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ANALISIS DE LABORATORIO
El primer paso en el laboratorio es la determinacin de la Pureza de la muestra recibida, paso
seguido se realizan los otros anlisis que determinarn la calidad del lote.
Pureza
En la muestra seguramente habr adems de la semilla que se pretende sembrar otros cultivares o
especies, malezas e incluso una fraccin de materia inerte que incluye tierra, paja, glumas, insectos
o parte de ellos.
Esos materiales inertes as como las semillas extraas se deben considerar, ya que suman al peso
total de la muestra y en consecuencia, habr menor proporcin de la semilla deseada. Por lo tanto la
muestra de semillas se subdivide en las fracciones: Semilla pura, semillas extraas y material inerte.
Pureza fsica (% P), es el porcentaje en peso de semilla de la especie deseada respecto al total de la
muestra.
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Pureza gentica o varietal, se refiere al porcentaje en peso del cultivar deseado respecto al total de la
muestra.
Todas las pruebas de calidad que se realizan, se deben hacer de la fraccin semilla pura.
Germinacin
Es recomendable utilizar semilla que logre una rpida y uniforme germinacin en el campo, para
conseguir una adecuada emergencia y cobertura del suelo lo antes posible, ganndole a las malezas
y minimizando las prdidas de semilla por depredadores (insectos de suelo, roedores, pjaros). En
este sentido es importante que la semilla tenga un alto poder germinativo.
Poder Germinativo (% PG): es el porcentaje de semillas que germin y desarroll plntulas
normales, cuando se coloc en condiciones ambientales ptimas para su crecimiento.
En cada especie se ha determinado el tiempo y las condiciones ambientales ptimas para llevar a
cabo los anlisis (International Seed Testing Association, ISTA (1999); Instituto Nacional de Semillas,
INASE). En algunas especies se utiliza como lecho germinativo o sustrato papel (papel de filtro, papel
secante o toallas de papel), mientras que en otras se hace sobre arena.
El papel para la realizacin de los ensayos no debe producir per se efectos de toxicidad para evitar
confusiones a la hora de determinar anormalidades por patgenos. Tambin debe ser lo
suficientemente absorbente para contener la humedad necesaria para proveer a la semilla de una
adecuada hidratacin durante el proceso germinativo. Su trama debe evitar que las races lo perforen,
a fin de no confundir al analista que podra determinar anormalidades de races. Existen en el
mercado distintas calidades. Las semillas se colocan sobre el papel, entre papel o bien en rollo.
Tambin se utiliza arena de ro la que deber estar esterilizada para su utilizacin en los ensayos de
germinacin. La esterilizacin puede realizarse en estufa a 130 C durante 4 a 5 horas. Asimismo se
puede utilizar tierra, debidamente esterilizada pero su manipuleo es engorroso. Los envases para
realizar las pruebas pueden ser bandejas de distintas profundidades como as tambin vasos. En
todos los casos deben cerrarse, ya sea con tapa o bien con bolsa de polietileno a fin de evitar la
prdida de humedad del sustrato durante el ensayo.
Los anlisis que determinan el poder germinativo de una muestra de semillas se denominan "Ensayos
de germinacin". Se hacen respetando las condiciones de temperatura, luz, sustratos y tcnicas de
ruptura de latencia, que establecen las Reglas ISTA (1999).
Ejemplo de prescripciones para el ensayo de germinacin para tres especies cultivadas segn
Reglas ISTA (1999)
Viabilidad
Cuando hablamos de viabilidad de una semilla, nos referimos a si su embrin est vivo o no. Es decir
que la viabilidad de la semilla es la capacidad que tiene de germinar y generar una planta. Un lote de
semillas no pierde su viabilidad de forma repentina. La proporcin de semillas capaces de germinar
disminuye progresivamente a lo largo del tiempo. Las condiciones del almacenamiento
(fundamentalmente la temperatura y la humedad) afectan esta capacidad de mantenerse viables
(vivas). As tambin el manipuleo durante la cosecha y el transporte pueden afectar la viabilidad de
las semillas en la medida que se daa la testa.
Ensayos de viabilidad: 1.- Topogrfico de tetrazolio (se desarrolla en el Trabajo Prctico). 2.- Ensayos
rpidos de viabilidad: Prueba del "naftol blue black" (para maz), Prueba del verde rpido (maz y
leguminosas forrajeras), Prueba del cloruro frrico (leguminosas en general); Prueba del Ph del
exudado (colorimtrica o por medidor de Ph), Radiografas con rayos x (especies forestales).
Longevidad
Es el tiempo que las semillas permanecen viables. Puede haber semillas que germinan despus de
decenas o centenas de aos y esto se puede dar en semillas con una cubierta seminal dura.
