplasmticos son las porciones ms altamente
conservadas de las cuatro protenas diferentes de la adenil ciclasa, y son similares unas a
otras dentro de una molcula enzimtica dada. Adems, hay alguna homologa entre
estos dominios y los dominios catalticos de ciertas guanilil ciclasas (el enzima que
cataliza la sntesis de GMPc). Se piensa que estos dominios contienen lugares de unin
de los nucletidos, y ambos parecen ser necesarios para la actividad cataltica; no hay
actividad enzimtica cuando slo uno de los dominios es producido, pero la actividad se
repone cuando las dos mitades de la molcula son coproducidas. Las adenil ciclasa son
glicosiladas y contienen varios lugares potenciales para la fosforilacin.
Los enzimas del tipo I al IV se diferencian en su capacidad para ser regulados por Ca2+ y
por la calmodulina. Los tipos I y III son estimulados por complejos Ca2+/calmodulina,
mientras que los tipos II y IV son insensibles.
Aunque cada uno de los tipos I a IV de adenil ciclasa es activado por Gas activados (i.e.
Gas unido a GTP), estos difieren en su regulacin por medio de los compuestos de

subunidades-. En presencia de Gas, la adicin de compuestos inhibe el tipo I, esto no

afecta al tipo III, y estimula a los tipos II y IV de adenil ciclasas.
Esquema de la actividad de la adenil ciclasa y de la fosfolipasa C. Tomado de "Basic

Neurochemistry" (GJ. Siegel)
En las clulas que contienen el tipo I de adenil ciclasa, la formacin de AMPc es

estimulada por medio de seales extracelulares que aumentan la entrada de Ca2+ en las
clulas, as como por medio de aquellas seales que activan los receptores asociados a
Gs. Las clulas que producen el tipo I de adenil ciclasa pueden tener inherentes altos
niveles de formacin de AMPc debido a la estimulacin basal de Ca2+/calmodulina. De
hecho, los altos niveles de actividad enzimtica de adenil ciclasa en cerebro relacionado
con otros tejidos puede ser explicado de este modo. Este alto nivel de actividad
enzimtica podra tambin subyacer el requerimiento para mecanismos adicionales por
los que este tipo de adenil ciclasa es inhibido: la formacin de AMPc puede ser inhibida
en estas clulas no slo por medio de seales que activan los receptores acoplados a Gi,
sino tambin por medio de seales adicionales que activan los receptores acoplados a

otras protenas G (ej., Go y Gq) conduciendo a la liberacin de subunidades-. Esto

podra proporcionar un mecanismo para mantener en jaque la alta capacidad sinttica del
AMPc en el cerebro, as como proporcionar mltiples mecanismos para la regulacin de la
formacin de AMPc por medio de varias seales extracelulares.
Una situacin muy distinta puede aparecer en clulas que producen la adenilciclasa tipo
II. En estas clulas, la actividad enzimtica no es estimulada por Ca2+/calmodulina, pero
es incrementada por medio de seales que activan los receptores asociados a Gs, as
como por medio de seales adicionales que activan los receptores asociados a otras
protenas G a travs de la generacin de compuestos de subunidades- libres. Esto
proporciona un mecanismo por el que la formacin de AMPc es regulada de manera
integrada por mltiples estmulos extracelulares.
GUANIDILCICLASA
La guanilciclasa (tambin conocida como guanilato ciclasa) cataliza la sntesis de GMPc

desde GTP en una reaccin anloga a la de la adenil ciclasa.
Las formas unidas a la membrana de guanil ciclasa son receptores de membrana

plasmtica. Estas protenas de transmembrana poseen dominio de superficie de clula
que funciona como receptor de neuropptidos que contienen actividad cataltica de guanil
ciclasa. La unin de un ligando a, y la consiguiente activacin de, el dominio de receptor
conduce a la activacin del dominio cataltico.
Las formas solubles de guanil ciclasa estn asociadas con el xido ntrico. Estas enzimas
son homlogas a los dominios catalticos de las formas de unin de membranas de la
guanil ciclasa.
Se piensa que NO activa estas enzimas va interacciones con sus grupos prostticos
hemo. Es a travs de la generacin de NO que numerosos neurotransmisores, incluyendo
el glutamato, acetilcolina, sustancia P, histamina y bradiquinina, se piensa que activan la
guanil ciclasa e incrementan los niveles celulares de GMPc en cerebro y otros lugares.

