TTULO: Un modelo para la sacarificacin enzimtica contina de celulosa con la

eliminacin simultnea de jarabe de glucosa

La celulasa de Trichoderma viride se concentr en diversas membranas moleculares

de corte, y se estudiaron las tasas de flujo y la retencin de actividad en condiciones
de ultrafiltracin. Poco o nada de celulasa se descarg a travs de las membranas
probadas.
Las enzimas concentradas (58 veces) se usaron para sacarificar sustrato finamente
molido (Solka Floc) en un tanque agitado (STR) y reactores de membrana (MR).
BREVE RESUMEN:

Un recipiente de filtracin a presin provisto de una membrana para la eliminacin

simultnea de productos de bajo peso molecular (glucosa) del sistema de reaccin
(celulosa-celulasa) se designa como reactor de membrana. Se logr la digestin
continua de la suspensin de celulosa densa en el reactor de membrana. Utilizando
la membrana PM-30 (Amicon) se obtuvieron valores de flujo de masa
razonablemente altos (9.7-23.3 gals / pie * -da) al separar la glucosa de un digesto
de 307, suspensin de celulosa.
La membrana Abcor (HFA 300) fue igualmente eficaz y requiri menos cuidado en el
manejo. Casi 147, la concentracin de glucosa se ha logrado en menos de 50 horas
en STR al digerir una 307, suspensin de celulosa.
En base a los datos experimentales, se propone un sistema modelo para la sacarificacin
continua en estado estacionario del sustrato de tierra en el que hay una eliminacin continua
de jarabe de glucosa concentrado y una retroalimentacin de la enzima.
DOING:

TARUK K. GHOSE
AUTORE JOHN A. KOSTICK
S:

AO DE
PUBLICA Mayo, 7, 1970
CIN:

QU DESARROLLO EL AUTOR EN EL TRABAJO?

PARA QU SIRVE EL TRABAJO?

TTULO:
Hidrlisis enzimtica de residuos agroindustriales del banano
para la obtencin de jarabe glucosado aplicando tres pre
tratamientos
El objetivo de la presente investigacin fue comparar tres pre tratamientos
(molienda; molienda + hidrxido de sodio al 1%, y molienda + proceso
hidrotrmico) aplicados a cscara de banano maduro (sustrato) y su efecto
en la obtencin de jarabe glucosado mediante hidrlisis enzimtica con el
hongo Trichoderma ressei.
Se prepararon 27 medios de cultivos en diferentes concentraciones de
cscara de banano maduro (40%, 50% y 60%), factor A; sometidas a los
BREVE RESUMEN:

tres pretratamientos antes sealados, factor B. La biomasa obtenida fue

inoculada con conidias del hongo Trichoderma ressei en una concentracin
de 0,2; 0,4 y 0,6 g/L, factor C, dando un experimento factorial 3x3x3.
Adicionalmente, se evalu la variacin de estos factores en el tiempo
(cuatro factores).
Se realiz la incubacin por 144 horas a temperatura ambiente y pH 4,2-5.
Se midi la concentracin de glucosa presente en el hidrolizado utilizando
el mtodo del DNS (cido di nitrosalislico) en un espectrofotmetro UV
visible a 540 nm.
El tratamiento que produjo mayor concentracin de glucosa, fue T18
(molienda ms hidrxido de sodio-60% de cscara de banano maduro-0.6
g/L de hongo) al cabo de seis das de hidrlisis enzimtica, con 5,91 g/L de
glucosa, seguido de 4,15 g/L de T27 (molienda ms calentamiento-60% de
cscara de banano maduro-0.6 g/L de hongo) y 3,95 g/L de T9 (molienda -
60% de cscara de banano maduro-0.6 g/L de hongo) obtenidos durante el
mismo tiempo de experimentacin.
DOING:

HUGO ROMERO BONILLA

AUTORES: OSCAR TINOCO GMEZ
KERLY DVILA DVILA

AO DE
PUBLICACIN: 02 de Febrero del 2015

QU DESARROLLO EL AUTOR EN EL TRABAJO?

PARA QU SIRVE EL TRABAJO?

TTULO: HIDROLISIS DEL ALMIDON Y CELULOSA POR ACCION DE ACIDOS
En la industria alimentaria, muchos de los insumos y productos son los
hidrolizados del almidn, de esta hidrolisis se puede producir, dextrinas,
jarabes, maltodextrinas, entre otras; las cuales se utilizan como aditivos
BREVE RESUMEN:

alimentarios, ya sea como edulcorantes o aprovechando otras propiedades

funcionales de tales derivados.