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El caso ms extremo de retencin de viabilidad es el de las semillas de el loto Nelumbo nucifera,
cuyas semillas recogidas en un depsito de turba del antiguo lecho de un lago en Manchuria datado en
unos mil aos de antigedad (aunque otras pruebas parecen indicar que su edad era an superior), y
tras ser tratadas con escarificacin se obtuvo una germinacin del 100% (U.AL, 2003). Tanto el sauce
como el lamo son especies cuyas semillas tienen una longevidad promedio de 15 das. Pero se
puede decir que la longevidad media de la mayora de las especies vara entre los 5 y 25 aos (Perez
Garca y Pita Villamil, 2001)
Vigor
Es la condicin de un lote de semillas con capacidad para producir plntulas en un amplio rango de
condiciones ambientales. Las semillas deben germinar en situaciones de siembra desfavorables. El
lote debe tener un buen estado sanitario y viabilidad que asegure un buen comportamiento en el
campo.
En el laboratorio la condicin de Vigor es evaluada mediante diversas pruebas diseadas
especficamente para medir la capacidad de germinacin de una muestra luego de haber sido
sometida a un estrs determinado. Existen varios ensayos que se basan en distintas caractersticas
como por ejemplo, el Ensayo de crecimiento y evaluacin de plntulas (trigo, cebada, maz); Test de
fro (maz); Conductividad elctrica, envejecimiento acelerado, entre otros.
Sanidad
La buena sanidad es un atributo altamente deseable en un lote que se planea sembrar.
El estado sanitario de un lote de semillas se determina mediante distintas pruebas de sanidad:
Identificacin visual, Tcnicas de papel de Filtro (Blotter) y Tcnicas de Medios de Cultivo. El anlisis
sanitario permite establecer la presencia de gneros y especies de hongos, bacterias y virus
patgenos de manera tal que constituye una herramienta eficaz para decidir principios activos y
formulaciones adecuadas para su control (Craviotto, R. y Arango, MI, 2011)
Tabla 1. Cantidad de muestras primarias a tomar segn la semilla se halle 1a) fraccionada (bolsa,
etc) 1b) a granel (carro, silo, etc).
Las muestras primarias se debern extraer con un calador, al azar, de diferentes zonas: centro, base
y bordes y a distintas profundidades del camin, silo bolsa. Existen caladores especialmente
diseados para camin (2 metros) y para bolsas (0,5m).
Con la unin de las muestras primarias formamos una muestra compuesta de donde saldr la
muestra para laboratorio.
Tabla 2 Tamao de la muestra y mximo permitido del lote para diferentes especies.
Peso mnimo de muestra Peso mximo del lote
Especie g Kg
Soja 1.000 25.000
Sorgo 900 10.000
Trigo 1.000 25.000
Maz 1.000 40.000
Avena 1.000 25.000
Envo de muestras
La muestra deber ser enviada al laboratorio en una bolsa que permita la respiracin de la semilla
(papel, lona, tela, arpillera). Excepto que sea una muestra en la que se desee determinar porcentaje
de humedad, en ese caso deber ser en un envoltorio hermtico (bolsa de plstico, nylon).
Identificacin de la Muestra
Se debe adjuntar a la Muestra enviada toda la informacin posible referida al lote de semillas, como:
- Nombre y direccin del solicitante. Productor. Vendedor.
- Especie y cultivar.
- Nmero de lote (o marca).
- Tamao del lote o cantidad de envases.
- Lugar y fecha de muestreo.
- Cualquier otra informacin de inters (e.g. semilla peleteada).
- Tipo de anlisis solicitado.
Coeficiente de logro
Para lotes bien preparados 1 a 0.9
Para lotes regularmente preparados 0.8
Para lotes mal preparados 0.7 a 0.6
Se dar un ejemplo con Raigras anual para mostrar cmo se utilizan los resultados de los anlisis a
fin de calcular la densidad de siembra (Borrajo, C. y Ramrez, Mario, 2011).
Datos necesarios:
Peso de 1000 semillas P1000= 3 g.
Pureza % P = 80
Poder germinativo % PG = 80
Plantas establecidas % Logro = 70
-1 -2
Nmero de plantas deseadas/superficie: 3.000.000 pl ha 300 plantas m Aplicando la
frmula [1]
- -1
Kg ha 1 = 3.000.000 pl ha X 3 g = 20,1
80 X 80 X 70
Bibliografa consultada
Perez Garca; F. y Pita Villamil, J. M. 2001 Atributos y Conservacin de Semillas. Viabilidad, vigor,
longevidad y conservacin de semillas. Hojas Divulgadoras N2112- HD Universidad Politcnica de
Madrid. Ministerio de Agricultura Pesca y Alimentacin. Madrid, 16 pg.