Esquema de la actividad de guanidil ciclasa. Tomado de "Basic Neurochemistry" (GJ.

Siegel)
La sntesis de NO es catalizada por medio de una enzima denominada NO sintasa. Esta

enzima convierte la arginina en NO libre y citrulina en una reaccin que requiere un
cofactor tetrahidrobiopterina y la forma reducida del dinucletido nicotinamida-adenin
fosfato (NADPH). Slo ciertos tipos de neuronas contienen NO sintasa, aquellas para las
que la enzima muestra una alta especificidad de localizacin en el cerebro. La NO sintasa
es una enzima sensible a Ca2+/Calmodulina; la unin de compuestos Ca2+/Calmodulina a
la enzima resulta en la activacin de la actividad cataltica. Por tanto, se podra esperar
que los neurotransmisores que incrementan los niveles de Ca2+ celular estimularan la
actividad de la guanil ciclasa en aquellas neuronas que contienen la NO sintasa.
PAPELES FUNCIONALES PARA EL AMPC Y EL GMPC
Se ha demostrado que el AMPc sirve como un segundo mensajero intracelular para

numerosas seales extracelulares en el sistema nervioso.

Primero, el AMPc media aspectos a corto plazo de la transmisin sinptica: algunas

acciones rpidas de ciertos neurotransmisores sobre los canales inicos que no implica la
activacin de canales de entrada al ligando son mediados a travs del AMPc. Segundo, el
AMPc, junto con otros mensajeros intracelulares, juega un papel central en la mediacin
de varios aspectos de la transmisin sinptica: numerosos efectos de los
neurotransmisores sobre la neurona objetivo que funcionan, tanto a corto como a largo
plazo, son conseguidos por medio de mensajeros intracelulares. Esto incluye la regulacin
del estado metablico general de neuronas diana, as como efectos moduladores sobre la
sntesis, almacenamiento y liberacin del neurotransmisor; la sensibilidad del receptor del
neurotransmisor; la organizacin y estructura citoesqueltica y el crecimiento y
diferenciacin neuronal. Esto tambin incluye aquellas acciones a largo plazo de
neurotransmisoress que estn mediadas por alteraciones en la expresin gentica.
Es importante enfatizar que el papel para el AMPc y otros mensajeros intracelulares no

est limitado a acciones de neurotransmisores mediadas por medio de receptores unidos
a la protena G.
La mayora de los efectos del AMPc sobre el funcionamiento celular estn mediados a
travs de la fosforilacin proteica. Hasta ahora los mecanismos ms importantes por
medio de los que el AMPc ejerce sus innumerables efectos fisiolgicos es a travs de la
activacin de la protena quinasa dependiente del AMPc. Krebs y sus colaboradores
fueron los primeros en demostrarlo para la regulacin del AMPc de la glucogenolisis, y
poco despus Greengard y sus colegas demostraron que era un mecanismo general. De
hecho, ahora se sabe que la protena quinasa dependiente del AMPc fosforila
virtualmente a todos los tipos de protenas neurales; esto responde a la capacidad del
AMPc para influir en muchos aspectos diferentes del funcionamiento neuronal.
Cmo originan una amplia variedad de neurotransmisores y hormonas respuestas

biolgicas especficas a la clula y a los tejidos, si muchas de tales respuestas estn
mediadas por los mismos mensajeros intracelulares?. La especificidad es conseguida a
varios niveles: a nivel de receptores especficos de tejidos para el neurotransmisor o
hormona, a nivel de subtipos diferentes de protena de unin de GTP, y a nivel de
protenas de sustrato especficas de tejido para protenas quinasas. Slo los tejidos que
producen receptores especficos respondern a un neurotransmisor o a una hormona
dada. Adems, puesto que todas las clulas contienen subunidades catalticas similares

para protenas quinasas dependientes del AMPc, la naturaleza de protenas fosforiladas

en un tejido dado depende de los tipos y cantidades de protenas producidas en este
tejido y sobre su accesibilidad a la protena quinasa
FOSFODIESTERASAS
Dado en papel de los nucletidos cclicos en vas de transduccin de seal, no sorprende