En la prctica se quiso realizar la hidrolisis de almidn de YUCA, mediante

enzimas y con un cido (cido clorhdrico), para determinar cul de los
mtodos de hidrolisis es ms efectivo.
Fue mucho ms fcil hidrolizar el almidn de YUCA, debido a que la harina
contiene otros componentes ajenos al almidn.
DOING:
AUTORES:
estudiantes de ingeniera de alimentos IV Semestre de la Universidad de
Cartagena:
L. M. Castillo Caballero; J. M. Ortega Arrieta; M.Torres Hernandez; y T. M.
Vega Caate.

AO DE
PUBLICACIN: Mayo del 2013

QU DESARROLLO EL AUTOR EN EL TRABAJO?

PARA QU SIRVE EL TRABAJO?

TTULO: OBTENCIN DE JARABE DE GLUCOSA A PARTIR DE LA HIDRLISIS ENZIMTICA
DE ALMIDN DE BANANO, MUSA CAVENDISH
El banano (Musa cavendish) es una fruta que se produce en el Ecuador y
una parte de su produccin est siendo desechada.
Por lo que en este trabajo se estudi la utilizacin de este recurso para la
BREVE RESUMEN:

Conversin de su almidn en jarabe de glucosa, por medio enzimtico.

Previo a la hidrlisis se prepar un sustrato mediante lavado y secado.
El proceso de hidrlisis se realiz en dos etapas.
En la primera se utiliz -amilasa proveniente de Bacillus amyloliquefaciens
; la cual permiti degradar el almidn hasta dextrinas.
En esta etapa se realizaron pruebas para calcular el tiempo ptimo de hidrlisis,
el cual fue de 2 horas.
Tambin se analizaron las dextrinas obtenidas de la hidrlisis mediante cromatografa de
permeacin en gel, siendo estas de 9, 10 y 11 unidades de glucosa.
En la segunda etapa del proceso se utiliz amiloglucosidasa proveniente de Aspergillus
niger.En esta etapa se realiz un diseo experimental completamente al azar con modelo
Factorial de 3 correspondiente a la combinacin de tiempo y cantidad de enzima,
con dos repeticiones.
Las variables estudiadas fueron rendimiento y cristalinidad.
El tratamiento recomendado fue de 1,5 ml de enzima y 14 horas de hidrlisis.
Tratamiento que corresponde a un rendimiento de glucosa del 90,14%.
DOING:
AUTORES
: Carla Q uitiguia, Stalin Santacruz

AO DE
PUBLICA 30 de Julio del 2012
CIN:

QU DESARROLLO EL AUTOR EN EL TRABAJO?

PARA QU SIRVE EL TRABAJO?

BREVE RESUMEN:

DOING: ---
AUTORES:
AO DE PUBLICACIN:
QU DESARROLLO EL AUTOR EN EL TRABAJO?
Efecto del tamao de las partculas del sustrato en suspensiones densas a las
velocidades de reaccin iniciales Para el sustrato insoluble como la celulosa

Concentracin de celulasa de TV en membranas de tamiz molecular Se llevaron a

cabo varias pruebas iniciales sobre ultrafiltracin de diaflow de agua desionizada,
medio de TV mineral con y sin filtrados de cultivo Tween 80 y Tv con el fin de
determinar las caractersticas de flujo y adecuaciones de estas membranas para la
conEfecto del tamao de las partculas del sustrato en suspensiones densas a las
velocidades de reaccin iniciales Para el sustrato insoluble como la celulosa,
centracin de celulasa.

Un sistema modelo para Saccharafication celulosa en reactor tanque agitado y la

eliminacin de jarabe de glucosa en clulas de membrana
PARA QU SIRVE EL TRABAJO?
Estudios previos sobre sacarificacin enzimtica de celulosa2 s3 han demostrado la
posibilidad de una conversin continua del sustrato * Presentado en el Simposio ACS
sobre Industrial Microbial Enzymes, Nueva York, XY, EE. UU

Las posibilidades de concentracin de celulasa, ultrafiltracin de altas concentraciones

de soluciones de glucosa, separacin de azcares (glucosa-celobiosa) de digestin
densa de suspensiones de celulosa-celulasa a travs de
se han establecido membranas polimricas de diferentes tipos, se desarroll un
modelo que combina STR de un sistema denso de celulosa-celulosa y la separacin
de productos de reaccin del circuito.