que el metabolismo, as como la sntesis, de estos segundos mensajeros est altamente
regulado. Tal metabolismo es conseguido por medio de un gran nmero de enzimas, las
fosfodiesterasas (PDEs), que catalizan la conversin de AMPc y GMPc en 5-AMP y 5-
GMP va la hidrlisis de los enlaces 3-fosfoester.
TIPOS DE FOSFODIESTERASAS EN EL CEREBRO
Se han descrito las cinco principales familias de PDE, sobre la base de dos criterios: (1)
los mecanismos para la regulacin de la actividad enzimtica, y (2) las propiedades
kinticas de los enzimas para hidrolizar los nucletidos cclicos.
La familia I de PDE es estimulada por Ca2+/calmodulina. Estudios inmunocitoqumicos han

revelado que altos niveles de estas enzimas estn localizados en densidades sinpticas,
en los campos dendrticos de clulas cerebelares de Purkinje y en clulas cerebrales
corticales piramidales.
La actividad de los isozimas I de PDE puede estar regulados bajo condiciones fisiolgicas
por medio de seales extracelulares que influyen en los niveles de Ca2+ intracelulares.
Dos familias de PDE estn regulada por GMPc, una que es estimulada (PDE II) y otra que
inhibida (PDE III). La PDE II puede ser activada de 10 a 50 veces ms por
concentraciones de GMPc que se encuentran en las clulas. Sin embargo, la estimulacin
es transitoria ya que el GMPc es tambin un sustrato para la enzima y entonces es
rpidamente metabolizado. Los resultados de estudios inmunohistoqumicos demuestran
que PDE II es encontrado por todo el cerebro. Por el contrario, actualmente no hay
evidencia para la presencia de PDE III inhibida por GMPc en el cerebro.

PDE IV, que es tambin conocida como la PDE de bajo Km especfica del AMPc, se
encuentra en muchos tejidos y es producida abundantemente en el sistema nervioso
central.
La familia PDE V es tambin referida como PDEs especficos del GMPc. Tambin
muestran una selectividad 50 veces mayor para GMPc en relacin con el AMPc. La
activacin del fotoreceptor PDE en segmentos externos de conos y bastones es mediado
por la transducina, una protena G especfica para la retina.
Algunos inhibidores de PDE con posible utilidad clnica son inhibidores de PDE III o IV.
Basado en la localizacin de PDE III en el cerebro y tejido vascular y el efecto del AMPc
en la contraccin del msculo y la relajacin de estos tejidos, se ha desarrollado un gran
nmero de inhibidores de PDE III para la posible aplicacin clnica del tratamiento de
enfermedades cardiovasculares.
EJEMPLO DE DROGAS CON ACCIN A TRAVES DE INHIBICIN DE LA

FOSFODIESTERASA MECANISMO DE ACCION DEL SILDENAFIL
Por efecto de la excitacin sexual se libera, de unas neuronas (NANC) de los cuerpos
cavernosos y de las clulas del interior de las arterias (clulas endoteliales) xido ntrico
(NO) importante mediador de efecto vasodilatador . Este promueve una serie de cambios
que resultan (mediados por la guanosimonofosfato cclica -GMPc-) en una relajacin del
msculo liso cavernoso, que permiten la vasodilatacin de las arterias del pene y en la
subsiguiente ereccin. Luego de un periodo de tiempo el GMPc es degradada por la
fosfodiesterasa tipo 5 (PDE V), responsable de la prdida de la ereccin. El sildenafil es
un potente inhibidor, altamente selectivo, de la PDE 5, lo que se opone a la degradacin
de la GMPc, impidiendo as la detumescencia peneana. Dado que es necesaria una
estimulacin sexual para iniciar la liberacin local de NO, el efecto inhibidor del sildenafil
sobre la PDEV no tiene lugar en ausencia de esta. La PDEV se encuentra en el msculo
liso de los cuerpos cavernosos, en el msculo liso vascular y visceral, en el msculo
esqueltico, las plaquetas, los riones, pulmones, cerebelo y pncreas. La droga es unas
10.000 veces ms potente sobre la PDEV que sobre otras fosfodiesterasas como la PDE
III que se encuentra sobre todo en el corazn y los vasos sanguneos.

sildenafil
RECEPTORES NUCLEARES
Los receptores a nivel nuclear son un fenmeno importante en la transmisin de estmulos

a nivel celular. Muchas hormonas poseen este tipo de mecanismo de accin ,
generalmente ms lento que el de segundo mensajero, no obstante importante en la
regulacin a largo plazo de la homeostasis celular.
Hormonas tiroideas: T3 unida a protenas est en equilibrio con una fraccin en estado
libre que es 2-3 veces mayor que la del plasma. Pero es en el ncleo donde la T3 se
concentra en forma eficiente, siendo la concentracin de T3 libre nuclear 50-250 veces
mayor que en el citosol. Los ncleos de las clulas sensibles a T3 poseen protenas que
tienen gran afinidad por T3 y que actan como receptores. La actividad transcripcional de
estas protenas se modula por la unin del ligando. En ausencia del ligando, poseen una
fuerte actividad represora de la actividad gnica. La unin de la hormona tiene dos
efectos: anular la represin y, dependiendo de la dosis de hormona y del gen diana,

aumentar la transcripcin de ste. Estas protenas tienen gran semejanza con los
receptores nucleares para otras hormonas como los esteroides y el cido retinoico, por lo
que se incluyen dentro de una misma familia.
La informacin codificada en el DNA es organizada, replicada y leda por un variedad de

protenas que se unen al DNA. Algunas protenas, particularmente las que estn
involucradas en el empaquetamiento (por ejemplo las histonas) o en procesos de
replicacin (como las DNA polimerasas), tienen poca o no tienen especificidad hacia una
determinada secuencia de DNA mientras que otras protenas como los represores,
activadores transcripcionales y las endonucleasas de restriccin tienen una especificidad
extremadamente alta para secuencias de DNA y son capaces de encontrar una pequea
secuencia de 10 a 20 pares de bases en un fondo de 106 a 109 pares de bases. Las
bases moleculares del reconocimiento de un sitio especfico de unin requiere de una
caracterizacin de las conformaciones tridimensionales de las protenas, del
complejoprotena-DNA, de la secuencia del sitio de unin en el DNA, y de los cambios
estructurales que suceden como consecuencia de la interaccin. Es as que la descripcin
de especificidad en el reconocimiento de una secuencia de DNA por partede una protena
se realiza en base a observaciones y comparaciones entre los eventos que suceden en
los dos tipos de reconocimientos . Estos tipos de proteinas que activan receptores
presentan cuatro tipos principales de modelo de estructura proteicas, de las cuales las
ms importante es la denominada dedos de zinc :
DEDOS DE ZINC (Zinc fingers). Son las formas mas comunes de receptores asociados a
hormonas y a sus drogas derivadas ( drogas glucocorticoides, drogas de accin tiroideas,
estrgenos y progesterona). Los dedos de Zinc son estructuras de unin a DNA que
requieren de Zinc para su actividad de unin, y fueron llamados as porque su estructura
primaria poda ser dibujada en papel con un tomo de Zinc uniendo residuos de cistenas
e histidinas distantes con una secuencia intermedia descrita como una asa (loop) . Las
protenas de ste tipo usualmente estn organizadas en series de 9 dominios repetidos
que contienen 30 aminocidos plegados en una unidad estructural simple alrededor de un
tomo de Zinc al que se unen las cistenas e histidinas en nmero variable, y que da lugar
a las familias descritas hasta el momento: la familia cys-cys-his-his (2 cistenas y 2
histidinas), la familia cys-cys-cys-cys (4 cistenas), y la familia cys-cys-his-cys (2 cistenas

y 1 histidina). La estructura dedos de Zinc fu descubierta con los estudios de expresin

del gene RNA ribosomal 5S de Xenopus laevis
Atomo de Zn coordina Simetra en dmero