..
DISCUSIONES Cuando la celulasa de Trichoderma viride se concentra por ultrafiltracin en una
membrana de tamiz molecular polimrica con un valor de corte de 30,000, ninguna de las enzimas se
encuentra en el efluente; sin embargo, la recuperacin de actividad en el concentrado es mucho menos del
100%. Esto puede deberse a deficiencias en el procedimiento de ensayo enzimtico, pero tambin es
probable que se produzca alguna inactivacin. Cuatro tipos diferentes de membranas de tamices
moleculares empleadas en los estudios mostraron diferentes tasas de permeacin de masa para celulasa en
galones / pie2 da (Tabla IV). Las tasas de masa para agua, medio Tv (sin Tween 80, celulosa o peptona),
medio Tv con Tween 80 al 0,1% y soluciones de glucosa de diferentes concentraciones tambin se
probaron en estas membranas. Los resultados muestran una observacin muy significativa relacionada
con el uso de tales membranas en la investigacin de celulasa. La presencia de Tween 80 al 0,1% en el
medio mineral Tv reduce el flujo de la masa de membrana varias veces. Este efecto es mucho ms
pronunciado en el caso de las pelculas de alto lmite molecular que para los valores ms bajos. Se sugiere
que el Tween 80 altamente activo en superficie (peso molecular lz00) entre en los canales de la estructura
porosa de las pelculas de polmero. En consecuencia, el detergente mole-

Las clulas reducen rpidamente el paso efectivo para la difusin de los solutos a una tasa
relativamente ms alta en el caso de las membranas de corte ms altas que las que
proporcionan una estructura menos porosa. Se ha observado una diferencia considerable en
las tasas de permeacin entre HFA 300, HFA 200 y UM 10 en la ultrafiltracin de la solucin de
glucosa (Fig. 2). Adems, la diferencia de estas tasas para UXI 10 entre 5yG y 10% de solucin
de glucosa es mucho menor que para HFA 200 o HFA 300. En la concentracin de celulasa, la
pelcula PbI 30 parece seguir una desaceleracin progresiva de velocidad mayor que
cualquiera de las UlI 10 o HFA 200. De manera similar, el HFA 300 comienza a un flujo de
masa inicial bastante alto, pero termina con un tercio de las velocidades iniciales de cualquiera
de las otras tres pelculas. Esto y PhI 30 pareceran ser los ms adecuados para nuestro
sistema. Estas pelculas tambin han demostrado ser muy eficaces (figura 7) en la separacin
de azcares (glucosa y celobiosa) a partir de digestiones compuestas de una suspensin
densa de celulosa en celulasa y grandes cantidades de azcares (14-157,). Siempre que la
polarizacin de concentracin se reduzca mediante un desplazamiento mecnico continuo de
la suspensin desde el lado de la piel de la pelcula, son posibles valores de flujo de masa
bastante elevados. Las pelculas HFA 200, HFA 300, PJI 30 no muestran signos de dao
incluso despus de un uso repetido; Las membranas UM 10 parecen ser ms sensibles al
manejo. Una clula de membrana se convirti en un reactor continuo que mantena la
sacarificacin constante y la eliminacin simultnea de productos a una alta conversin de
celulosa (> 76%). El rendimiento exitoso de dicho sistema de reaccin en una celda de
membrana es un ejemplo extremo de cmo una suspensin densa de partculas discretas
slidas que continuamente experimentan reduccin de tamaos no afecta el rendimiento de las
pelculas, tanto en trminos de selectividad como de permeacin de masa. Debido al rpido
transporte de los productos de reaccin a travs de la pelcula, el nivel de conversin en el lado
de la piel puede mantenerse bastante alto. Los resultados de los efectos del tamao de
partcula en las tasas iniciales de sacarificacin de celulosa en enzima concentrada
corroboraron las observaciones anteriores de J de que la velocidad rpida inicial es una
reaccin de primer orden. Para una celulosa ms cristalina con un mayor porcentaje de sitios
inaccesibles que en Solka Floc, la tasa inicial no parece ser lineal incluso en enzimas
concentradas (Fig. 5). Un estudio detallado de los resultados revela la posibilidad de mantener
una tasa muy alta de sacarificacin usando celulosa fina y enzima concentrada en
suspensiones bastante densas. Sin embargo, tal enfoque es justificable solo si es posible para
eliminar los productos tan rpido como se forman y para reutilizar la enzima. La alimentacin
independiente del sustrato y la enzima en STR para la sacarificacin continua mejora la tasa de
conversin. Nivel de conversin de equilibrio, que es similar a los informados en la comunicacin
anterior ,? se logra y se mantiene constantemente durante un perodo de tiempo considerable. Se obtiene
una reduccin en el tiempo de retencin (para alcanzar una tasa de sacarificacin dada) mediante un
efecto combinado de alimentacin de sustrato slido seco y el uso de una enzima Tv ms activa (QX'I
9123). En base a los datos obtenidos de los experimentos anteriores, se desarroll un sistema modelo
combinando una reaccin agitada de celulosa finamente molida en celulasa concentrada con una celda de
separacin de membrana (figura 10). Su entrada consisti en sustrato fino (seco) y pequeas cantidades
de filtrado de cultivo de TV diluido. El contenido de celulasa de esta entrada fue un porcentaje muy
pequeo de la actividad total del sistema. Se podra mantener un alto nivel de conversin en el sistema. El
resultado fue un jarabe de azcar equivalente al 77% de la celulosa sacarificada. El sistema tambin
mantuvo una gran concentracin de azcar en el flujo de alta masa, y un alto% de conversin (71%) de
sustrato. Tambin ofrece una economa de consumo de celulasa debido a la retroalimentacin de la
enzima, que no se practica en ninguno de los sistemas de reaccin enzimtica continuos o en lotes
establecidos. Se ha observado una acumulacin Xo de sustrato sin reaccionar o protenas desnaturalizadas
(celulasa inactivada) durante el perodo de 243.0 horas de funcionamiento semicontinuo. Este concepto de
reutilizacin continua de la enzima que se libera debido a la eliminacin de productos del sistema se
lograr mejor con un sustrato no modificado. Tal sustrato debera ser altamente reactivo pero sin tener
ningn sitio txico o inaccesible para la enzima. Sin embargo, el factor de control para que el modelo
funcione con xito es la velocidad de reaccin inicial de la formacin del producto y no el flujo de masa
de la eliminacin del producto. Se han demostrado varias posibilidades (Figuras 5, 7, Tabla 111) para
acumular glucosa alta en las primeras 24 horas. Los altos valores de flujo msico obtenidos en
suspensiones de ultrafiltracin de celulosa celulosa densa densa sin causar ningn dao a las pelculas de
membrana tambin son muy prometedores para el concepto. Para la produccin de glucosa bastante
concentrada (> layc) en el modelo desarrollado, es necesario utilizar un gran volumen de reactor y un
sistema de separacin comparativamente pequeo, o para alcanzar una velocidad de reaccin inicial alta
de una suspensin densa.