zonas de unin al DNA
Estructura del tipo dedos de zinc. El esquema pertenece a un motivo de la familia cys-
cys-hishis, en donde se puede observar a 2 cistenas (C) y dos histidinas (H) unidas al
ncleo central conformado por una molcula de zinc (Z). La proyeccin resultante de sta
interaccin (comprendida entre las dos flechas) es la que se une directamente con la
estructura de DNA.
. La transcripcin del gene 5S es regulado por un promotor interno al cual se une una
protena reguladora rica en cistena llamada factor de transcripcin IIIA (TFIIIA), que en
colaboracin con por lo menos otras dos protenas (TFIIIB y TFIIIC) se unen en un
complejo estable sobre el gene 5S y el cual entonces es el sitio blanco de la RNA
polimerasa III para que se lleve a cabo la transcripcin. La protena reguladora TFIIIA es
el prototipo de la ms grande superfamilia de factores de transcripcin en eucariotas.
Alteraciones estructurales de estas protenas reguladoras ocasionadas por ciertos iones
aumentan la carcinognesis y otros procesos malignos. Tcnicas de cristalografa
demuestran que los dedos de Zinc se unen a la hendidura mayor del DNA de la forma B y
cubriendo parte de la doble hlice , aunque estudios recientes demuestran que los dedos
de zinc se unen a sitios del DNA que tienen una conformacin intermedia entre la forma A
y B del DNA . Las Protenas reguladoras de levaduras, mosca de la fruta y de humanos
exhiben residuos de cistenas e histidinas organizados en forma muy similar a la
observada en TFIIIA (cis2his2) . Otros factores de transcripcin que presentan
conformacin de dedos de Zinc son la protena GATA-1 expresada en clulas eritroides y

juega un papel fundamental para el desarrollo eritroide normal y la protena MAZ que
juega un papel muy importante en el control de la expresin gentica de la glicoprotena
de superficie celular CD4.
EJEMPLO DE DROGAS CON ACCIN A TRAVES DE RECEPTORES NUCLEARES

MECANISMO DE ACCION DE LAS GLITAZONAS
Las glitazonas, son una nueva familia de drogas de accin hipoglucemiante derivadas de
la estructura tiazolidnodinica y ejercen su efecto sin estimular la secrecin de insulina
de las clulas pancreticas y necesitan de la presencia de insulina para ejercer su efecto.
Estos frmacos disminuyen marcadamente los niveles de glucosa, insulina y triglicridos
en una amplia gama de modelos animales diabticos Por el contrario, no tienen actividad
hipoglicemiante en animales euglucmicos, lo que diferencia claramento estos agentes de
otros antidiabticos orales y de la insulina que tiene un potente efecto hipoglucemiante.
pioglitazona
troglitazona
Por regla general, la mejora en la sensibilidad a la insulina requiere varios das de

tratamiento, lo que sugiere un efecto transcripcional en alguna parte. Pronto se observ
que este efecto tena preferentemente lugar en el tejido graso y muscular.

Aunque no se conocen todas los mecanismos que tienen lugar seguidamente, se han
postulado varias vas metablicas en las que se han estudiado las tiazolidindionas.
Algunos de los efectos observados son mediados por la unin a los receptores activados
por la proliferacin de los peroxisomas: estos receptores, conocidos como PPAR
(Peroxisome Proliferation Activated Receptor) pertenecen a una superfamilia de factores
de transcripcin de hormonas esterodicas y tiroideas. Se conocen hasta el momento tres
receptores PPAR, denominados , y , los tres con una considerable homologa en las
secuencias responsables de la fijacin al DNA y a sus ligandos. El PPARa es un receptor
para los fibratos (frmacos hipolipemiantes a los que pertenece, entre otros, el clofibrato)
mientras que el PPARa y el PPARd son receptores para tiazolidinoodionas. En particular,
se ha demostrado que la rosiglitazona posee una alta especificidad y afinidad hacia el
PPARg. Se sabe que el PPARg existe formando un heterodmero con otro receptor
nuclear el RXR (Receptor X Retinoico). Una protena adicional represora mantiene el
receptor en estado inactivo. La unin de una glitazona al receptor PPARg ocasiona un
cambio conformacional que inactiva o desplaza al represor. El receptor activado puede
entonces interaccionar con una secuencia determinada de un gen que pone en marcha la
expresin de una protena inductora de la lipogenesis. En este sentido, el PPARg activado
por una glitazona actua igual que lo hace directamente la insulina que activa la expresin
del inductor de la lipogenesis al fijarse a una secuencia especfica del DNA. Adems de
mejorar el aprovechamiento de la glucosa, las glitazonas facilita la inhibicin de la salida
de glucosa heptica, probablemente debido a un efecto inhibidor sobre la
gluconeognesis o un efecto inductor de la glicolisis
BIBLIOGRAFA
Introduccin a Qumica Farmacutica . C. Avendao. Interamericana Mac Graw

Hill 1993
Farmacoqumica . J.Lores Arnaiz. H.Torriani . S. Lamdam EUDEBA.
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Editor / Edition : Siegel, George J., MD|Agranoff, Bernard W., MD|Albers, R.
Wayne, PhD|Fisher, Stephen K., PhD|Uhler, Michael D., PhD Edition : 6th ed
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Ctedra de Qumica Medicinal

Fac Cs. Exts. Qcas.y Nat-UnaM

Paul Ehrlich y Sachahiro Hata a inicios del siglo XX

Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 1

clulas y no el resto del tejido, descubriendo el principio de la SELECTIVIDAD; una

1 Frmacos estructuralmente inespecficos:

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Ej.: anestsicos generales, alcohol, antispticos (cresol).

2 Frmacos estructuralmente especficos: grupo ms importante de Frmacos.

RECEPTORES: son molculas de naturaleza proteica, generalmente asociadas a

Hay dos etapas que median la interaccin F-R:

Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 3

a. Modificacin a la permeabilidad inica: un tipo de respuesta al acoplamiento F-

Tabla : Neurotransmisores conocidos y supuestos.

Un enfoque para distinguir clases de receptores es identificar molculas implicadas en la

Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 4

GABA y glicina. Los neurotransmisores asociados a cambios en segundos mensajeros

Categoras de transmisin sinptica.

REPRESENTACIN GRFICA DE RECEPTORES

La teora eneunciada anteriormente establece que los receptores ocupan un espacio

Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 5

Topolgica: su nfasis est dirigido a mostrar, aunque esquemticamente, cul

Receptor de epinefrina: se puede ver su estructura de siete dominios transmembrana

Esquemtica de la transduccin de seales a partir del receptor: seala,

Esquemtica de los sitios de accin presentes en un receptor: tiene por

Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 6

funcin y no su estructura topolgica. Como ejemplo vemos el receptor GABA,

Receptor de Gaba/canal de cloro. Tomado de "Basic Neurochemistry" (GJ. Siegel)

Teora de la Ocupacin: es la ms usada y la ms antigua. Fue postulada por Clark en

Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 7

Como se puede apreciar en la curva de la izquierda, se ha graficado en las abscisas la

Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 8

Esquema General del equilibrio aplicado al modelo de droga receptor.

Desde el punto de vista de la cintica qumica : si x es la concentracin molar del

Velocidad de disgregacin Vd = k2 (y)

Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 9

Donde Kd = [F] [R] / [FR]

R totales = [R libres] + [FR]

Seguramente no podemos conocer con exactitud la concentracin total de los receptores

Definamos en forma terica el hecho de que el efecto es una funcin de la cantidad de

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E/ E max = f (FR) /f [R]+ [FR] Porque Emax = f R totales

Es decir que al efecto mximo la cantidad de receptores totales forman complejo FR y no

Cancelando la expresin de las funciones tendremos que se obtiene por comparacin:

E/ E max = [FR] / [R]+ [FR]

E/ E max = [F] [R] / Kd

Convirtiendo toda la expresin por la propiedad de las fracciones :

Kd / [R] x ( [R]+ [FR])

(Kd + Kd . [FR] /[R] )

Determinar la Kd es sencillo dado que si medimos y comparamos el E maximo con la

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Esta teora de la ocupacin parte de algunos supuestos:

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Alfred Joseph Clark y Robert Stephenson principales tericos de la Universidad de

Entonces: E (efecto) = [FR] donde [FR] es la concentracin de F unido a su R.

E mx. = [RT] donde RT son los Rs totales.

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Potencia: equivale a la cantidad de F necesaria para producir determinado efecto. La

La eficacia es el equivalente de la actividad intrnseca. Est representando la capacidad

Qumica Medicinal ao 2006 -Dr Juan C. Falkowski 14

Representaciones grficas de la relacin dosis /efecto. Tomado de Farmacologa de

TEORA DE LOS ESTADOS CONFORMACIONALES

Plantea que los Rs farmacolgicos pueden estar en 2 estados de actividad; en forma