CONCLUSIN Se ha establecido un nuevo concepto de reaccin enzimtica rpida de sustrato insoluble,

separacin de productos y reutilizacin continua de las enzimas. Se ha demostrado la aplicacin de este
concepto al sistema de celulosa-celulosa para producir jarabes de glucosa. Las principales ventajas de este
enfoque para las reacciones involucradas en enzimas son la BIOTECNOLOGA Y LA BIOENERGA.
VOL. XII, JSSUE 6
SACCHARIFICACIN ENZIMTICA 945
los pesos moleculares del producto son menores que las enzimas o los sustratos son (a) eliminacin de
productos del sistema de reaccin sin contaminantes, (b) retencin y retroalimentacin de la enzima en el
sistema, (c) un alto nivel de conversin de el sustrato en productos, y (d) una alta velocidad de reaccin
inicial. El uso de membranas polimricas con valores de corte moleculares adecuados para concentrar las
enzimas y separar los productos del sistema de reaccin fue esencial para establecer este concepto.
Existen varias posibilidades de aplicacin del modelo a los sistemas de reaccin qumica, enzimtica y
microbiana que involucran productos de menor peso molecular. Estos productos pueden eliminarse del
sistema sin reactivos y catalizadores. Si las membranas estn disponibles a un precio razonablemente
bajo, el modelo se puede aplicar a los sistemas de sacarificacin de almidn en el mismo principio que se
ha demostrado claramente para el sistema celulosa-celulasa. Sin embargo, una cantidad considerable de
datos bsicos de ingeniera sobre el transporte, las constantes de reaccin, los tamaos relativos de los
sistemas de reaccin y separacin, los factores de sangrado y las inactivaciones de celulasa, etc. se
recogern en el modelo de estado estacionario que se est diseando ahora.
Los autores agradecen a los Estados Unidos. Army Natick Laboratories para poner a disposicin las
instalaciones para llevar a cabo los estudios informados aqu. El autor principal agradece a la Academia
Nacional de Ciencias, al Consejo Nacional de Investigaciones para el Premio de Cientfico Visitante, a l
y a la Universidad de Jadavpur, India, por conceder permiso para que pueda realizar los estudios
experimentales en Natick, Masachusetts. Los autores tambin aprecian el aliento, la cooperacin y las
sugerencias amistosas recibidas de la Dra. Mary Mandels y el Dr. E. T. Reese de los Laboratorios Natick
del Ejrcito de los EE. UU. En el transcurso del trabajo. Se agradece el inters demostrado por el Dr.
Hamed M. El-Bisi, Jefe de la Divisin de Microbiologa de la NLABS. Este documento informa
investigaciones realizadas en los Laboratorios Natick del Ejrcito de EE. UU. Y se le ha asignado el
nmero TP632 en la serie de documentos aprobados para su publicacin. Los hallazgos en este informe
no deben interpretarse como un puesto oficial del Departamento del Ejrcito. La mencin de nombres
comerciales en este informe no constituye un endoso oficial de aprobacin del uso de dichos artculos.